【推荐3】2010年,中科院昆明动物研究所培育出中国首例转基因猕猴。这一研究成果标志着中国科学家在非人灵长类转基因动物研究方面达到世界领先水平,为未来人类重大疾病的非人灵长类动物模型的深入研究奠定了坚实的基础。下图是转基因猕猴培育过程的示意图,请据图回答问题。

(1)在构建基因表达载体过程中,它的组成除了目的基因外,还必须有启动子、终止子以及________。过程②中常用___________的方法将目的基因导入受精卵。  
(2)在体外培养受精卵时,除了给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外,还需要提供CO₂气体以维持_____________。 
(3)图中过程⑦称为________,为使代孕雌猴与供体雌猴生殖器官的生理变化相同,此前需要用雌性激素对代孕雌猴作_______处理。 
(4)若要同时获得多只与此转基因猕猴相同的小猴,可对早期胚胎进行_________,操作时选择发育到桑椹胚或囊胚期的胚胎进行。若选用囊胚期的胚胎,操作过程需要特别注意的问题是____________________________________。

【推荐2】2020年12月中央经济工作会议指出∶种子是农业的“芯片” ，要开展种源“卡脖子”技术攻关。“抗虫和耐除草剂玉米双抗 12-5”是我国农业农村部于2020年1月颁发了转基因安全证书的玉米新品种，下图为该转基因玉米的培育过程示意图。请回答∶

（1）在研究过程中，研究人员利用相关基因组，采用_______________技术对目的基因进行扩增，在构建基因表达载体时需要用到的工具酶有_________________________________。
（2）抗虫和耐除草剂基因必须插入到Ti质粒的___________________中，才能转移并整合到受体细胞的染色体DNA上。图示将目的基因导入玉米细胞的方法是______________________________。
（3）成功导入目的基因的玉米细胞需通过___________________技术进一步培养成完整植株，该技术的原理是______________________。配制丛状苗生根培养基时，可适当增加______________（填“生长素”或“细胞分裂素”）的含量，以促进丛状苗生根。
（4）检测玉米植株细胞内是否合成抗虫蛋白，分子水平上所用的检测方法是______________________。

【推荐3】高温胁迫是影响植物生长发育的重要因素之一，高温逆境会使番茄的生长发育受到限制，转入codA基因的番茄对高温的耐受性大于野生型番茄。

注：图中限制性核酸内切酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同
（1）如图为质粒限制性核酸内切酶酶切图谱。codA基因不含图中限制性核酸内切酶识别序列。为使PCR技术扩增的codA基因能重组进该质粒，扩增的codA基因两端需分别引入_______和_______限制性核酸内切酶的识别序列。
（2）制备番茄的原生质体时，在_______环境下用酶解法处理番茄的根尖、叶片等细胞。
（3）导入目的基因的番茄细胞经_______形成愈伤组织，通过调节_______，可以从这种愈伤组织诱导出芽和根的顶端分生组织，由此再生出新的植株。
（4）番茄的培养细胞在长期培养中，其胚胎发生和器官形成能力下降，可能原因有_________（写出2点即可）。

【推荐1】A.果酒是用水果本身的糖分被酵母菌发酵成为酒精的酒，含有水果的风味与酒精，是人类最早学会酿造的酒。请回答：

   

（1）上图是人工培养获得纯净的酵母菌菌种的基本程序。配制培养基时，原料称量溶解之后，要进行___________，然后分装包扎并灭菌，常用的灭菌方法是____________。平板划线是常用的接种方法，划线之前要对接种环进行__________灭菌，原因是_______________________。
（2）研究发现具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1:野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2:制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意________和_______，加琼脂后灭菌，制成固体平板。
步骤3:将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。
步骤4:根据_______________________筛选出突变菌。
（3）酿酒过程中为检测发酵罐中酵母菌的生长状况，常要取样统计分析,并测定pH,判断取样先后顺序的主要依据是______________。如果检测到活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是_______________，发酵结束后可通过_______________的方法获得果酒。
（4）小麦脱粒以后还有大量的麦秆，主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用，原因是__________________________。
B.长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈。近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。请据图完成下列问题：

   

（1）在试管牛和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术有____________（至少写出两项）。
（2）与受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②释放第二极体；③顶体反应；④穿越透明带；⑤雌、雄原核的形成；⑥核膜消失，雌、雄原核融合。其正确的顺序为________________(填序号）。
（3）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射__________；冲卵实质上是用特定装置,将供体母牛子宫内的_______________冲洗出来。
（4）A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有_____________；图中标号3为_______，将来可发育为胎膜和胎盘；图中标号1可分离出胚胎干细胞，它们在功能上具有___________的特征，若在______________细胞上培养，可维持不分化状态。
（5）动物的早期胚胎移植到同种且__________与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞的细胞膜__________________。
（6）若要提高胚胎利用率，可采用______________技术。

【推荐2】屠呦呦因创制新型抗疟药——青蒿素获得了诺贝尔生理学或医学奖。青蒿素
是从黄花蒿中提取的，但是天然植株中青蒿素的含量普遍低，欲用植物组织培养技术快速繁殖黄花蒿，培育出青蒿素含量高且稳定的新品种。
（1）组织培养过程中，常用的培养基是_________，其中的主要碳源是_________。配制好的培养基中常常要添加___________，配制好后需要__________灭菌。
（2）外植体在消毒过程中，不慎被细菌感染，若用平板划线法分离纯化细菌，在4个区域内划线需要将接种环灼烧灭菌_____次。
（3）从黄花蒿中提取青蒿素可以用萃取法，因为它易溶于____________，而且_______（填“易”或“不易”）挥发。
（4）阅读下列材料，结合所学知识回答问题。
2012年诺贝尔生理学或医学奖授予英国和日本两位科学家。所谓细胞核重编程即将成年体细胞重新诱导回早期干细胞状态，用于形成各种类型的细胞。通过对人体细胞的重新编程，科学家们创造了诊断和治疗疾病的新方法。
①胚胎干细胞可来自于囊胚的________，能被诱导分化为多种细胞、组织，说明它具有___________的特性。
②培养胚胎干细胞的关键是要有一种既能促进细胞分裂又可抑制________的培养体系，一般我们在培养胚胎干细胞时可以采用______________作为饲养层来实现。
③若右图为运用胚胎干细胞核移植技术进行高等动物克隆的模型图，则C→D一定包含____________和____________技术。

④限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamH I、EcoR I、HindⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点，切割出来的DNA黏性末端可以相互配对的是( )

A．BamH I和EcoR I	B．BamH I和HindⅢ
C．BamH I和BglⅡ	D．EcoR I和HindⅢ

【推荐3】请回答下列（一）、（二）小题：
（一）请回答下列与基因工程相关的问题：
（1）大肠杆菌的质粒是能够_________的双链环状 DNA 分子，常被用做基因工程中的载体。但是真 正被用作载体的质粒大都是需要进行人工改造过的，比如插入了_________，便于用作筛选阳性克 隆；插入了_______的一段很短的 DNA 序列，便于装载更多种类的外源片段且可以防止目的基因 自身环化，等等。
（2）土壤农杆菌的 Ti 质粒上有一段 T-DNA 序列，可以插入到植物细胞的_____基因组中，因此， 农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系，被誉为“自然界最小的遗传工程师”。若想用用 Ti 质粒 作为抗虫基因的载体导入某种植物中，可以将_______插入到经过改造的 T-DNA 区，但要保证质 粒上的启动子、终止子、复制起始点、有些标记基因及________不被破坏，再将重组 Ti 质粒导 入土壤农杆菌中，然后借助土壤农杆菌的_____ 实现抗虫基因向植物细胞的转移和整合，然后通过 _____，得到具有抗虫能力的植物。
（二）科学家利用胚胎移植技术，使我国首例和第二例胎儿皮肤上皮细胞克隆牛“康康”和“双双”的后代——“蓓蓓”成功诞生。请回答下列问题。
（1）要获得克隆牛“康康”、“双双”，需要借助____________ 除去卵母细胞的细胞核，然后通 过新型的_________技术，使该细胞与供体细胞核融合，形成重组细胞，并促使其分裂发育成 __________ ，再进行胚胎移植。
（2）胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，胚胎移植要移植到另外一 头与供体__________ 、但未经配种的母畜的_______ ，由于母体对最终着床子宫的外来胚胎不发 生_________反应，故为胚胎移植取得成功提供了可能的生理基础。
（3）近年来，为了解决人体移植器官短缺和移植后免疫排斥这一世界性难题，科学家们采用了对猪 的器官进行改造，制造移植器官，此时需要将器官供体基因组导入某种调节因子，以抑制__填 抗原或抗体）决定基因的表达，再结合________ 技术，培育出没有免疫排斥反应的转基 因克隆猪器官。