如图是培育优良种牛的流程图,a、b为操作过程,请据图回答有美关问题:
(1)a过程的技术名称是_________ 。此前,精子要进行______ 处理,此后,应将受精卵转入发育培养液中继续培养,以检查受精状况和受精卵的发育能力。
(2)卵细胞是由良种奶牛提供的,提供精子的公牛和接受胚胎的受体母牛是否也都要求是良种?为什么?__________________________________________________________________ 。
(3)b过程常用的方法是_____________ ,检测外源基因是否在转基因牛D中表达成功的方法是_______ ;要从转基因牛D的牛奶中提取外源基因蛋白,在构建基因表达载体时应将外源基因与_______ 相连。
(4)为取得A、B同卵双胎,应在胚胎发育的_________ 期用机械方法将胚胎分割,其操作要注意_______ ,以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
(1)a过程的技术名称是
(2)卵细胞是由良种奶牛提供的,提供精子的公牛和接受胚胎的受体母牛是否也都要求是良种?为什么?
(3)b过程常用的方法是
(4)为取得A、B同卵双胎,应在胚胎发育的
更新时间:2018-05-27 13:00:11
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【推荐1】研究发现,酵母细胞基因转录需要转录因子,转录因子是组件式蛋白质,包括DNA结合功能域(DNA一BD)和转录激活结构域(DNA一AD),两结合域分开时具有功能,但不能激活转录,如果将待测蛋白质X与DNA一BD融合,蛋白质Y与DNA一AD融合,蛋白质X和Y有相互作用时,两结构域能重新呈现完整转录因子活性,并可激活报告基因启动子,过程如图1所示。科研人员为了验证蛋白质X和Y是否具有相互作用及作用位置是位于蛋白质的氨基端还是羧基端,分别PCR扩增蛋白质X和Y的全长基因序列、编码氨基端603个氨基酸片段的基因序列、编码羧基端539个氨基酸片段的基因序列,分别构建不同的酵母表达载体(如图2和图3所示),其中Ampr为氨苄青霉素抗性基因,His3和TRPI分别为控制组氨酸和色氨酸合成的基因。空白载体或单独一种载体均不能激活报告基因,载体对酵母菌无毒害作用。回答下列问题:
(1)为了将pLexA一JL和pB42AD载体分别与蛋白质X和Y的三种基因序列连接,需要先进行PCR扩增蛋白质X基因和蛋白质Y基因的6种序列,共需要设计__________ 种引物;扩增后再用限制酶__________ 和__________ 分别切割蛋白质X基因的3种序列和Y基因的3种序列。构建好pLxA一JL和pB42AD基因表达载体后,为确定是否成功,需要酶切两种载体后,根据__________ 结果观察是否出现预期大小的目标条带。
(2)色氨酸和亮氨酸合成缺陷型酵母菌菌株是实验室常用的营养缺陷型菌株,将成功构建的上述基因表达载体通过__________ 法导入到处于感受态的色氨酸和亮氨酸合成缺陷型酵母菌中,在培养基中需添加__________ 用于筛选成功导入基因表达载体的酵母菌。
(3)两种载体成功导入酵母并表达,结果为蛋白质X和蛋白质Y、蛋白质X羧基端和蛋白质Y、蛋白质X和蛋白质Y羧基端、蛋白质X羧基端和蛋白质Y羧基端之间有相互作用。据此可推测的结论是__________ 。不同蛋白质之间相互作用是通过检测__________ 得到的。
(1)为了将pLexA一JL和pB42AD载体分别与蛋白质X和Y的三种基因序列连接,需要先进行PCR扩增蛋白质X基因和蛋白质Y基因的6种序列,共需要设计
(2)色氨酸和亮氨酸合成缺陷型酵母菌菌株是实验室常用的营养缺陷型菌株,将成功构建的上述基因表达载体通过
(3)两种载体成功导入酵母并表达,结果为蛋白质X和蛋白质Y、蛋白质X羧基端和蛋白质Y、蛋白质X和蛋白质Y羧基端、蛋白质X羧基端和蛋白质Y羧基端之间有相互作用。据此可推测的结论是
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【推荐2】预防乙肝最有效的途径是接种疫苗。将乙肝表面抗原基因转移到植物细胞内可生产乙肝疫苗。回答下列问题。
(1)欲在短时间内大量扩增乙肝表面抗原基因。通过______ (填写中文名称)技术,其原理是_______ ,利用该技术扩增乙肝表面抗原基因的前提是________ 。
(2)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,此外采用_____ 法十分简便经济。用抗原——抗体杂交技术检测植物细胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白,若有_______ 出现,表明目的基因已形成蛋白质产品。
(3)将乙肝表面抗原基因导入植物细胞后,采用_______ 技术获得愈伤组织,该技术需在_______ 条件下进行。
(4)乙肝疫苗在2~8℃条件下保存,其不宜在常温下保存最可能的原因______ 。
(1)欲在短时间内大量扩增乙肝表面抗原基因。通过
(2)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,此外采用
(3)将乙肝表面抗原基因导入植物细胞后,采用
(4)乙肝疫苗在2~8℃条件下保存,其不宜在常温下保存最可能的原因
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【推荐3】研究表明来源于大肠杆菌的苏氨酸输出蛋白(由rhtA基因编码)能够识别5-氨基乙酰丙酸,并将其输出至细胞外。为探究苏氨酸输出蛋白的作用,研究人员从大肠杆菌的基因组DNA中扩增出rhtA基因,并构建出相应的重组质粒,获得转rhtA基因的工程菌,其基本操作流程如图所示,已知引物A、B的序列分别是:
5′AGGAAACAGACCATGGAATTCATGCCTGGTTCATTACGTAAAATG3′、
5′GCCAAGCTTGCATGCCTGCAGTTAATTAATGTCTAATTCTTTTATTTTGCTC3′。
回答下列问题:
(1)由图可知,获取大量rhtA基因要经PCR技术扩增,若要扩增出N个rhtA基因,需要引物A、B各__________ 个,对引物A的设计要求是__________ 、__________ (答出2点即可);通过过程①得到重组质粒,需选用的两种限制酶是__________ ,两者起作用部位的化学键是__________ 。
(2)过程②⑤在操作时,一般需用钙离子处理大肠杆菌细胞,使细胞处于一种_________ 的生理状态。过程③将大肠杆菌体内的质粒提取出来进行验证时,以EcoRI切割pEC-XK99E质粒为对照,分别对重组质粒用EcoRI单酶切、以(1)选用的双酶对重组质粒进行双酶切,然后用_________ 技术进行验证,其实验结果如图所示,若2是对照,则3、4分别是单酶切、双酶切的结果,做出此推测的依据是用EcoRI单酶切对照和重组质粒,均使质粒成为________ ,2的DNA条带略比3小,是因为________ ,4被双酶切后形成_____________ 。
(3)将正确的质粒导入AL9后,后续的步骤是________ 。本技术选用微生物大肠杆菌作为受体细胞,而不选用动物细胞,理由是________ (答出一点即可)。
5′AGGAAACAGACCATGGAATTCATGCCTGGTTCATTACGTAAAATG3′、
5′GCCAAGCTTGCATGCCTGCAGTTAATTAATGTCTAATTCTTTTATTTTGCTC3′。
回答下列问题:
(1)由图可知,获取大量rhtA基因要经PCR技术扩增,若要扩增出N个rhtA基因,需要引物A、B各
(2)过程②⑤在操作时,一般需用钙离子处理大肠杆菌细胞,使细胞处于一种
(3)将正确的质粒导入AL9后,后续的步骤是
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【推荐1】植物细胞壁中存在大量不能被猪消化的多聚糖类物质,如半纤维素多聚糖、果胶质(富含有半乳糖醛酸的多聚糖)等。研究人员通过基因工程、胚胎工程等技术培育出转多聚糖酶基因(manA)猪,主要流程如下图(neo为新霉素抗性基因)。回答下列问题:
(1)运用PCR技术扩增DNA分子时,需经过变性→________ →延伸→重复过程,经过4轮循环后,得到的子代DNA分子中,不同时含有两种引物的DNA分子占________ 。
(2)图2中的步骤[①]________ 过程,是基因工程基本操作程序中的核心步骤。
(3)通过①过程获得的重组质粒含有4.9 kb个碱基对,其中manA基因含有1.8 kb个碱基对。现将该重组质粒成功导入受体细胞后,经培养,发现约有50%的细胞能正常表达目的基因产物,原因是______________________ 。若用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ联合酶切割其中一种重组质粒,只能获得1.7 kb和3.2 kb两种DNA片段,若用上述联合酶切割同等长度的另一种重组质粒,则可获得________ kb长度两种的DNA片段。
(4)在④过程的早期胚胎培养时,通常需要定期更换培养液,目的是________________________________________________________________________ 。
(5)⑤过程前,通常需对受体母猪注射____________ ,使其能同期发情。与普通猪相比,该转基因猪的优势是________________________ 。
(1)运用PCR技术扩增DNA分子时,需经过变性→
(2)图2中的步骤[①]
(3)通过①过程获得的重组质粒含有4.9 kb个碱基对,其中manA基因含有1.8 kb个碱基对。现将该重组质粒成功导入受体细胞后,经培养,发现约有50%的细胞能正常表达目的基因产物,原因是
(4)在④过程的早期胚胎培养时,通常需要定期更换培养液,目的是
(5)⑤过程前,通常需对受体母猪注射
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【推荐2】2016年10月19日美国新希望生殖医学中心正式宣布,世界首个核移植“三父母”男婴已于2016年4月诞生。为中东一位线粒体携带有亚急性坏死脑病基因的母亲带来了希望。培养过程如下图,据图回答:
(1)获得重组卵母细胞A也会用到体细胞核移植技术,完成①过程需要用微型吸管吸出______________ ,完成④过程的B细胞需要选择_______________________ (时期)的卵母细胞。
(2)卵母细胞的获取过程中,需要对女性进行超数排卵处理,超数排卵的方法是给女性注射____ 激素。
(3)为了提高已有胚胎的利用率,可采用________________ 技术。若选用囊胚期的胚胎,操作过程中要特别注意的问题是_______________________________________ 。
(4)根据___________ (填标号)判断,此种繁殖方式是有性生殖。细胞A的培养过程③所需气体主要有O2和CO2,CO2的主要作用是___________________________ 。
(5)设计试管婴儿技术与解决不孕问题而进行的试管婴儿技术的主要区别是前者需要在植入前对胚胎进行______________________________ 。
(1)获得重组卵母细胞A也会用到体细胞核移植技术,完成①过程需要用微型吸管吸出
(2)卵母细胞的获取过程中,需要对女性进行超数排卵处理,超数排卵的方法是给女性注射
(3)为了提高已有胚胎的利用率,可采用
(4)根据
(5)设计试管婴儿技术与解决不孕问题而进行的试管婴儿技术的主要区别是前者需要在植入前对胚胎进行
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【推荐3】科学家将绿色荧光蛋白(GFP)基因转入小鼠胚胎干细胞(ES)内,GFP基因若表达就会使细胞带有绿色荧光,继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠沼于科学研究,流程如图所示。请回答:
(1)在步骤①中构建基因表达载体时,需要在GFP基因的首端加入________________ 酶识别和结合的部位,有了它才能驱动GFP基因转录出mRNA,最终获得GFP。GFP基因的尾端还需有_______________ ,使转录在需要的地方停止下来。
(2)步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞,ES细胞一般从囊胚的_______________ 分离得到。在培养ES细胞时,细胞充满培养皿底部后停止分裂,这种现象称为_______________ 。如果想继续培养则是需要重新用______________ 酶处理,然后分瓶继续培养,这样的培养过程通常被称为传代培养。
(3)图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有_______________ ,再通过_________________ 技术移入代孕母鼠子宫内继续发育。
(1)在步骤①中构建基因表达载体时,需要在GFP基因的首端加入
(2)步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞,ES细胞一般从囊胚的
(3)图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有
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【推荐1】请回答下列与基因工程、胚胎工程、生态工程有关的生物学问题:
(1)基因工程技术中获得目的基因后,利用PCR技术将该基因扩增,前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成_____________ 。培育抗病转基因植物时,使用最多的抗病基因是_______ 基因和病毒复制酶基因。
(2)在胚胎工程中,早期胚胎发育到______________ 阶段即可移植到代孕母体子宫中,移植后的胚胎能在受体子宫内存活的生理基础是______________________________ 。
(3)与传统方法生成的抗体相比,单克隆抗体具有很多优点。在癌症治疗时,把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或_____________ 相结合,制成“生物导弹”,借助单克隆抗体的_________ 作用,将药物带到癌细胞位置,将其在原位杀死。单克隆抗体的制备过程应用了_____________ 技术。
(4)我国西北一些地区年降雨量较少,适宜种灌木和草,却被硬性规定种植属于乔木的杨树,致使许多地方的杨树长成半死不活状,结果防护林成为残败的“灰色长城”。其失败的原因主要是违背了_______ 原理。
(1)基因工程技术中获得目的基因后,利用PCR技术将该基因扩增,前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成
(2)在胚胎工程中,早期胚胎发育到
(3)与传统方法生成的抗体相比,单克隆抗体具有很多优点。在癌症治疗时,把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或
(4)我国西北一些地区年降雨量较少,适宜种灌木和草,却被硬性规定种植属于乔木的杨树,致使许多地方的杨树长成半死不活状,结果防护林成为残败的“灰色长城”。其失败的原因主要是违背了
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【推荐2】以下是科学家采用不同的方法培育良种牛的过程,其中①~③是结构,A~E是良种牛,a~h为操作过程。请据图回答有关问题:
(1)“试管牛”技术的操作流程是_____ (用图中字母和箭头表示)。
(2)图中数字标号②代表的结构名称_____ ,c操作时需注意将③_____ 。
(3) A~E中性别一定相同的牛有_____ (填字母),一定是雌牛的是_____ (填字母)。
(4)图中所示的激素是_____ ,过程h常用的方法是_____ 。
(5)受体母牛必须和供体牛属于同一物种,移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是_____ 。
(1)“试管牛”技术的操作流程是
(2)图中数字标号②代表的结构名称
(3) A~E中性别一定相同的牛有
(4)图中所示的激素是
(5)受体母牛必须和供体牛属于同一物种,移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是
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(0.4)
【推荐3】2018年1月25日,我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶(Kd4d)的mRNA,经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴,流程如图所示,①—⑥表示过程,该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请分析回答:
(1)2001年,美国科学家已经培育出胚胎细胞核移植猴。获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植,原因是______________________ ,恢复其全能性较难。
(2)进行过程①时,为了防止____________ 对细胞自身造成危害,应定期更换____________ 。
(3)据图分析,过程③是利用___________ 法,将成纤维细胞注入猴去核的MⅡ中期卵母细胞的________ 之间。
(4)图中过程⑤用到胚胎移植技术,其实质是早期胚胎在___________ 条件下空间位置的转移。
(5)研究人员在确定去甲基化酶(Kd4d)的mRNA的作用时,做了两组实验,其中A组用正常培养液培养融合细胞,B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞,实验结果如下图所示。分析实验数据可知,Kd4d的mRNA的作用是既能提高___________ ,又能提高___________ 。
(1)2001年,美国科学家已经培育出胚胎细胞核移植猴。获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植,原因是
(2)进行过程①时,为了防止
(3)据图分析,过程③是利用
(4)图中过程⑤用到胚胎移植技术,其实质是早期胚胎在
(5)研究人员在确定去甲基化酶(Kd4d)的mRNA的作用时,做了两组实验,其中A组用正常培养液培养融合细胞,B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞,实验结果如下图所示。分析实验数据可知,Kd4d的mRNA的作用是既能提高
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【推荐1】我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品,大致过程如图所示:
(1)哺乳动物的体外受精主要包括[a]__________ 、[b]__________ 和受精等几个主要步骤。若要充分发挥优良母畜的繁殖潜能,可给供体注射_______ ,使其排出更多的卵子。
(2)在过程C中需要用到的工具酶有________ 。要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达,完整的基因表达载体要包括目的基因、_______ 、标记基因等部分。
(3)d过程常用的方法是________ ,e过程的名称为_____________ 。
(4)若要一次获得多只完全相同的转基因牛,应采用_______ 技术,通常选择_______ 的桑椹胚或囊胚。
(5)早期胚胎发育的几个阶段:受精卵→_____ 期→桑椹胚→囊胚→__________ 。
(1)哺乳动物的体外受精主要包括[a]
(2)在过程C中需要用到的工具酶有
(3)d过程常用的方法是
(4)若要一次获得多只完全相同的转基因牛,应采用
(5)早期胚胎发育的几个阶段:受精卵→
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【推荐2】随着生物科学技术的发展,生物工程技术得到了越来越广泛的应用,回答下列相关问题:
(1)用基因工程的方法提高绵羊的生长速率,可将人的生长素基因导入绵羊的__________________ 中,在体外培养到___________ 期,移入绵羊的子宫内,若要获得同卵双胎或多胎的个体,则应采用________ 技术。
(2)培养抗虫棉时,检测所得植株染色体的DNA上是否插入了目的基因的方法是_____________________ ,从个体水平检测所得植株是否具有抗虫性状,需要做______________ 。
(3)在制备单克隆抗体的过程中,首先要用_______________________ 对融合的细胞进行筛选,选出的杂交瘤细胞具备__________________________ 的特点。
(1)用基因工程的方法提高绵羊的生长速率,可将人的生长素基因导入绵羊的
(2)培养抗虫棉时,检测所得植株染色体的DNA上是否插入了目的基因的方法是
(3)在制备单克隆抗体的过程中,首先要用
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【推荐3】请根据如图所示流程图回答下列问题(已知山羊为二倍体生物):
(1)过程①需要的工具酶是_______ ,得到基因表达载体导入受精卵常用的方法是___________ ,以受精卵为受体细胞的原因是_________________ 。
(2)过程⑤若在体外进行,则精子需要________ 后才能受精,参与受精的卵母细胞处于_______ (时期)。受精过程中有两种反应可阻止多精子入卵,这两种反应是_______________ 。
(3)如果要获得多只转基因山羊,则需要对桑椹胚或囊胚的____________ 进行均等分割,均等分割的原因是____________________________ 。
(1)过程①需要的工具酶是
(2)过程⑤若在体外进行,则精子需要
(3)如果要获得多只转基因山羊,则需要对桑椹胚或囊胚的
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