【推荐1】毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（1）过程①是基因工程的核心，通过过程①构建的基因表达载体除了含有KIFⅡ基因外，还必须有启动子、终止子以及__________等。
（2）过程②必需加入__________酶，才能获得单个的成纤维细胞。
（3）在过程③中，为了获得更多的卵（母）细胞，需用__________处理成年母绒山羊。
（4）在过程④进行之前，需对卵（母）细胞进行______处理。过程④称为__________。
（5）过程⑤称为__________，进行该过程的最佳时期是__________，过程⑤能够成功进行的生理基础是__________。

【推荐2】江苏某研究团队利用TetR和GFP两种基因，构建了监测残留在生物组织或环境中的四环素水平的“报警器”大肠杆菌工程菌。限制酶的识别序列及切割位点、TerR和GFP两种基因所在的DNA片段以及相关的载体如图1所示，监测原理如图2所示。天然大肠杆菌中不具备TerR、GFP和Amp^r（青霉素抗性基因）这三种基因。请据图回答下列问题：

限制酶	EcoRI	XbaI	SpeI	BamHI
识别序列及切割位点

(1)基因工程的核心工作是___。若要拼接DNA片段1和2，结合图1中信息，在___酶作用后再添加___酶，可拼接成功。成功拼接后的连接处碱基序列为___（按5'→3'的顺序只写一条链）。最终构建成功的重组质粒示意图是___（填字母）。

A.   B.   

C.       D.

(2)在上述研究中，需导入天然菌的基因有___（编号选填）。
①四环素合成相关基因②GFP基因③TetR基因④RNA聚合酶基因
(3)据图2分析，该工程菌检测环境中四环素水平的原理是___。
(4)下列操作不能证明重组质粒和大肠杆菌工程菌建构成功的方法及现象有___。
a．通过琼脂糖凝胶电泳实验证明重组质粒的大小符合预期
b．大肠杆菌工程菌不能在含有青霉素的培养基上生长
c．用显微镜观察重组质粒上的外源DNA片段的碱基序列
(5)为提高对环境中四环素水平监测的有效性，研究人员将GFP蛋白的第65位丝氨酸替换成苏氨酸，该项技术属于___。

【推荐3】生物工程在人类遗传病的研究和治疗有较大的突破。阅读下列资料，回答相应问题。
资料一 通过转入特定基因可将体细胞诱导形成多能干细胞（iPS细胞），可以产生各种类型的体细胞。下图是应用iPS细胞技术治疗镰刀型细胞贫血症的技术流程，请回答：

（1）过程①是体外培养由患者身体分离的体细胞，需要在配制的______培养基中，加入一定量的血清、血浆等天然成分。除对上述培养液进行无菌处理，通常还要加入一定量的抗生素，其目的是_________________________。
（2）过程②中，科研人员首先要利用PCR技术，把所需的c-Myc（c-Myc属于Myc家族的原癌基因）等四种目的基因扩增，然后将目的基因与逆转录病毒结合，以构建________，然后导入人体的体细胞，诱导形成iPS细胞，并在_______培养箱中依次进行_________培养、_________培养，获得iPS细胞系。
（3）科研人员在iPS细胞中，用健康的基因取代了镰刀型细胞贫血症的致病基因，并在加入______________的培养液中培养，使其定向分化成造血干细胞，移植入患者体内，使患者能够产生正常的红细胞。
资料二 人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。

（4）子代大鼠如果________和_________，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
（5）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是______、早期胚胎培养和胚胎移植。

【推荐1】下图是某科研小组设计的用“精子介导基因转移法”培育转基因山羊（2n）的流程图。据图回答下列问题：

（1）“精子介导基因转移法”是利用精子易于与外源基因结合的能力，通过图中的①过程，将精子作为外源基因的______，由_______的精子，经过②过程，将外源基因送入卵母细胞。
（2）进行②过程的卵母细胞应处于___期，此时细胞中含_____个染色体组。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和______。
（3）③过程需要在_______（写出两点）等条件下进行。
（4）胚胎工程是指对动物的早期胚胎或___所进行的多种显微操作和处理技术。④过程涉及的胚胎工程技术是______。

【推荐2】荷斯坦奶牛的产奶量很高，某公司引进了纯种荷斯坦奶牛(供体1)，欲利用现代生物工程技术实现优良品种的快速繁殖，其操作流程设计如图，请回答下列问题：

(1)胚胎工程的理论基础是___________。
(2)为了充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，通过途径1繁育小牛时，常用促性腺激素对供体母牛进行超数排卵处理，而不用雌激素，原因是___________；但毕竟供体母牛提供的卵子总量有限，因而可通过途径2，对早期胚胎进行___________以提高胚胎的利用率，相对于途径1、2，途径3在提供胚胎数量方面具有更大的优势，理由是___________。
(3)为了获得优质奶牛，在胚胎移植前，需要取滋养层细胞进行___________。
(4)通过途径1得到的后代之间在性状上差异较大，而通过途径2得到的后代在性状上基本一致，原因是___________。

【推荐1】生物工程技术在农牧业生产、医药卫生等领域有广泛的用途。请回答相关问题。
(1)我国体细胞克隆猴“中中”和“华华”的诞生再次说明了____具有全能性。植物组织培养的全过程，证明了__________________具有全能性。
(2)胚胎分割和胚胎移植都可以在______________阶段进行。胚胎移植前进行性别鉴定的方法：取______细胞做DNA分析。
(3)动物细胞融合和植物原生质体融合的原理都是____，不同的是诱导动物细胞融合时常用的方法是用____诱导。
(4)许多重要的生物制品，如病毒疫苗、单克隆抗体等，都可以借助动物细胞培养技术来大规模生产。当细胞分裂生长到表面相互接触会发生接触抑制，此时需要用____处理分散成单个细胞，分瓶继续培养。细胞培养液应定期更换，以防止____对细胞自身造成危害。
(5)为了得到能产生抗病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。第一次筛选所采用的培养基属于_________。第二次及以上多次筛选，筛选所依据的基本原理是_________________。

【推荐2】我国科学家利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和体细胞核移植（SCNT）技术，成功构建了体细胞BMAL1基因（产生昼夜节律必需的基因）敲除的生物节律紊乱猕猴，为相关疾病研究提供了新型动物模型。其中BMAL1基因敲除猴的基本构建流程如图所示。回答下列相关问题：

   

(1)采集猕猴卵母细胞，在体外培养到____期才去核，去除的“核”实际上是指____。除了使用图中的显微操作法去核，还可使用梯度离心、____和化学物质处理等方法去核。
(2)核移植成功后，用物理或化学方法激活重构胚，目的是____。
(3)一次核移植技术后，需要获得更多的基因敲除猴，可在囊胚期对早期胚胎进行胚胎分割，操作时要注意____。
(4)不考虑基因突变，利用A6的成纤维细胞进行克隆获得的多只第二代基因敲除猴的基因型____（填“相同”或“不相同”）。与第一代BMAL1基因敲除猴模型相比，第二代猕猴模型用于研究生物节律紊乱及相关药物研发的优势是____（写出1点即可）。

【推荐3】为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示信息回答下列问题。

(1)试管牛的培育属于_______(“有性繁殖”或“无性繁殖”)；试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有早期胚胎培养、_______等；克隆牛的培育依据的原理是_______。
(2)促使B牛多排卵的激素一般是_______。
(3)在受精的过程中，进行体外受精时，所用的父亲精子是经过_______处理的。上述防止多精入卵的屏障有_______和卵细胞膜反应。判断卵子是否受精的标志是_______。体外受精以后要采用胚胎工程中的_______技术和胚胎移植技术，该过程所用的培养液的成分除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及_______等物质。
(4)要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，即科学家将_____和乳腺蛋白基因的_______、_______等调控组件重组在一起，该过程需要用到的酶是_______，再通过_______法导入牛的_______中。