【推荐3】胰岛素对治疗糖尿病有积极的作用，为了批量生产人胰岛素，科学家提出了两种通过基因工程改造大肠杆菌来生产人胰岛素的方法。方法1：根据胰岛素A、B两条肽链人工合成两种DNA片段，利用大肠杆菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素。方法2：利用胰岛B细胞中的mRNA得到胰岛素基因，导入大肠杆菌获得胰岛素。这两种方法使用同一种质粒作为载体。下图为过程中使用的质粒及目的基因的部分结构，请回答下列问题。

(1)该项技术操作时不选用EcoRⅠ切割质粒的原因是_____。将人胰岛素基因导入大肠杆菌，需先构建由启动子、目的基因、标记基因、终止子等组成的重组质粒，其中启动子的作用是_____。以上_____（填“方法1”“方法2”或“方法1和方法2”）获取的目的基因中不含人胰岛素基因的启动子、终止子和内含子。
(2)若胰岛素基因的编码链（与模板链互补的链）首端到末端的序列为5′—ATCTACGCGCTCATCCG…（省略3n个核苷酸序列）…CGCAGCAATGAGTAGCG—3′。为使目的基因与载体正确连接，在设计引物时可添加限制酶_____的识别序列。某同学设计如下四种PCR引物，其中适合选用的一对引物是_____。
A．5′—CTCGAGGGAAAGTCGAGT—3′
B．5'—CTCGAGATCTACGCGCTC—3′
C．5′—CAATTGCGCTACTCATTG—3′
D．5'—CAATTGCCTTTCAGCTCA—3′
(3)β-半乳糖苷酶可分解无色的X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。大肠杆菌经_____处理后，与重组质粒混合培养一段时间，再接种到添加了_____的培养基上，筛选出_____的菌落即为工程菌种。

【推荐1】现代生物工程技术推动了免疫学、畜牧业和生态工程的发展，回答下列相关问题：
（1）植物组织培养就是在____________和____________条件下，将离体的器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生____________、丛芽，最终形成完整的植株。
（2）对大面积烧伤病人，借助____________技术可获取大量自身健康皮肤用于移植。培养的条件需要____________、合适的营养、适宜的温度和PH、通入含有95%空气和5%C0₂混合气体。
（3）用细胞核移植技术繁育良种牛的过程需要进行胚胎移植，移植前需要对受体进行____________ 技术处理，因受体对外来胚胎基本不发生____________，为胚胎的存活提供了可能。
（4）依据生态工程的____________原理，黄河三角洲自然保护区的建立需考虑提高农民经济收入，使保护环境和经济发展相互协调。

【推荐2】乙肝在我国的发病率很高，其病因是乙型肝炎病毒（HBV）侵染肝脏细胞引起肝脏细胞的严重损伤。回答下列问题：
(1)培养肝脏细胞前，将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制成的培养基，称为________，由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，在使用该培养基时，通常需要加入________等天然成分。细胞培养时，需要提供5%的CO₂环境，其主要作用是________。
(2)HBV携带者肝脏中的T细胞表面存在高表达抑制性受体（TIGIT分子），其与肝脏等细胞表面的某信号分子结合后，会________（填“促进”或“抑制”）T细胞活性，使肝脏免疫功能下降。若给HBV携带者注射抗TIGIT的单抗，则会使肝脏的免疫功能提高，据题分析，原因可能是________。
(3)研究人员将骨髓间充质干细胞（BMSC）应用于严重损伤肝脏的再生，Notch蛋白可抑制BMSC向特定方向分化，下图为BMSC中Notch信号通路示意图。由图可知，信号分子可使细胞膜上Notch蛋白的数量________（填“增加”或“减少”）。若化学物质B可抑制Notch基因的表达，则其能作为干细胞生长因子诱导BMSC向特定方向分化，据题分析，原因是________。

【推荐3】下图是医学研究中制备抗体的两种技术路线模式简图。

（1）图示流程涉及的生物技术有_____________________。
（2）细胞N是__________细胞。细胞M的特点有__________，过程①中，常用的诱导细胞融合的化学试剂是__________。
（3）获得目的基因J的方法有：______________________________（写出两种）。
（4）抗体n和抗体m的结构__________（填“相同”、“不相同”），原因是___________。

【推荐1】胃癌是我国发生率很高的一种恶性疾病，制备抑制胃癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体制备过程如下图：
   
(1)诱导骨髓瘤细胞与甲融合，可用的诱导因素有离心、电激、________________等(写出两种)。
(2)为筛选出丙，需将乙放入含有5％CO₂的混合气体的培养箱培养，其中CO₂的主要作用是_________________。
(3)在甲、丙及骨髓瘤细胞中，只有丙经培养后，可获得大量的抗胃癌单克隆抗体，原因是________________。

【推荐2】2018年1月25日，我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物-食蟹猴，流程如图1所示，①~⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请分析回答：

(1)采集雌性食蟹猴卵母细胞，在体外培养至_______，通常使用_______方法去除卵母细胞的细胞核，将成纤维细胞注入去核卵母细胞，用电融合法使两细胞融合形成重构胚胎，用________激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。
(2)重构胚具有发育成完整个体的能力，重构胚的细胞核与细胞质中的遗传物质分别来源于________、________，图1过程②中去掉卵母细胞核的目的是________。
(3)研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如图2所示。分析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是________。
(4)体细胞核移植技术与诱导多功能干细胞（iPS细胞）都可以生成干细胞，iPS细胞主要通过向受体细胞内导入特定基因或蛋白质，诱导受体细胞转化为类似胚胎干细胞的状态，体细胞核移植技术与iPS细胞生成干细胞的过程有什么不同________，克隆猴与传统的动物模型（如小鼠）相比，在开发治疗人类疾病新药物上的优势是________。

【推荐1】治疗性克隆和生殖性克隆都与胚胎工程有关，请回答下列相关问题：
（1）克隆中用到的“去核卵细胞”实际上是处于______期的卵母细胞。若要避免在器官移植时发生排斥反应，可以用______与去核卵细胞融合。
（2）移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是___________________。
（3）构建重组细胞后，经培养形成胚胎干细胞，胚胎干细胞在______上或者在添加抑制因子的培养液中能维持不分化状态。在培养液中加入______，就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化，使其形成特定的器官。
（4）生殖性克隆可能要用到的技术有______、______、______，我国政府对生殖性克隆人的态度是_________，对治疗性克隆的态度是_________。

【推荐2】科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培养出克隆鼠，流程如下图所示。请回答：

(1)进行细胞培养时，用_____________法对从黑鼠体内获得的成块组织进行处理，分散成单个细胞；与成块组织相比，分散成单个细胞后容易培养，原因是_______________。（答出1点即可）
(2)对黑鼠体细胞进行的初次培养称为____________，细胞贴壁生长到一定阶段会发生接触抑制，接触抑制是指______________。
(3)图中重组囊胚通过___________技术移入白鼠子宫内继续发育，克隆鼠的遗传特性与黑鼠相同，理由是________________。
(4)对iPS细胞进行定向诱导分化后可用于疾病的治疗等。若诱导iPS细胞定向分化为生殖细胞的技术发展成熟，该技术可能的应用有_________________。（至少答出2点）

【推荐3】“三合一”胚胎人工授精技术诞生的婴儿含有“一父两母”三人的遗传物质，可有效防止某些遗传病的发生。据图回答下列问题：

(1)诞生“三亲婴儿”的过程中，用到的胚胎工程技术有_______（至少写两种）。
(2)三亲婴儿的体细胞中有________（填“大于”“等于”或“小于”）1/2的DNA来自母亲卵母细胞。
(3)由于女性的自然生理周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射_______来促进排卵，该物质可由人体的______（填器官）分泌。
(4)卵母细胞与精子体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查______。获得的早期胚胎若暂不移植给受体，可采用______法保存。
(5)从早期胚胎或________中分离出的胚胎干细胞可诱导分化出不同的组织细胞，这是因为胚胎干细胞在功能上具有_________，在形态上表现为______。