请回答下面有关生物技术的相关问题：
(1) 要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、____________________ 、终止子、______________ 等部分。
(2) 单克隆抗体的制备至少需要经过两次筛选，方法分别是__________ 和______________ 。
(3) 当在_____________________ 的间隙观察到两个极体，这是判断卵子是否受精的重要标志。哺乳动物早期胚胎在一定时间内不与母体子宫建立组织上的联系，这为________________ 提供了可能。在胚胎移植前对家畜胚胎进行性别鉴定，可取___________ 期的___________ 细胞做DNA分析。
(4) 某养殖户把自己的养鸡场、养猪场、鱼塘和桑园也纳入某一已经建好的生态园，并把很多单个生产系统优化整合到一起，改善了系统的功能，这体现了生态工程___________________ 原理。
(1) 要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、
(2) 单克隆抗体的制备至少需要经过两次筛选，方法分别是
(3) 当在
(4) 某养殖户把自己的养鸡场、养猪场、鱼塘和桑园也纳入某一已经建好的生态园，并把很多单个生产系统优化整合到一起，改善了系统的功能，这体现了生态工程
更新时间：2017-08-05 13:24:57
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【推荐1】定点诱变技术可以在体外改造目的DNA分子，进而研究基因的表达以及蛋白质的结构与功能之间的关系。经典的大引物PCR定点诱变技术成为基于PCR的定点诱变技术中应用最普遍的方法，操作过程如图甲。研究者欲改造某基因并将其导入大肠杆菌的质粒中保存，该质粒含有氨苄青霉素抗性基因、LacZ基因及一些酶切位点，结构如图乙。回答下列问题：
(1)利用大引物PCR进行定点诱变需要进行两轮PCR（PCR1和PCR2），在PCR1中，至少需要______ 个循环才能获得相应的大引物模板。在PCR2中，要获得带有诱变点的改良基因，引物应选用大引物两条链中的____ （填“①或“②”）。
(2)为实现质粒和改良基因的高效连接，选用限制酶XmaⅠ而不选用限制酶SmaⅠ的原因是_____ 。为将改良基因构建在质粒上，还需要______ 等酶。
(3)在构建改良基因表达载体时，有的质粒含有改良基因，有的质粒为空白质粒，将含上述组件的溶液加入到大肠杆菌菌液中，适宜温度下培养一段时间后，再将菌液涂布在含氨苄青霉素和_____ 的平板上。一段时间后，在培养基上出现白色和蓝色两种菌落，其中白色菌落含有重组质粒，判断的依据是______ 。
(4)与X射线诱变相比，该诱变技术的优点是_________ 。
(1)利用大引物PCR进行定点诱变需要进行两轮PCR（PCR1和PCR2），在PCR1中，至少需要
(2)为实现质粒和改良基因的高效连接，选用限制酶XmaⅠ而不选用限制酶SmaⅠ的原因是
(3)在构建改良基因表达载体时，有的质粒含有改良基因，有的质粒为空白质粒，将含上述组件的溶液加入到大肠杆菌菌液中，适宜温度下培养一段时间后，再将菌液涂布在含氨苄青霉素和
(4)与X射线诱变相比，该诱变技术的优点是
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【推荐2】研究人员将一个含编码p62蛋白的环状DNA质粒(即p62-LAB)导入乳酸杆菌，形成DNA疫苗。经口给予阿尔茨海默病小鼠喂服后，症状显著减轻，说明将DNA疫苗用于阿尔茨海默病治疗的有效性。
(1)获取p62蛋白的基因时，通常是在细胞内提取mRNA，一般先通过_____ 得到cDNA，再经_____ 大量获取p62蛋白基因，酶切后再连接到载体上。
(2)研制DNA疫苗时需要将p62蛋白的基因与质粒构建重组表达载体，目的是______ ；科研人员用图所示的质粒为载体，应选用_________ 酶将该质粒与p62蛋白的基因构建为重组质粒。可用含有_________ 的固体培养基培养乳酸杆菌，以便检测重组质粒是否转化了乳酸杆菌。
(3)乳酸杆菌用作p62-LAB的受体细胞优点有：________________ 。
(1)获取p62蛋白的基因时，通常是在细胞内提取mRNA，一般先通过
(2)研制DNA疫苗时需要将p62蛋白的基因与质粒构建重组表达载体，目的是
(3)乳酸杆菌用作p62-LAB的受体细胞优点有：
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【推荐3】科学家Burton等将人的抗体编码基因体外克隆后，插入噬菌体中并转染大肠杆菌得到工程菌。目的基因在工程菌中进行表达，获得了具有高度免疫活性的人抗体，该项技术被称为噬菌体抗体库技术。回答下列相关问题：
（1）提取人的抗体编码基因时，若限制酶切出的DNA片段是平末端，则需要用____ 酶进行连接。若要在短时间内获得较多的抗体编码基因，可以利用PCR技术扩增DNA，扩增目的基因时需要加入两种引物，其原因是____ 。
（2）运用逆转录法获得的抗体编码基因，只是该基因的____ 序列，需要插入载体的____ 之间才能进行转录。
（3）大肠杆菌常常被用作基因工程的受体菌，其主要优点是____ （答出两点即可）。
（4）将重组DNA分子导入受体细胞时，一般不需要用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞，其原因是____ 。
（1）提取人的抗体编码基因时，若限制酶切出的DNA片段是平末端，则需要用
（2）运用逆转录法获得的抗体编码基因，只是该基因的
（3）大肠杆菌常常被用作基因工程的受体菌，其主要优点是
（4）将重组DNA分子导入受体细胞时，一般不需要用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞，其原因是
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【推荐1】新冠病毒的表面抗原主要为S蛋白，用S蛋白制备的单克隆抗体，可用于新冠病毒的检测，其制备的部分过程如图所示。回答下列问题。
(1)将新冠病毒S蛋白注入到实验动物体内的主要目的是______________ ，______________ 是制备单克隆抗体的基础，该基础的原理是______________ 。
(2)集落是指单个细胞体外增殖6代以上，其后代形成的细胞群体。稀释后，多孔玻璃板中的单细胞有_____________ ，经HAT培养基筛选后获得的集落①②③④细胞的共同点是______________ 。
(3)据图分析，选用集落______________ 用于克隆化培养生产单克隆抗体，克隆化培养生产的措施有______________ 。
(1)将新冠病毒S蛋白注入到实验动物体内的主要目的是
(2)集落是指单个细胞体外增殖6代以上，其后代形成的细胞群体。稀释后，多孔玻璃板中的单细胞有
(3)据图分析，选用集落
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【推荐2】请据图回答下列问题：
（1）在培育转人生长激素基
因牛过程中，①过程需要的工具酶____________________ ，②过程常用的方法是_______________ 。
（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有____________
（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是________ 细胞。
（4）在抗虫棉培育过程中，④过程常用的方法是___________________ ，⑤过程采用的技术__________________________ 。
（1）在培育转人生长激素基
因牛过程中，①过程需要的工具酶（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有
（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是
（4）在抗虫棉培育过程中，④过程常用的方法是
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【推荐3】雷公藤甲素（TPL）能有效抑制癌细胞生长，对正常细胞也有一定的毒性。为探究其作用，科学家用TPL对肝癌HepG2细胞进行不同处理，结果如图1所示。请回答下列问题：_____ ，且在一定浓度范围内，随着雷公藤甲素浓度升高，细胞抑制率逐渐_________ ；同一TPL浓度下，随着处理时间的增加，抑制率逐渐________ 。
(2)实验前用合成培养基对肝癌HepG2细胞进行体外培养时，往往需添加适量血清，原因是_________ ，将细胞置于含5%CO2的恒温培养箱中培养，CO2的作用是________ 。
(3)科学家制备能同时与药物和肿瘤细胞抗原结合的双特异性抗体，具体过程如图。_______ 诱导法等。与传统血清抗体相比，单克隆抗体的优点有______ 。
Ⅱ、抗体1和抗体2在体外解偶联后重新偶联得到双特异性抗体（双抗），如图3.与直接使用抗肿瘤药物相比，将药物与双抗结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_______ ，体现的是双抗在______ 方面的用途。
(2)实验前用合成培养基对肝癌HepG2细胞进行体外培养时，往往需添加适量血清，原因是
(3)科学家制备能同时与药物和肿瘤细胞抗原结合的双特异性抗体，具体过程如图。
Ⅱ、抗体1和抗体2在体外解偶联后重新偶联得到双特异性抗体（双抗），如图3.与直接使用抗肿瘤药物相比，将药物与双抗结合后给药，对人体的副作用更小，原因是
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【推荐1】随着科学技术的发展，人们可以根据人类的需求来改造生物的性状，在许多领域取得了可喜的成果，如图是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解，据图回答：
（1）在此工程过程中涉及的现代生物技术主要有__________________________ （写出3个技术名称）。
（2）图中①一般经_____________ 处理可以得到③，从③到④的过程中一般用卵母细胞作受体细胞，其原因是____________________________________________ 。
（3）下列A—D四图中，完成从④到⑤的正确操作方法是图______ ，把⑤送入⑥的最佳时期是_______________ 。
（4）如果②的数量太少常用_____________ 来扩增。要实现⑦批量生产血清白蛋白，则要求③的性染色体组成是____________________ 。
（5）与工厂化生产药物相比，用这种方法生产药物的优越性在于节约资源、降低成本等。⑦和某些转基因羊可通过分泌乳汁来生产人类所需药物，这类转基因动物被称为____________ 。
（1）在此工程过程中涉及的现代生物技术主要有
（2）图中①一般经
（3）下列A—D四图中，完成从④到⑤的正确操作方法是图
（4）如果②的数量太少常用
（5）与工厂化生产药物相比，用这种方法生产药物的优越性在于节约资源、降低成本等。⑦和某些转基因羊可通过分泌乳汁来生产人类所需药物，这类转基因动物被称为
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【推荐2】如图为培育转基因山羊生产人β﹣酪蛋白的流程图．请回答下列问题．
（1）获取过程①所用的人β﹣酪蛋白基因时，可先提取人体细胞中的_____ ，以其作为模板在反转录酶的作用下合成_____ 。
（2）重组人β﹣酪蛋白基因表达载体中必须有启动子，其是_____ 识别和结合的部位。
（3）过程②可选用_____ 阶段的胚胎进行移植，过程③可使用胚胎工程中___________ 技术扩大转基因山羊群体。
（4）过程④为目的基因的表达，包括____________ 两个阶段，β﹣酪蛋白基因在细胞内表达的场所为____________ 。
（5）在分子水平上，可通过_________ 技术检测转基因山羊中是否成功表达出β﹣酪蛋白。
（1）获取过程①所用的人β﹣酪蛋白基因时，可先提取人体细胞中的
（2）重组人β﹣酪蛋白基因表达载体中必须有启动子，其是
（3）过程②可选用
（4）过程④为目的基因的表达，包括
（5）在分子水平上，可通过
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【推荐3】HIV通过识别T细胞表面特有的蛋白质来侵染T细胞。2018年11月，有学者宣布，一对经过基因编辑的婴儿在中国健康诞生，这对婴儿的一个基因被切除，使其出生后即能抵抗HIV，其使用的是CRISPRCas9基因编辑技术。下图为Cas9蛋白依据sgRNA片段切割DNA示意图(不同的sgRNA可以识别不同的DNA序列)。
请回答下列问题：
（1）DNA重组技术主要用到的工具酶包括DNA连接酶和限制酶，图中充当限制酶的物质是_______________ 。
（2）Cas9sgRNA复合体能够精准识别某核苷酸序列的原因可能是______________________________ 。
（3）经基因编辑过的婴儿出生后能够免遭HIV侵染的直接原因是______________________________ 。
（4）在获得转基因动物时一般对受精卵进行操作，通过显微注射技术将含有目的基因的表达载体直接注入，目的基因进入受体细胞并表达的过程称为______________________________ 。
（5）操作后的受精卵需要先在发育培养液中继续培养以检查______________________________ 。其培养液必须添加血清等天然成分，后经早期胚胎培养一段时间后，再经胚胎移植到雌性动物体内发育。移植胚胎能在受体内存活的原因是_____________________________________________ 反应。
（6）基因编辑技术有着广泛的应用前景，如果将西红柿细胞中与乙烯合成的相关基因编辑切除，则这种西红柿的果实将______________________________ ，从而获得耐储存的西红柿新品种。
请回答下列问题：
（1）DNA重组技术主要用到的工具酶包括DNA连接酶和限制酶，图中充当限制酶的物质是
（2）Cas9sgRNA复合体能够精准识别某核苷酸序列的原因可能是
（3）经基因编辑过的婴儿出生后能够免遭HIV侵染的直接原因是
（4）在获得转基因动物时一般对受精卵进行操作，通过显微注射技术将含有目的基因的表达载体直接注入，目的基因进入受体细胞并表达的过程称为
（5）操作后的受精卵需要先在发育培养液中继续培养以检查
（6）基因编辑技术有着广泛的应用前景，如果将西红柿细胞中与乙烯合成的相关基因编辑切除，则这种西红柿的果实将
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【推荐1】请回答下列有关现代生物技术的问题。
如右图是利用现代生物技术改良草莓品系的过程。
(1)请写出图中涉及的现代生物技术中的2项_____ 。
(2)研究人员根据已知的胰岛素基因序列，采用_____ 方法获得了胰岛素基因。
(3)图中A培育至具有凤梨风味的绿草莓幼苗的过程，_____ （是、否）体现植物细胞的全能性。
(4)转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用，但是，胚胎工程只是指对动物的_____ 所进行的多种显微操作和处理技术。
(5)不断恶化的生态环境，正在对人类的生存和发展构成严重的威胁。运用生态工程可对遭到破坏的生态环境进行修复和重建。生态工程建设的目的是遵循自然界_____ 的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止_____ ，达到生态效益与经济效益的同步发展。生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理中的3项：_____ 。
如右图是利用现代生物技术改良草莓品系的过程。
(1)请写出图中涉及的现代生物技术中的2项
(2)研究人员根据已知的胰岛素基因序列，采用
(3)图中A培育至具有凤梨风味的绿草莓幼苗的过程，
(4)转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用，但是，胚胎工程只是指对动物的
(5)不断恶化的生态环境，正在对人类的生存和发展构成严重的威胁。运用生态工程可对遭到破坏的生态环境进行修复和重建。生态工程建设的目的是遵循自然界
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【推荐2】利用物种多样性控制有害生物，建立多个物种共存的农作模式是农业可持续发展的重要途径。稻田系统中有稻田养鱼、稻田养鸭、稻_鱼_鸭等多物种共存模式。已知水稻叶片由于富含硅质，鸭不喜欢取食。某研究所连续4年研究稻鸭共作条件下田间杂草群落
密度的动态变化，相关研究方法和结果如下图所示，请回答下列有关问题:
(1)研究人员在稻鸭共作区利用倒置“W”九点取样法对稻田中的杂草密度进行定量研究，该取样方法如图1所示，沿田边纵向走70步，横向转向田里走24步，开始倒置“W”九点的第一点取样， 抽取自然田块样本，调查结束后，沿纵向继续深入走70步，再横向转向田里走24步，开始抽取第二个自然田块样本。以相似的步法完成九点取样。分析上述方法，第一取样点与第九取样点之间的横向跨度约为_____ 步。当大田面积较大时，可相应调整_____ 的步数。
(2)分析图2得出的结论是_____ 。与其它杂草相比，稗的种群数量在长期稻鸭共作条件下降低较慢，其可能的原因有_____ 。
A．稗对水稻田间环境的适应能力较强
B．与水稻具有拟态竞争特性，夹杂在稻秧和稻株中，不为鸭子取食
C．与其它杂草相比，稗草种群的抗药基因频率较高
D．鸭子取食水稻幼苗，间接提升了稗草的竞争能力
(3)二化螟是常见的水稻害虫，在稻田的活动场所主要是稻苗基部，稻鸭共作可大大降低二化螟为害株率，请从生态位及食物链角度解释相关的机理:_____ 。
(4)流经稻-鱼-鸭稻田生态系统中的总能量是_____ 。在分析消费者食物来源时，传统方法主要是通过生物消化道内未被消化的食物来确定生物的食性。传统方法虽然比较直观，但缺点是_____ 。因此，研究生态系统中物质循环与能量流动时常采用稳定同位素比值分析技术。
(5)从经费收支情况看，与常规稻作模式相比，稻田系统的多个物种共存模式不仅大大增加了农田的产出，还减少了_____ 等项目的支出，不仅推进了绿色食品生产，还可增加农民收入。综合上述研究内容，稻田系统的多个物种共存模式遵循了生态工程建设的_____ 原理(至少答出两个)。
密度的动态变化，相关研究方法和结果如下图所示，请回答下列有关问题:
(1)研究人员在稻鸭共作区利用倒置“W”九点取样法对稻田中的杂草密度进行定量研究，该取样方法如图1所示，沿田边纵向走70步，横向转向田里走24步，开始倒置“W”九点的第一点取样， 抽取自然田块样本，调查结束后，沿纵向继续深入走70步，再横向转向田里走24步，开始抽取第二个自然田块样本。以相似的步法完成九点取样。分析上述方法，第一取样点与第九取样点之间的横向跨度约为
(2)分析图2得出的结论是
A．稗对水稻田间环境的适应能力较强
B．与水稻具有拟态竞争特性，夹杂在稻秧和稻株中，不为鸭子取食
C．与其它杂草相比，稗草种群的抗药基因频率较高
D．鸭子取食水稻幼苗，间接提升了稗草的竞争能力
(3)二化螟是常见的水稻害虫，在稻田的活动场所主要是稻苗基部，稻鸭共作可大大降低二化螟为害株率，请从生态位及食物链角度解释相关的机理:
(4)流经稻-鱼-鸭稻田生态系统中的总能量是
(5)从经费收支情况看，与常规稻作模式相比，稻田系统的多个物种共存模式不仅大大增加了农田的产出，还减少了
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(0.65)
【推荐3】充分利用地域优势、发展特色农业，实现保护生态与经济建设共同发展是近年来我国多省份多地区发展的重要策略。珠江三角洲的农民充分利用自然条件，建立了该地特有的蔗基鱼塘和桑基鱼塘人工生态系统；西部开发计划中，优先考虑生态环境的变化，重点关注草原植被和生物多样性的改变。____ 原理，而且在较短的食物链中，____ （能量利用率/能量传递效率）大幅提高。
(2)该人工生态系统向外输出的产品主要有____ 。蚕粪富含粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维等营养物质，是猪、鱼、羊的理想饲料。某种鱼专以蚕粪为食，假设蚕从上一个营养级固定的能量为2.4×106kJ，那么这部分能量最多有____ kJ被这种鱼所同化。
(3)“植树造林、退耕还林”是西部恢复生态环境的重要措施之一，其目的是提高生态系统的____ ，提高生物多样性的____ 价值，在发展经济和保护生态之间，实现可持续发展。
(2)该人工生态系统向外输出的产品主要有
(3)“植树造林、退耕还林”是西部恢复生态环境的重要措施之一，其目的是提高生态系统的
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