【推荐1】Ⅰ.抗生素能选择性地作用于细菌体细胞DNA、RNA和蛋白质合成系统的特定环节，干扰细胞的代谢作用，妨碍生命活动或使其停止生长，甚至死亡。通过基因工程将抗生素基因转入植物体内，可增强其抗细菌病的能力。请填写下列相关内容：
（1）抗生素发挥作用的主要场所是________________________。
（2）在提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是________________。以mRNA为材料获得DNA是构建_________________文库的主要方法。
（3）若要使目的基因在受体细胞中表达，需要构建基因表达载体，包含__________、_________、启动子、终止子、复制原点。
（4）将目的基因导入植物体细胞通常用_____________，原理是利用其菌体中质粒的T-DNA片段可___________________的特点。
（5）若获得的转基因植株（抗生素基因已经整合到植物的基因组中）抗细菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是_______________________________。
Ⅱ．现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的部分细胞结构表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。请回答：
（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后通过______________的方法，从培养的细胞中取出________________注入B品种牛的去核卵母细胞，经过某种刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为_______________。将该胚胎移入代孕母牛的子宫中，通过培育可达到目的。
（2）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量___________,为解决这一问题，可以用_________________激素处理B品种母牛。

【推荐3】供体器官短缺是限制器官移植的重要因素，而异种器官移植会存在内源病毒跨种传播、免疫排斥等问题。某科研团队对猪的成纤维细胞进行了基因编辑，根除了猪细胞中所有内源性逆转录病毒（PERVs）的活性后，再通过核移植技术成功获得了第一批“无毒”的克隆猪，基本流程如下图所示。
   
(1)从猪的卵巢中采集卵母细胞后需要在体外培养到_______期，去核过程通常使用的去核方法是__________________。
(2)过程③形成的重构胚还需用物理或化学方法激活，其目的是_______________________________。为获得更多的“无毒”猪，可以对早期胚胎进行_____________操作后再进行胚胎移植，若对囊胚进行此操作，需要注意的是_________________________。
(3)重构胚成活率低是限制核移植成功的主要因素之一，研究人员探究了不同浓度的TSA（组蛋白去乙酰化酶抑制剂）对猪重构胚发育成囊胚的影响，结果如下表所示：

TSA浓度（nM）	0	20	40	60
囊胚的形成率（%）	13%	22.8%	35.7%	21%

通过上表，可以得出结论：________________________。
(4)该批无毒猪的器官直接用于人体器官移植会产生免疫排斥，为了解决这一问题，可以___________________________________（写出1种方法），再结合克隆技术培育出可用于移植的猪器官。

【推荐1】美国及日本两个研究团队的报告中证实皮肤细胞经过“基因直接重组”后可以转化成为具有胚胎细胞特性的细胞。这项发现一方面解决了利用胚胎进行干细胞研究的道德争议，另一方面也使得干细胞研究的来源更不受限。请回答下列有关胚胎工程的若干问题。
(1)人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于________ 阶段。
(2)胚胎工程中的胚胎移植实际上是生产胚胎的________和孕育胚胎的________共同繁殖后代的过程。其生理学基础主要有哪些？______________ （至少答出两点）。
(3)美日科学家利用病毒分别将四个基因导入皮肤细胞，促使普通的皮肤细胞产生变化，最后成为带有胚胎干细胞性质的细胞。在基因工程中，这四个基因称为_________，在基因工程中常用的工具酶有_________。
(4)在胚胎工程中可以利用连续胚胎细胞核移植的方式培育动物，该技术的优点是_________________________________。

【推荐2】下图是用治疗性克隆的方法治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答:

（1）过程①中，科学家常采用________消化处理，并应用液体培养基培养获得______。用于核移植的细胞，通常采用10代以内的细胞，原因是_________。
（2）过程②选取_______期的卵母细胞作为受体细胞，常采用显微操作去核法去除细胞核，除此以外还可以采用_________方法达到去除细胞核的目的。
（3）过程③需用物理或化学方法激活受体细胞，其目的是_______________。
（4）图中Ⅱ所示的细胞是从囊胚的内细胞团中分离出的__________细胞，其在形态上具有______________的特性。
（5）图中④将胰岛素基闪导入Ⅱ获得重组细胞B的最有效方法是_________。
（6）过程⑤应将重组细胞B放在添加_______的培养液中定向诱导分化，产生胰岛B细胞。
（7）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是________，该种基因治疗所属类型为_______________。

【推荐3】I．胰岛素自1922年用于临床以来，就成为治疗糖尿病的特效药物。最初用丁临床的胰岛素几乎都是从猪、牛胰脏中提取的。随着基因工程技术的发展，人们通过大肠杆菌、酵母菌生产重组人胰岛素逐渐取代了动物胰岛素．这种胰岛素的结构与人体自身分泌的胰岛素结构完全相同，但无法完全模拟生理胰岛素曲线，容易导致血糖波动，甚至导致低血糖发生。
（1）利用大肠杆菌生产重组人胰岛素时，常用反转录法合成目的基因，与从基因组文库获得的基因相比，此方法获得的目的基因不含______。
（2）与大肠杆菌相比，利用酵母菌生产胰岛素的优势有______。
（3）上世纪90年代，科学家通过改变胰岛素的氨基酸序列和结构，研制出能更好模拟生理胰岛素分泌特点的胰岛素类似物，该技术属于______。对胰岛素的结构进行设计改造，最终还必须通过______来完成。改造得到的基因完成表达时，遗传信息的传递过程可表示为______。
Ⅱ．哺乳动物的胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。回答下列问题：

（1）胚胎发育的早期有一段时间是在透明带内进行的，这一时期称为卵裂期，其特点是______。（答出两点即可）
（2）做DNA分析性别鉴定时，一般选用囊胚中的细胞______（填图中字母）进行操作，理由是______。
（3）胚胎干细胞是研究体外细胞分化的理想材料。在培养胚胎干细胞的培养液中加入______，可以得到细胞c、d、e。从功能特性上看，胚胎干细胞与细胞c、d、e的区别是______。

【推荐1】根据下列有关胚胎工程的示意图，分析回答下列问题：

（1）C细胞应选择处于________________的细胞；体外受精前要对B细胞进行________________处理。B细胞和C细胞在体外受精后，应将受精卵移入______培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。
（2）将早期胚胎注入D羊子宫内的技术叫________________，D羊对外来胚胎不发生________________，这使外来胚胎在其体内存活成为了可能。在此过程中若想得到具有相同遗传物质的两个子代E羊，可通过________________技术来实现。
（3）图中的早期胚胎通常处于________________阶段。获得的早期胚胎若暂不移植给受体，可使用________________法保存。
（4）从早期胚胎中分离出的ES细胞可诱导分化出不同的组织细胞，这是因为在功能上，ES细胞具有____________________。ES细胞具有体积小、________________、核仁明显的特点。

【推荐3】请回答下列有关胚胎工程和基因工程等方面的问题：
（1）利用基因工程可以获得转基因羊。若要使获得的转基因羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶Ⅲ蛋白，构建基因表达载体时必须把目的基因与________________基因的启动子结合，使用该启动子的原因是__________________。构建好的基因表达载体需含有目的基因、启动子、______________和标记基因共五部分。
（2）应用PCR扩增目的基因时，需要在基因组数据库中查询目的基因的____________序列，以便合成引物。PCR过程第一轮循环的模板是________________。利用PCR技术将该基因扩增时，其原理为______________________。
（3）目前常用的措施是将该基因表达载体导入羊的______________细胞，导入方法是__________________
（4）体外受精时，需要对精子进行______________处理，卵母细胞需要培养至______________时期。

【推荐1】如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请据图回答下列问题。

（1）克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比，特有的技术手段是__________。两种动物繁殖的方式相比，实质性的区别为前者是__________，后者是__________。
（2）一般用__________激素对供体母牛做超数排卵处理，从早期胚胎获得到的胚胎干细胞在功能上具有____________________。
（3）为了提高胚胎的利用率，可以采用_____________________技术处理早期胚胎，如果选择囊胚阶段的早期胚胎，在分割时需要注意__________。
（4）如果培育转基因荷斯坦奶牛，可采用__________技术将药用蛋白基因导入到受精卵中，并采用__________技术检测受体细胞中的染色体DNA上是否插入了目的基因。

【推荐2】人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因奶牛，并通过乳腺生物反应器生产HSA，其主要技术流程如图Ⅰ所示。请分析并回答下列问题：

   

(1)图1中为获取大量的去核卵母细胞，往往需对相应母牛使用_____________处理，使其超数排卵，收集并选取处在_____________时期的卵母细胞，通过显微操作去除细胞核。供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是____________。
(2)胚胎移植时，为使代孕母牛能处于适合的生理状态，需要用激素对其进行____________处理。为获得更多转基因母牛，可在胚胎移植前对胚胎进行_____________。
(3)SRY-PCR法性别鉴定的基本程序是：提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系扩增SRY基因（Y染色体上特有的性别决定基因）片段，然后对扩增产物进行检测。
①PCR反应体系中通常含有模板DNA、引物、Taq酶、____________、缓冲液等。根据SRY基因序列设计的引物长度一般为20~24个核苷酸，其不宜过短的原因主要是_____________，两种引物中G+C的含量相差不宜过大，原因主要是_____________。
②PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为____________________ 三步。在循环之前，常要进行一次预变性，其目的是____________________。
③细胞核内DNA的复制过程如图2所示，其中有一条子链是先合成短的脱氧核苷酸链片段（称为冈崎片段），再形成较长的分子，而在PCR过程中无冈崎片段形成的原因是_____________________________。

   

④若扩增产物含大量SRY基因片段，则该种牛胎儿成纤维细胞_____________（填“能”或“不能”）用作技术流程中转化过程的受体细胞。

【推荐3】经过不断努力，在2021年（牛年）春节期间，牦牛产业帮扶项目初见成效，甘南藏族自治州夏河县陆续迎来首批近10头特殊的贺岁“牛宝宝”——通过胚胎移植技术诞生的优质黑安格斯种牛。
(1)胚胎工程中任何一项技术获得的胚胎，最后还需通过________技术才能发育成后代个体。此技术对代孕受体的要求是______。因此要对安格斯牛和牦牛进行______处理。在项目实施过程中，促使安格斯牛多排卵的激素一般是______。
(2)当胚胎发育到_____阶段时，可植入牦牛体内，胚胎在此代孕母体内能存活的生理学基础是______。
(3)若需要获得多个此优良性状的胚胎，要将______均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。