【推荐1】分离筛选降解纤维素能力强的微生物，对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏等配制的培养基，成功地筛选到了能产生纤维素酶的微生物。请回答下列问题：
(1)培养基中加入的化合物A是_____。本实验将样品稀释涂布到鉴别培养基之前要进行选择培养，目的是_____。
(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，可向培养基中加入刚果红染剂（能与纤维素等多糖形成红色复合物的染剂），等培养基上长出菌落后，能产生纤维素酶的菌落周围会出现_____。
(3)为在培养基表面形成单个菌落，将平板分为4个区域进行划线，理论上需要灼烧接种环_____次。
(4)用三种菌株对秸秆进行处理，并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定，结果如图。据图分析可知，三种菌株对_____的降解作用最强。与第5天结果相比，第10天秸秆各组分中_____的降解率变化最大。

【推荐2】自然界的微生物包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体。它们个体微小，与人类关系密切，涵盖了有益、有害的众多种类，广泛涉及食品、医药、工农业，环保等诸多领域。从众多微生物中分离出可用于生产的优良的纤维素分解菌，常用的流程是采集菌样→选择培养→纯种分离→性能测定。回答下列问题：
(1)采集纤维素分解菌的菌样时，最好在__________的土壤中取样。土壤是微生物的天然培养基，而配制人工培养基时，培养基中的营养成分除了含有无机盐外，一般还有__________等。
(2)进行选择培养时，所用培养基中__________（填“有”或“没有"）凝固剂，理由是__________。
(3)纯种分离时，常用的接种方法中可用于测定样液中微生物数量的是__________。
(4)性能测定时，将纯化后的目的菌接种在含有__________（染色剂）的培养基上，然后将平板置于恒温培养箱中培养适宜时间，这些平板上透明圈最大的单菌落中的纤维素分解菌分解纤维素的能力不一定是最强的，原因是__________。

【推荐3】地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%～60%被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶，某研究小组欲从土壤中分离得到纤维素分解菌，其操作流程如下所示，请回答相关问题。
①土壤取样→②选择培养→③梯度稀释→④鉴别培养基培养→⑤挑选产生透明圈的菌落
(1)研究小组将滤纸埋在土壤里，30天后再从已经腐烂的滤纸上提取土样筛选纤维素分解菌。请说说这么做的道理是什么？_____。
(2)上述流程②成功的关键，是选择培养基的配方中要以_____唯一碳源。
(3)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术就是围绕如何避免杂菌的污染展开的。请列举几项该研究小组应该实施的无菌操作（如实验操作应在酒精灯火焰附近进行）_____（答出两点即可）。为了证明培养基是否受到外来杂菌污染。需要设置空白对照，对照培养基的处理是_____。
(4)若用稀释涂布平板法来统计纤维素分解菌的菌落数量，发现测定的结果往往比实际活菌数量要少，原因是_____。

【推荐1】请回答下列与基因工程有关的问题：
（1）将目的基因插入到T-DNA中用到的工具酶有____________________，在利用农杆菌转化法时，需将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA中，原因是_________________________。
（2）在乙肝疫苗的生产中，应该选择________________（填抗原或抗体）基因作为目的基因，该目的基因利用____________________技术进行扩增，该技术需要用到____________________酶。在基因表达载体中标记基因的作用是________________________________。
（3）用基因工程生产乙肝疫苗时，若选用细菌为受体细胞，则不能得到引起免疫反应的基因表达产物，其原因是：______________。

【推荐2】人的血清白蛋白在临床上需求量很大，利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的血清白蛋白。回答问题：
（1）在培育转基因奶牛时，血清白蛋白基因应与多种调控组建重组在一起，其中_______应连接在目的基因首端。通过______________技术将其导入奶牛的受精卵中。
（2）导入目的基因的受精卵需培养到__________________阶段才可进行胚胎移植。暂不移入的早期胚胎可使用______________方法保存。
（3）进行胚胎移植前需要进行_________，目前最有效最准确的方法是SRY — PCR法，操作的基本程序是:从被检测的囊胚中取出几个_________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，若未出现杂交链，则胚胎性别为____________，而基因工程中的______________步骤也会用到DNA探针。

【推荐3】口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种动物传染病,目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗。请回答下列问题:

（1）如图是VP1基因、农杆菌Ti质粒结构示意图,若用以构建具有VP1基因的基因表达载体,还需要在质粒中插入______，该结构的作用是______。
（2）口蹄疫病毒的遗传物质为RNA,则获得可重组到质粒的VP1基因必须用到______酶。要获得大量VP1基因,可利用PCR技术进行扩增，扩增时需要设计______种引物。PCR技术中所用的DNA聚合酶与生物体内的DNA聚合酶有何区别______。
（3）通常用BamHⅠ、HindⅢ两种限制酶切割VP1基因和Ti质粒的目的是______;要筛选出含有该目的基因表达载体的农杆菌,首先需要在含______的培养基上进行。 
（4）VP1基因应插入到农杆菌Ti质粒的T-DNA上,通过转化作用进入番茄细胞并插入到______,使VP1基因能够稳定存在并发挥作用。 
（5）获得表达VP1蛋白的番茄植株以后,要进行免疫效力的测定,具体方法是:将从转基因番茄叶片中提取的VP1蛋白注射到一定数量的豚鼠体内,每半个月注射一次,三次注射后检测豚鼠血液中产生的______数量,为了使结果可信,应设置空白对照组,注射______。

【推荐1】大肠杆菌是生物学及医学实验研究中最有代表性的模式生物之一。
（1）大肠杆菌与饮水安全。
国家规定，每升饮用水中大肠菌数不得超过3个。有人测定某饮用水中的大肠杆菌（群）数：先将1升饮用水水样浓缩至10毫升，然后各取浓缩水样的2毫升，涂布到5个培养皿中进行培养，培养后计数的菌落数分别是9、12、5、8、6。请回答下列问题：
1）根据上述结果计算，被检水样大肠菌群数为________，水样________ （能、不能）达标。
2）检测过程中需要培养大肠菌菌群，培养基配方如下：

琼脂	蛋白胨	乳糖	蔗糖	K2HPO4	伊红	美蓝	蒸馏水	pH
15 g	10 g	5 g	5 g	2 g	0.4 g	0. 065 g	1000 mL	7.2

从培养基配方可以确定大肠杆菌的营养类型是________________；从培养基功能可以确定其类型是_____________培养基，理由是___________________________________。
3）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________________________________________________。
（2）大肠杆菌与基因工程。
大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的lacZ基因中。lacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出b-半乳糖苷酶。当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被b-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b-半乳糖苷酶，培养基中的X-gal不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因筛选重组质粒示意图。据图回答问题：

1）质粒结构特点是______________________。
2）作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因，原因是____________________________。
3）试管Ⅱ中用氯化钙溶液处理（增加其细胞壁的通透性）过的受体大肠杆菌，并在培养基中加入__________________________________。
4）将上述处理后的大肠杆菌置于图中培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①________________________________________________________________________。
②________________________________________________________________________。
（3）选择大肠杆菌作为研究材料，主要原因是：它体积小、结构简单、____________、
____________等。

【推荐2】某些糖尿病患者因胰岛B细胞被完全破坏，分泌胰岛素的功能丧失，需要通过注射胰岛素来补充。目前，该类患者对胰岛素的需求量越来越大。回答下列问题：
(1)在利用基因工程大规模生产胰岛素时，将胰岛素合成基因与质粒重组后导入大肠杆菌进行了表达。以上过程除了证明质粒可以作为载体外，还证明了__________。
(2)大肠杆菌常作为基因工程的受体菌，主要原因是___________ (写出一点即可)。基因工程中，不能将胰岛素合成基因直接导入大肠杆菌，其原因是________。
(3)检测胰岛素合成基因是否导入受体菌时，常用____________________________作探针。
(4)胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞内表达时，遗传信息的传递方向是_____。经检测,胰岛素合成基因的表达产物未能达到预期的生物活性，导致这种差异的原因可能是表达产物未经 _________的加工。

【推荐3】紫杉醇是从红豆杉属植物树皮中提取分离出来的一种代谢产物，具有显著的抗癌效果。下面是几种生物合成紫杉醇的方法，请回答相关问题：
(1)若利用微型繁殖技术大量生产红豆杉幼苗，则该技术利用的原理是____________________。在植物组织培养的培养基中除无机营养成分、有机营养成分、琼脂外，还需要添加_____________。红豆杉的形成层在生长发育过程中并不能合成紫杉醇的根本原因是________________________。
(2)科学家从太平洋红豆杉中获取相关基因片段后，再利用PCR技术进行扩增并在大肠杆菌中完成转化过程。PCR技术利用的原理是_______________。将该目的基因导入受体菌时，常利用Ca²⁺处理细胞，使其成为____________________，与溶有目的基因的___________混合，从而完成转化过程。若重组大肠杆菌产生的中间代谢产物扩散到水体或土壤后，可引发______________安全问题。
(3)为了培养能高效产生紫杉醇的红豆杉——柴胡植株，科研人员将红豆杉的愈伤组织和柴胡的愈伤组织用纤维素酶和果胶酶处理后，获得有活力的____________________，再用诱导剂_______________使其融合，最后选择能够高效合成紫杉醇的杂交细胞进行培养。

【推荐1】植物组织培养技术被广泛应用于无病毒植株培育、育种及获得细胞产物的工厂化生产等。结合下图中番茄植株的培育过程，回答相关问题：
   
(1)植物组织培养依据的生物学原理是__________。
(2)①过程中通常使用___________酶和_________酶来获取植物细胞原生质体，此处使用的外界溶液浓度不宜过小，以防止细胞原生质体_________________。
(3)科学家发现：切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得_________。
(4)多倍体番茄植株所结果实中维生素含量更高，若想培育多倍体番茄，有两种方法：一是在过程③中添加_________（物质）诱导原生质体融合；二是在过程⑥中添加一定浓度的________（物质）进行处理。
(5)植物组织培养技术是在______和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生________、   丛芽，最终形成完整的植株。

【推荐2】民以食为天，粮食安全是国家安全重要基础，足够的农田是农业稳产的保障，而大量的盐碱地不适合农作物生长。寻找耐盐碱基因，通过基因工程技术定向培育耐盐碱作物新品种有重要意义。科研工作者在盐碱地中找到了一种生长良好且耐盐碱的植物（以下简称植物a）。研究人员发现，植物a的液泡膜上特有一种Na⁺/K⁺逆向转运蛋白，这种蛋白是植物a耐盐碱的原因，并在植物a中找到控制该蛋白合成的Na⁺/K⁺逆向转运蛋白基因（TaNHX₂基因）。该基因就是研究人员要找的耐盐碱的目的基因。研究人员进一步获得了如下图所示的物质结构。拟利用这些材料，用基因工程技术培育转基因棉花。

Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶（Sau3AⅠ、BamHⅠ切割形成的黏性末端相同）
用基因工程技术培育转基因棉花的操作程序包括四个步骤：
(1)目的基因的获取：将植物a不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据目的基因的特定序列从受体菌中提取该基因，这种获取目的基因的方法称为____________。
(2)构建基因表达载体：计划用EcoRⅠ分别切割左上图中DNA片段和右上图所示质粒，以构建基因表达载体。
①构建表达载体除限制酶外还需要的工具酶是_____________；
②本方案的缺陷是：可能导致_________________以及目的基因与质粒的反向连接。
③为避免上述缺陷，最佳方案是用___________切割左上图的DNA片段，用________切割右上图质粒。
(3)将____________导入受体细胞。成功导入受体细胞后，还需要利用___________技术才能得到转基因棉花幼苗，这一技术的原理是_________________。
(4)目的基因的检测与鉴定：要在个体生物学水平上检测耐盐新品种的培育效果，检测方法是_____________。

【推荐3】单倍体细胞中含有本物种配子染色体数的个体，培育单倍体植株利用了植物组织培养技术，我国在水稻等作物的单位体育种方面处于领先地位。回答下列与水稻单倍体育种相关的问题：
（1）单倍体育种过程中要进行植物组织培养，该过程利用的外植体一般为____________________。接种前，要对外植体进行____________________处理。处理时，既要使所用药剂的浓度和处理时间能达到预期效果，还必须考虑到对____________________的影响。
（2）脱分化阶段和再分化阶段使用的培养基在____________________等方面会存在差异。培养过程中，如有二倍体小幼苗出现，猜测可能是____________________长成的。
（3）单倍体植株的培育过程_______________（填“能”或“不能”）体现植物细胞的全能性，将单倍体幼苗移栽至大田后并未得到稳定遗传的农作物优良品种，原因是____________________。
（4）单倍体细胞中的DNA也可以参与基因库的构建，参与构建的基因库属于____________________。