人溶菌酶(HLZ)是一种具有抑菌活性的蛋白质,在食品保鲜、抗菌消炎等方面广泛应用。为提高溶菌酶的产量,研究人员设计了利用基因工程高效生产溶菌酶的方案,流程如图所示。
(1)溶菌酶能够破坏多种细菌的细胞壁,说明溶菌酶参与人体______ (填“非特异性”或“特异性”)免疫,理由是______ 。
(2)提取出的HLZ基因不具备限制酶切割位点,利用PCR技术对HLZ基因进行扩增时,应在所用两种引物的______ 端添加______ 识别序列,以实现HLZ基因与pPIC9K质粒的正向连接。过程①中将重组质粒导入大肠杆菌的目的是______ 。
(3)过程④中,每隔一段时间取1mL酵母发酵液,离心后取______ (填“上清液”或“沉淀”)进行蛋白质凝胶电泳,得到结果如下图,已知HLZ的理论分子量约为16ku。结果显示本实验中HLZ酵母表达体系初步构建成功,判断依据是______ 。如需进一步确认该蛋白质为HLZ,可采取的措施为______ 。
(1)溶菌酶能够破坏多种细菌的细胞壁,说明溶菌酶参与人体
(2)提取出的HLZ基因不具备限制酶切割位点,利用PCR技术对HLZ基因进行扩增时,应在所用两种引物的
(3)过程④中,每隔一段时间取1mL酵母发酵液,离心后取
更新时间:2024-05-30 11:20:22
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【推荐1】水痘是由水痘—带状疱疹病毒(VZV)引起的急性呼吸道传染病,多见于儿童,临床特征为 全身出现丘疹、水疱。下图为免疫细胞参与机体免疫的机制图解,其中①表示抗原,②③表示某种化合物, ④⑤⑥⑦⑧⑨代表某种细胞,其中抗原呈递细胞能够吞噬病原体。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/25/be2e2c4f-52c6-405e-bbe0-1fbc066d572d.png?resizew=388)
(1)呼吸道黏膜受损者更易被(VZV)感染,原因是_____ 。
(2)细胞④成熟的场所是______ (器官)。
(3)VZV初次入侵机体时,细胞⑤的增殖分化需要的信号刺激是______ ;⑥是______ ,其分泌的②与抗原结合形成_____ ,进而被吞噬细胞消化。
(4)水痘临床诊断时,须注意与荨麻疹相区分。与水痘的发病机理不同,某些花粉引起的荨麻疹是机体免疫系统_____ 功能过强的表现。
(5)研究发现接种水痘疫苗后,如再次接触到(VZV),症状普遍比未接种疫苗的患者轻,请从免疫调节的角度阐述原因:________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/25/be2e2c4f-52c6-405e-bbe0-1fbc066d572d.png?resizew=388)
(1)呼吸道黏膜受损者更易被(VZV)感染,原因是
(2)细胞④成熟的场所是
(3)VZV初次入侵机体时,细胞⑤的增殖分化需要的信号刺激是
(4)水痘临床诊断时,须注意与荨麻疹相区分。与水痘的发病机理不同,某些花粉引起的荨麻疹是机体免疫系统
(5)研究发现接种水痘疫苗后,如再次接触到(VZV),症状普遍比未接种疫苗的患者轻,请从免疫调节的角度阐述原因:
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【推荐2】病毒甲通过呼吸道感染动物乙后,可引起乙的B淋巴细胞破裂、T淋巴细胞功能丧失,导致其患肿瘤病,患病动物更易被其他病原体感染。给新生的乙个体接种甲疫苗可预防该肿瘤病。回答下列问题:
(1)新生的乙个体接种甲疫苗后,甲疫苗作为________ ,可诱导T细胞可产生________ ,从而促进B淋巴细胞增殖、分化成________ 和记忆细胞。
(2)已知病毒甲导致的肿瘤在健康人群中罕见,但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分________ 细胞,降低了患者免疫系统的____________ 功能。某种分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV,检测的原理是________ 。
(3)感染病毒甲后,患病的乙更易被其他病原体感染的原因是________________ 。
(4)非特异性免疫的特点是________________________________________________
(1)新生的乙个体接种甲疫苗后,甲疫苗作为
(2)已知病毒甲导致的肿瘤在健康人群中罕见,但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分
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(4)非特异性免疫的特点是
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【推荐1】科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组,并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2011/10/24/1566967829921792/1566967832862720/STEM/de8157ab-d84a-4502-8fad-ce874177ae16.png?resizew=472)
(1)步骤①和②中常用的工具酶是_____ 。
(2)经过①②步骤后,有些质粒上的_____ 基因内插入了外源目的基因,形成重组质粒。
(3)步骤③是_____ 的过程。为了促进该过程,应该用_____ 处理大肠杆菌。
(4)步骤④:将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养,目的是筛选_____ 。能在C中生长的大肠杆菌有_____ 种。
(5)步骤⑤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落,分别接种到D(含氨苄青霉素和四环素)和E(含四环素)两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于(选填“D”或“E”)_____ 上,请在图中相应的位置上圈出来。_____
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2011/10/24/1566967829921792/1566967832862720/STEM/de8157ab-d84a-4502-8fad-ce874177ae16.png?resizew=472)
(1)步骤①和②中常用的工具酶是
(2)经过①②步骤后,有些质粒上的
(3)步骤③是
(4)步骤④:将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养,目的是筛选
(5)步骤⑤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落,分别接种到D(含氨苄青霉素和四环素)和E(含四环素)两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于(选填“D”或“E”)
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解题方法
【推荐2】蛋白质甲基化是最广泛的翻译后修饰之一,组蛋白甲基转移酶G9a主要修饰蛋白质中赖氨酸、精氨酸,从而调控基因表达。酵母细胞基因转录因子BD(含赖氨酸)和AD两结构域结合时才能激活转录,两结构域分开时不能激活转录。为了筛选赖氨酸甲基化阅读器(只有甲基化的赖氨酸才能被“阅读器”识别),研究人员进行了如图1所示实验,其中TRP1、LEU2分别是色氨酸、亮氨酸合成基因,G9a基因表达产物(含G9a)能与BD基因表达产物结合,当赖氨酸甲基化阅读器与G9a、BD复合体相互作用后,BD就可以与AD一起激活报告基因LacZ转录,如图2。请回答下列问题。_____ (填“属于”或“不属于”)基因突变,_____ (填“会”或“不会”)遗传给后代。
(2)为了使“阅读器”基因定向插入载体中,通过PCR技术扩增“阅读器”基因时,需在引物5'端添加_____ 序列。
(3)质粒甲、乙导入代谢缺陷型酵母菌时,需用醋酸锂(LiAC)处理酵母菌,其目的是_____ 。两培养基中需分别不添加_____ 才可筛选出导入重组质粒的酵母菌。转化后需要在相应的培养基上培养和筛选,选择导入了_____ (填“融合表达载体”“报告基因载体”或“融合表达载体和报告基因载体”)的酵母细胞。
(4)已知LacZ基因表达产物,能将无色化合物X-gal水解成蓝色产物。Y2H和Y187接合生殖、培养时,如需筛选Y3H中含所需的“阅读器”,所需要进行的操作是:_____ 。
(2)为了使“阅读器”基因定向插入载体中,通过PCR技术扩增“阅读器”基因时,需在引物5'端添加
(3)质粒甲、乙导入代谢缺陷型酵母菌时,需用醋酸锂(LiAC)处理酵母菌,其目的是
(4)已知LacZ基因表达产物,能将无色化合物X-gal水解成蓝色产物。Y2H和Y187接合生殖、培养时,如需筛选Y3H中含所需的“阅读器”,所需要进行的操作是:
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【推荐3】口蹄疫病毒(FMDV)是一种RNA病毒。VPI蛋白是其主要的抗原蛋白。科研工作者利用基因工程构建了两种新型FMDV疫苗:DNA疫苗和VPI蛋白疫苗。其制作流程如图所示。回答下列相关问题:
(1)图中构建口蹄疫病毒(FMDV)cDNA的过程叫作________ 。若将大肠杆菌作为受体细胞,则其优点是_______ (答出2点)。
(2)可利用_______ 技术扩增VPI蛋白基因,从引物的角度分析,该技术可以特异性扩增VPI蛋白基因的原因是_____ 。
(3)重组质粒构建的过程用到的工具酶有_______ 。为了在一定条件下能驱动目的基因的转录,重组质粒需要具备________ 结构。
(4)制备DNA疫苗,即将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上,然后将质粒直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答的疫苗。与VPI蛋白疫苗相比,DNA疫苗的优势有________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/6/2/00d28357-121d-487f-b2a2-44f8ffd734c4.png?resizew=651)
(1)图中构建口蹄疫病毒(FMDV)cDNA的过程叫作
(2)可利用
(3)重组质粒构建的过程用到的工具酶有
(4)制备DNA疫苗,即将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上,然后将质粒直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答的疫苗。与VPI蛋白疫苗相比,DNA疫苗的优势有
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