4 . 蚊虫分布范围广，生物量大，其中的雌蚊会叮咬人类，可传播多种传染病，须采取防控措施防止传病蚊种泛滥。研究者利用CRISPR/Cas9基因编辑系统和同源重组修复技术提高蚊虫群体中雄蚊比例。
(1)CRISPR/Cas9系统可以实现对双链DNA的精确切割，由三部分组成：crRNA、tracrRNA及Cas9蛋白，如图1。crRNA会与tracrRNA结合形成sgRNA，sgRNA通过__________与目标DNA结合，引导Cas9蛋白对DNA进行切割，导致其断裂。

(2)同源重组修复是一种高保真的DNA双链断裂、修复技术，原理如图2，其过程为CRISPR/Cas9基因编辑系统切割使DNA断裂后，启动同源修复，使得染色体DNA上的靶向序列被替换成所需序列。
①现需构建基因表达载体，请结合图2选出目的基因中必要的结构或基因__________。
A.限定在体细胞内表达的启动子
B.限定在生殖细胞内表达的启动子
C.限定在受精卵内表达的启动子
D.I-Ppol基因（能够切割X染色体DNA的核酸酶基因）
E.氨苄青霉素抗性基因
②通过____________技术将基因表达载体导入受精卵，该受精卵发育成_____________性蚊虫。Cas9蛋白将对应的靶向序列进行切割，以基因表达载体中同源序列间的DNA为模板进行修复，最终实现子代都继承相应基因，使群体中雄蚊比例升高。
(3)除利用转基因灭蚊之外，还存在寄生菌灭蚊技术，当雄蚊被沃尔巴克菌感染后，精子会被细菌产生的毒素污染。健康雌蚊的卵细胞与这些“毒精子”相遇后，产生细胞质不相容效应，导致后代无法正常发育。相对于寄生菌灭蚊，利用转基因灭蚊的优势有_____________（答出两点）。
(4)目前我国尚不允许释放转基因蚊虫，请解释原因___________。