草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,影响植物正常生长,最终导致植物死亡。目前,发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内,获得的转基因植物能耐受高浓度的草甘膦。取6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过转基因处理,但是否成功未知(转基因处理过程不影响植物正常生长)。图1为4种限制酶的识别序列和酶切位点,图2为含有目的基因的DNA片段及其具有限制酶切点。据图回答:
(1)若A、B、C浇清水,D、E、F浇含有草甘膦的水,则A~F植物中,一定能正常生长的是_________________ 。
(2)一个完整的基因表达载体除复制原点、启动子和终止子外,还应包括_________________ 。若利用酶切法获得目的基因,最应选择的限制酶是_________________ 和_________________ 。
(3)假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F没有表现出抗性,分析可能的原因_________________ 。
(1)若A、B、C浇清水,D、E、F浇含有草甘膦的水,则A~F植物中,一定能正常生长的是
(2)一个完整的基因表达载体除复制原点、启动子和终止子外,还应包括
(3)假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F没有表现出抗性,分析可能的原因
更新时间:2019-05-09 15:10:16
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【知识点】 基因工程的基本操作程序
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【推荐1】嗜热土壤芽孢杆菌产生的葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶。
(1)根据图1、图2相关酶的切点相关信息,为了将BglB基因和质粒DNA重组,应用_________ 酶分别切割质粒DNA和含BglB基因的DNA。
(2)要形成含BglB基因的重组质粒,还需加入[_________ ]酶。
A.DNA合成酶 B.β﹣葡萄糖苷酶
C.限制性内切酶 D.DNA连接酶
(3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为_________ 。
(4)据图3、4可知,要想高效利用BglB酶降解纤维素,应考虑哪些因素?_________ 。因此,BglB酶降解纤维素的反应温度最好控制在__________________ 。
A.50°C B.60°C C.70°C D.80°C
(1)根据图1、图2相关酶的切点相关信息,为了将BglB基因和质粒DNA重组,应用
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(4)据图3、4可知,要想高效利用BglB酶降解纤维素,应考虑哪些因素?
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【推荐2】埃博拉病毒(EBOV)是一种能导致人类出血热的致死性病毒,威胁人类健康。EBOV的NP蛋白在病毒复制中具有重要作用,也是检测EBOV的重要靶蛋白。实验人员用NP蛋白免疫小鼠来制备抗EBOV单克隆抗体,过程如图1所示。图2为实验人员培育超量表达NP蛋白玉米所需的NP基因片段和Ti质粒的酶切位点。强启动子是一段能增强基因表达的DNA片段;BamH I、Hind Ⅲ、EcoR I、Not I、Sac I代表不同的限制酶;T-DNA是农杆茵的Ti质粒上的DNA片段。回答下列问题:(1)诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、_______ 、______ 等。图1中筛选1过程中,在特定培养基上不能存活的细胞是______ ,筛选1得到的杂交瘤细胞能产生______ (填“一种”或“多种”)抗体。筛选2得到的所需细胞群具有______ 的特点。
(2)构建超量表达NP基因载体时用到的限制酶是_______ ,为了特异性扩增NP基因序列,需根据________ 设计特异性引物。将构建的超量表达载体导入农杆菌后,用其侵染玉米细胞,要筛选出含有NP基因的玉米细胞,需将其接种到含_________ (填“潮霉素”或“卡那霉素”)的培养基上培养,最终获得的玉米细胞通过植物组织培养得到转基因玉米,某转基因玉米植株的NP蛋白表达量较低,原因可能是_______ (答出一点)。
(2)构建超量表达NP基因载体时用到的限制酶是
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【推荐3】我们吃辣的食物,嘴巴会有灼热感。这是怎么回事呢?2021年诺贝尔生理学或医学奖获得者戴维·朱利叶斯和阿代姆·帕塔博蒂安为我们提供了该问题的答案(如图所示)。请分析回答下列问题:
(1)在食用辣椒时,辣椒素与TRPV1结合,图中所示的离子通道打开,导致感觉神经元产生________ 电位,兴奋处的膜电位分布为________ ,最终传至____________ 产生热、痛感,即辣觉。热刺激也可开启TRPV1的离子通道,吃辣椒时喝热饮会________ (填“加重”“不影响”或“减轻”)痛觉,该过程________ (填“属于”或“不属于”)反射。
(2)下列各种情形中,与辣椒素特异性结合TRPV1的机制的特点类似的是 _______。
(3)在TRPV1的发现历程中,研究者利用大鼠能够感知疼痛的神经元为材料,提取细胞中的总RNA,通过____________ 得到cDNA(基因片段),分别导入辣椒素________ (填“敏感”或“不敏感”)细胞,再经辣椒素处理后,通过特定技术手段,确定了可被辣椒素激活的TRPV1。
(4)关于图中①和②处发生的变化,下列描述正确的是________。
(5)无独有偶,薄荷糖能特异性结合并激活口腔内凉爽感觉神经元的TRPM8离子通道,后者将信号传至大脑另一区域,在炎热的夏天给人以低于27℃的“凉爽”感觉。据此判断,下列实验操作能使小鼠吃辣椒后产生“凉爽”感的是( )
(6)人摄入辣的食物后兴奋传至下丘脑体温调节中枢,经传出神经支配皮肤血管________ (填“舒张”或“收缩”),血流量________ (填“增大”或“减小”),嘴巴通红,同时汗腺分泌,散热增加,大汗淋漓。
(1)在食用辣椒时,辣椒素与TRPV1结合,图中所示的离子通道打开,导致感觉神经元产生
(2)下列各种情形中,与辣椒素特异性结合TRPV1的机制的特点类似的是 _______。
A.限制酶和DNA片段 | B.淀粉酶和葡萄糖 |
C.氨基酸和mRNA | D.神经递质和神经递质受体 |
(4)关于图中①和②处发生的变化,下列描述正确的是________。
A.均发生膜电位的变化 |
B.均有神经递质的合成和释放 |
C.均发生离子通道通透性的改变 |
D.均发生电信号→化学信号→电信号的转变 |
A.通过基因操作破坏小鼠TRPV1的编码基因 |
B.进一步提升小鼠口腔中TRPM8蛋白的表达水平 |
C.在小鼠热痛感觉神经元中用TRPM8置换TRPV1 |
D.在小鼠凉爽感觉神经元中表达TRPV1的编码基因 |
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