1 . 下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	BclⅠ	Sau3AⅠ	HindⅢ
识别序 列及切 割位点

(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于________态的大肠杆菌。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加________，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中______________。
(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为_______，对于该部位，这两种酶________(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。
(4)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得________种大小不同的DNA片段。

2 . 利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，下列叙述正确的是(       )

A．过程①所需的逆转录酶可取自于抗农药马拉硫磷小菜蛾的任一细胞

B．过程②利用 PCR 技术扩增目的基因需使用耐高温的解旋酶和引物对

C．过程③常用 Ca2+处理大肠杆菌使其成为易于吸收 DNA 的感受态细胞

D．过程④可利用抗原一抗体杂交技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞

3 . 研究人员将抗盐基因转入普通烟草培育出抗盐烟草，该过程所用的质粒与含抗盐基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制性核酸内切酶BamHI、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。图3表示该过程中利用含目的基因的农杆菌进行转化作用的示意图。请回答下列问题。
（1）图1质粒中没有标注出来的基本结构是____________。
（2）用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时，应选用限制酶_________切割质粒，选用 __________限制酶切割含目的基因的DNA片段。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的_____键。
（3）将上述切开的质粒与目的基因混合，加入DNA连接酶连接后，导入受体受体细胞，受体细胞的类型（对两种抗生素表现出抗性R或敏感性S）包含 __________（不考虑基因突变）。
①XR、YR        ②XR、YS          ③XS、YR        ④XS、YS
（4）将图3过程________（填序号）中发生了基因重组，过程②、③所用的培养基中，通常要调控好______两类激素的比例。
（5）从个体水平鉴定抗盐转基因烟草是否培育成功的方法是__________。