中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H,以糖蜜(甘蔗柠糖后的废弃液,含较多蔗糖)为原料,在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料,期望提高甘蔗的整体利用价值,工艺流程如图,请回答问题。
(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率,可在液体培养基中将蔗糖作______ ,并不断提高其浓度,经多次传代培养以获得目标菌株。培养过程中宜采用______ 法对样品中的活菌进行接种和计数,以评估菌株增殖状况。若某次取样中,对菌液稀释了105倍后,在每个平板上涂布菌液的体积为0.1ml,平板上的平均菌落数为220个,则菌液中H菌的细胞数为_____ 个/L。菌落数目需要每隔一段时间统计一次,选取_____ 时的记录作为结果。
(2)发酵装置中搅拌器的作用是_____ (答出两点)。
(3)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性,研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统,其培养基盐浓度设为60g/L,pH为10,菌株H可正常持续发酵60d以上。分析该系统不需要灭菌的原因是_____ (答出两点)。
(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率,可在液体培养基中将蔗糖作
(2)发酵装置中搅拌器的作用是
(3)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性,研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统,其培养基盐浓度设为60g/L,pH为10,菌株H可正常持续发酵60d以上。分析该系统不需要灭菌的原因是
更新时间:2024-05-24 12:44:02
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【推荐1】高等植物细胞质壁分离过程中,引起50%左右细胞发生初始质壁分离的浓度为其细胞液等渗浓度。回答下列问题:
(1)植物细胞发生质壁分离的原因有___________ (答出两点即可)
(2)在发生质壁分离过程中,外界溶液、细胞质基质、细胞液浓度从大到小依次是___________ 。
(3)现提供紫色洋葱鳞片叶表皮细胞、蔗糖、蒸馏水等所需材料,请设计实验,测定洋葱鳞片叶表皮细胞的细胞液浓度相当于多少质量分数的蔗糖溶液。写出实验思路并预测结果:___________ 。
(4)农业生产中,农作物出现萎蔫现象,及时给根浇水可缓解萎蔫现象,其主要原因是___________ 。
(1)植物细胞发生质壁分离的原因有
(2)在发生质壁分离过程中,外界溶液、细胞质基质、细胞液浓度从大到小依次是
(3)现提供紫色洋葱鳞片叶表皮细胞、蔗糖、蒸馏水等所需材料,请设计实验,测定洋葱鳞片叶表皮细胞的细胞液浓度相当于多少质量分数的蔗糖溶液。写出实验思路并预测结果:
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【推荐2】成熟的植物细胞在较高浓度的外界溶液中,会发生质壁分离现象,图a是发生质壁分离的图像,图b是显微镜下观察到的某一时刻的植物细胞,请据图回答下列问题:
(1)图a中细胞的质壁分离指的是细胞壁和__________ 的分离;图a中2是__________ ;4是__________ ;5是__________ ;三者相当于半透膜。
(2)图b细胞在蔗糖溶液中质壁分离后,在该实验中,质壁之间充满的是____________ 。
(3)并不是该植物的所有活细胞均可发生质壁分离,能发生质壁分离的细胞还必须是___________ 。
(4)图b是某同学观察植物细胞质壁复原实验时拍下的显微照片,此时细胞液浓度与外界溶液浓度的关系是____________________ 。
(5)探究植物细胞的吸水和失水实验时,选用的材料是____________________ ,原因是________________________________________
(1)图a中细胞的质壁分离指的是细胞壁和
(2)图b细胞在蔗糖溶液中质壁分离后,在该实验中,质壁之间充满的是
(3)并不是该植物的所有活细胞均可发生质壁分离,能发生质壁分离的细胞还必须是
(4)图b是某同学观察植物细胞质壁复原实验时拍下的显微照片,此时细胞液浓度与外界溶液浓度的关系是
(5)探究植物细胞的吸水和失水实验时,选用的材料是
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【推荐3】成熟的植物活细胞在一定浓度的外界溶液中会发生质壁分离或复原现象,下图1中X、Y表示实验过程中同一细胞的两种形态。回答下列问题:
(1)图1两种细胞状态下,吸水能力X______ Y(填“大于”、“等于”或“小于”),原因是______ 。
(2)已知实验过程中,在T1和T2两个时刻分别用不同的溶液处理细胞,依次得到“X→Y”和“Y→X”的变化。请在图2的坐标系中完成实验过程中液泡体积变化的曲线,并在坐标系中时间轴下T1、T2时刻后的横线上填写滴加的相应溶液的序号(①0.3g/mL的蔗糖溶液、②清水)。
(3)将Y细胞放入清水中,一段时间后细胞体积______ (填“会”或“不会”)明显增大;细胞不会吸水涨破的原因是______ 。
(1)图1两种细胞状态下,吸水能力X
(2)已知实验过程中,在T1和T2两个时刻分别用不同的溶液处理细胞,依次得到“X→Y”和“Y→X”的变化。请在图2的坐标系中完成实验过程中液泡体积变化的曲线,并在坐标系中时间轴下T1、T2时刻后的横线上填写滴加的相应溶液的序号(①0.3g/mL的蔗糖溶液、②清水)。
(3)将Y细胞放入清水中,一段时间后细胞体积
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(0.65)
名校
【推荐1】某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题:
(1)培养基中加入化合物A的目的是________________ ,这种培养基属于__________ 培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的____________ 。实验需要振荡几次进行培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是__________ 。
(3)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,在进行下一区域划线前要将接种环___________________________________________________________________ 。
(4)研究人员统计污水池中“目的菌”的总数,选用10-4、10-5、10-6稀释液进行涂布平板,每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是_________________________________________________________ ,此对照实验的目的是______________________________________________________________________________ 。
(5)研究人员采用平板划线法纯化水样中分离出的细菌。操作时,在第二次及以后的划线,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________________________________ 。划线的某个平板培养后,第一划线区域的平行线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条平行线上无菌落,其他平行线上有菌落。造成第一条平行线无菌落可能的操作失误有_____________________ 。
(6)在示意图A和图B中,________ 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
(1)培养基中加入化合物A的目的是
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的
(3)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,在进行下一区域划线前要将接种环
(4)研究人员统计污水池中“目的菌”的总数,选用10-4、10-5、10-6稀释液进行涂布平板,每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是
(5)研究人员采用平板划线法纯化水样中分离出的细菌。操作时,在第二次及以后的划线,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是
(6)在示意图A和图B中,
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【推荐2】回答与微生物相关的问题:
某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物A,研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图1所示。
(1)培养基中加入化合物A的目的是_____ ,这种培养基属于_____ 培养基。“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_____ 。
(2)在培养基的配制过程中,操作方法包括以下步骤,其正确顺序为 。
①溶解②调pH值③定容④包扎⑤培养基的分装⑥称量⑦灭菌
临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。首先从病人身上取少量样本,然后按照一定步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
(3)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用_____ 法(填接种方法)获得图2效果。
(4)取该单菌落适当稀释,用_____ 法接种于固体培养基表面。
(5)接(4)题,接种后在37℃培养箱中培养24h,使微生物均匀生长,布满平板。在此题所需步骤中,下列选项不需要的是 。
下表为某患者体内的病菌对不同抗生素的敏感性实验结果(以抑菌圈直径表示),敏感标准是判断病菌对不同抗生素是否敏感的最小抑菌圈直径。
(6)据表分析,治疗该患者应选用的抗生素是_____ 。原因是_____ 。
某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物A,研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图1所示。
(1)培养基中加入化合物A的目的是
(2)在培养基的配制过程中,操作方法包括以下步骤,其正确顺序为 。
①溶解②调pH值③定容④包扎⑤培养基的分装⑥称量⑦灭菌
A.①②⑥⑤⑦③④ | B.⑥①③②⑤④⑦ |
C.⑥①②⑤④⑦③ | D.①②⑤④⑥⑦③ |
临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。首先从病人身上取少量样本,然后按照一定步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
(3)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用
(4)取该单菌落适当稀释,用
(5)接(4)题,接种后在37℃培养箱中培养24h,使微生物均匀生长,布满平板。在此题所需步骤中,下列选项不需要的是 。
A.酒精灯 | B.培养皿 | C.显微镜 | D.无菌水 |
E.无菌滴管 | F.接种环 | G.玻璃刮铲 |
下表为某患者体内的病菌对不同抗生素的敏感性实验结果(以抑菌圈直径表示),敏感标准是判断病菌对不同抗生素是否敏感的最小抑菌圈直径。
抗生素 | 抑菌圈直径(mm) | 敏感标准(mm) |
抗生素甲 | 17 | ≥18 |
抗生素乙 | 2 | ≥16 |
抗生素丙 | 16 | ≥15 |
抗生素丁 | 15 | ≥17 |
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(0.65)
真题
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【推荐3】自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性,能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。
(1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分,其中蛋白胨主要为细菌提供___________ 和维生素等。
(2)A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上,凝固形成薄层。培养一段时间后,薄层变浑浊(如图),表明______________________ 。(3)为分离出具有溶菌作用的细菌,需要合适的菌落密度,因此应将含菌量较高的湖泊水样___________ 后,依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后,能溶解A菌的菌落周围会出现___________ 。采用这种方法,研究者分离、培养并鉴定出P菌。
(4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式,请提出一个假设,该假设能用以下材料和设备加以验证(主要实验材料和设备:P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱)___________ 。
(1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分,其中蛋白胨主要为细菌提供
(2)A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上,凝固形成薄层。培养一段时间后,薄层变浑浊(如图),表明
(4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式,请提出一个假设,该假设能用以下材料和设备加以验证(主要实验材料和设备:P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱)
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【推荐1】红火蚁原分布于南美洲,现已成为世界性的外来危害物种,2011年华南地区也陆续出现蚁情。
(1)入侵华南某地后,短期内红火蚁种群数量呈____________ 型增长,从种群特征角度考虑,决定其增长的原因是____________ 。
(2)辛硫磷是一种有机磷杀虫剂,为测定其对不同虫态红火蚁的致死剂量,将原药溶于丙酮中配置不同浓度的辛硫磷药剂点于红火蚁胸部,记录24h死亡虫数并计算LC50(杀死50% 防治对象的药剂浓度),结果如下:
①本实验中辛硫磷药液的浓度范围要根据____________ 的实验结果来确定;每个药剂浓度的处理均设多次重复,目的是排除__________________ ,从而减少误差;本实验的对照组应设置为____________ 。
②实验中____________ 虫态的红火蚁对辛硫磷最敏感,控制该虫态红火蚁的数量,___________ (能/不能)持续有效的控制住蚁群的数量。
(3)有机磷农药进入土壤后,可被微生物分解成无毒或低毒的化合物,微生物体内最初的降解酶基因是
由___________ 产生的,从____________ 的环境中易分离到这类微生物。
(1)入侵华南某地后,短期内红火蚁种群数量呈
(2)辛硫磷是一种有机磷杀虫剂,为测定其对不同虫态红火蚁的致死剂量,将原药溶于丙酮中配置不同浓度的辛硫磷药剂点于红火蚁胸部,记录24h死亡虫数并计算LC50(杀死50% 防治对象的药剂浓度),结果如下:
虫态 | 小工蚁 | 兵蚁 | 有翅雄蚁 | 有翅雌蚁 | 蚁后 |
LC50(μg/ml) | 1.04 | 2.06 | 7.38 | 9.39 | 7.81 |
①本实验中辛硫磷药液的浓度范围要根据
②实验中
(3)有机磷农药进入土壤后,可被微生物分解成无毒或低毒的化合物,微生物体内最初的降解酶基因是
由
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【推荐2】我国的酿酒技术已经有4000多年的历史。早在几千年前,人们就开始进行酒、酱、醋、奶酪等的发酵生产,并积累了许多关于发酵的经验。回答下列与发酵生产有关的问题:
(1)用果汁制作果酒时,以果汁为原料,加入一定比例蔗糖,最后倒入酵母悬液中,混匀,加盖。发酵开始时,微生物的有氧呼吸会使发酵瓶内出现压强减小,原因可能是_________ ,该过程在酵母菌细胞的_________ 中进行,若检测产物中有无酒精,可使用酸性_________ 检验,呈现灰绿色。
(2)果汁饮料要求细菌总数<100个/mL,大肠杆菌<3个/mL。其中大肠杆菌的数目可以通过_________ 法来测定,将已知体积的水过滤后放在_________ 固体培养基上培养,在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色。
(3)为测得某受污染的果汁中细菌的情况,科研人员分离、培养细菌的流程如下图所示。
①细菌可以葡萄糖为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是_________ (答出两点)。用移液管吸取1mL样液后,注入①号试管中,使样本与稀释液充分混匀,依次操作后,④号试管中的细胞浓度稀释了_________ 倍。
②稀释后采用稀释涂布平板法将菌液接种到平板上。在培养过程中,单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的_________ (答出两点即可)等特征来初步区分不同种的微生物。
(1)用果汁制作果酒时,以果汁为原料,加入一定比例蔗糖,最后倒入酵母悬液中,混匀,加盖。发酵开始时,微生物的有氧呼吸会使发酵瓶内出现压强减小,原因可能是
(2)果汁饮料要求细菌总数<100个/mL,大肠杆菌<3个/mL。其中大肠杆菌的数目可以通过
(3)为测得某受污染的果汁中细菌的情况,科研人员分离、培养细菌的流程如下图所示。
①细菌可以葡萄糖为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是
②稀释后采用稀释涂布平板法将菌液接种到平板上。在培养过程中,单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的
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【推荐3】新冠疫情过后很多人养成了佩戴口罩的习惯,这是预防病原体感染的有效措施之一。使用过的口罩,如果没有妥善处理会对生态环境造成巨大威胁。某科研团队欲从不同环境的土壤中筛选出能高效降解一次性口罩(主要成分是由 C、 H 两种元素组成的聚丙烯纤维)的细菌。请据下图回答下列问题:
(1)该科研团队分离纯化目的菌时,培养基除以________________ 作为唯一碳源外,还需加入的营养成分有_______________________ 。
(2)若需进一步对土样中的细菌计数,可以通过上图2中采用的___________ 法 ,该方法的原理是___________________________ 。在图2中3个平板上分别滴加0.1mL稀释液,经适当培养后,平板上菌落数分别是102、116和97,则1g土壤中的活菌数约为_____________ 个。
(3)该科研团队又采用平板划线法进一步纯化降解菌,接种培养一段时间后,发现第一划线区不间断长满菌落,第二划线区上几乎无菌落,产生此种情况的最可能原因是_________ 。
(1)该科研团队分离纯化目的菌时,培养基除以
(2)若需进一步对土样中的细菌计数,可以通过上图2中采用的
(3)该科研团队又采用平板划线法进一步纯化降解菌,接种培养一段时间后,发现第一划线区不间断长满菌落,第二划线区上几乎无菌落,产生此种情况的最可能原因是
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(0.65)
解题方法
【推荐1】果酒、果醋、味精都是利用发酵技术生产的。味精(也叫谷氨酸钠),工业生产中常用微生物发酵法制取。下图表示谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的部分代谢途径。请回答以下问题:
(1)制作果酒和果醋时,利用到的主要微生物分别是________ 和__________ ,与前者相比,后者在结构上的显著特点是_________ 。
(2)谷氨酸发酵的培养基成分有豆饼水解液、玉米浆、尿素、硫酸镁、生物素等,从物理性质看,该培养基属于________ 培养基;从营养成分分析,尿素主要为谷氨酸棒状杆菌的代谢提供__________ 。要测定谷氨酸棒状杆菌的数量,可采用的计数方法有显微镜直接计数法和_________ ,前者计数的结果比后者计数的结果值更__________ (填“大”或“小”)。
(3)研究发现:在无氧条件下,谷氨酸棒状杆菌代谢产物是乳酸或琥珀酸,谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要不断地通入无菌空气,并不断搅拌。当培养基中碳氮比为4:1时,菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少;当碳氮比为3:1时,菌体繁殖受抑制,但谷氨酸的合成量大增。发酵过程中,搅拌的作用是_________ ,由此推出谷氨酸发酵应控制的发酵条件是_________ 。
(4)由图可知,谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸,则会抑制谷氨酸脱氢酶的活性使谷氨酸产量下降。如何进一步提高谷氨酸的产量,请提出相关的解决思路________ 。
(1)制作果酒和果醋时,利用到的主要微生物分别是
(2)谷氨酸发酵的培养基成分有豆饼水解液、玉米浆、尿素、硫酸镁、生物素等,从物理性质看,该培养基属于
(3)研究发现:在无氧条件下,谷氨酸棒状杆菌代谢产物是乳酸或琥珀酸,谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要不断地通入无菌空气,并不断搅拌。当培养基中碳氮比为4:1时,菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少;当碳氮比为3:1时,菌体繁殖受抑制,但谷氨酸的合成量大增。发酵过程中,搅拌的作用是
(4)由图可知,谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸,则会抑制谷氨酸脱氢酶的活性使谷氨酸产量下降。如何进一步提高谷氨酸的产量,请提出相关的解决思路
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(0.65)
【推荐2】谷氨酸棒状杆菌是一种好氧菌,它是谷氨酸发酵的常用菌种。细菌内合成的生物素参与细胞膜的合成,不能合成生物素的细菌细胞膜存在缺陷。如图为通过发酵工程生产谷氨酸的生产流程,请回答下列问题:
(1)从自然界分离的菌种往往达不到生产要求,从改变微生物遗传特性的角度出发,培育出优良菌种的育种方法主要有____________________________ (至少答出一点)。
(2)扩大培养时所用的培养基,从物理性质来看是___________ (填“固体”或“液体”")培养基,从用途来看是__________ (填“鉴别”或“选择”)培养基,扩大培养的目的是______________ 。
(3)对谷氨酸代谢的控制,除了改变微生物的遗传特性外,还需要控制生产过程中的发酵条件,比如_________ (至少答出两点)。为了从发酵液中分离提纯谷氨酸,可将发酵液灭菌后进行萃取→过滤→____ , 然后用一定手段进行结晶,可得到纯净的谷氨酸晶体。
(4)谷氨酸棒状杆菌在合成谷氨酸的过程中,当细胞中谷氨酸积累过多时会抑制谷氨酸脱氢酶的活性,从而减少谷氨酸的合成,这是一种________ 调节机制。在生产上一般选用生物素合成_________ (填“高表达”“正常”或“缺陷”)型细菌作为菌种,可以在一定程度上解除谷氨酸合成过量对谷氨酸脱氢酶活性的抑制,从而大量生产谷氨酸。
(1)从自然界分离的菌种往往达不到生产要求,从改变微生物遗传特性的角度出发,培育出优良菌种的育种方法主要有
(2)扩大培养时所用的培养基,从物理性质来看是
(3)对谷氨酸代谢的控制,除了改变微生物的遗传特性外,还需要控制生产过程中的发酵条件,比如
(4)谷氨酸棒状杆菌在合成谷氨酸的过程中,当细胞中谷氨酸积累过多时会抑制谷氨酸脱氢酶的活性,从而减少谷氨酸的合成,这是一种
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适中
(0.65)
【推荐3】花生是我国重要的经济作物之一,其根系在生长过程中,会分泌苯甲酸、苯乙酮、丙三醇、苯甲醛等物质,这些物质会抑制青枯病原菌和其他植物的生长。由于土地限制等原因,同一土地多年连续种植现象十分普遍,这些物质产生的自毒作用越来越明显,造成花生产量下降。科研人员已采用“采集根际土壤→选择培养→分离、纯化培养→菌种鉴定”途径筛选出将苯甲酸降解为无毒小分子(CO2和H2O等)的根际菌。请回答下列相关问题:
(1)花生根系分泌的苯甲酸等物质属于其_____________ (填“初生”或“次生”)代谢物。
(2)为什么要从连续种植花生的土壤中寻找降解苯甲酸的根际菌?__________ 。
(3)为确保能够分离得到分解苯甲酸的微生物,常将土壤稀释液先进行选择培养,该培养基的碳源要求为____________ ,进行该步操作的目的是__________ 。
(4)分离、纯化培养时,可采用________________ 接种,从物理形态角度考虑,该培养基属于_________________ 培养基。
(5)获得的菌种可通过______________ 工程大量增殖,并作为微生物肥料施用于土壤。采用微生物降解、修复土壤技术的优点有__________ 。
(1)花生根系分泌的苯甲酸等物质属于其
(2)为什么要从连续种植花生的土壤中寻找降解苯甲酸的根际菌?
(3)为确保能够分离得到分解苯甲酸的微生物,常将土壤稀释液先进行选择培养,该培养基的碳源要求为
(4)分离、纯化培养时,可采用
(5)获得的菌种可通过
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