【推荐1】土壤是微生物生长的天然培养基，可以从土壤中筛选出一些优良的菌种，用于工业化生长或生态修复等。回答下列问题。
(1)实验室内，培养微生物所用培养基中一般含有4大营养成分，即________________、碳源和氮源。所谓碳源指的是_______________。
(2)与获得单菌落的培养基相比，对土壤微生物进行扩大培养时，所配制的培养基中不能含有_______________。
(3)为了统计某园地土壤中纤维素分解菌的数量，所用培养基中需加入纤维素和刚果红，这两种物质的作用分别是_______________、________________。若接种稀释10⁴倍的土壤浸出液的培养基上长出符合要求的菌落平均数为40，未接种土壤稀释液的培养基上未长出菌落，则据上述信息_________________（填“能”或“不能”）计算出每克土壤中纤维素分解菌的数量，理由是_______________。
(4)科研人员从土壤中分离出来一种能降解农药S的微生物M，用于修复被农药S污染的土壤。为了进一步探究微生物M的降解能力与农药S浓度的关系，请简要写出实验设计思路：________________。

【推荐2】已知某细菌的两种突变类型细菌Ⅰ和细菌Ⅱ的营养条件和菌落特征都相同，但细菌Ⅰ能分解有机物A而不能分解有机物B，细菌Ⅱ能分解有机物B而不能分解有机物A。现有这两种类型细菌的混合液样品，要将其分离，有人设计了一种方案，部分操作步骤如下图。

（1）步骤二使用的是____________培养基，其中含有细菌生长所需的水、无机盐、碳源和氮源等营养物质，此外还必须加入__________，以利于对不同菌种进行分离操作。
（2）步骤一采用____________法接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可形成单个、独立的_____________，最终可能得到纯种的细菌；要进行上述接种操作，必须在____________及酒精灯火焰附近进行，以避免杂菌污染。
（3）步骤三中，若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，当培养液中检测出如下的实验结果，其中能说明培养液只有细菌Ⅰ的是_________________。
A.化合物A与B含量都明显下降                                 B.化合物A含量明显下降，B含量基本不变
C.化合物A含量基本不变，B含量明显下降                    D.化合物A、B含量都基本不变

【推荐3】放线菌是重要的抗生素产生菌，在有机质丰富、通气性好的土壤中含量较多。要研究某种放线菌，必须首先从混杂的微生物群体中将它们分离出来。抗生素滥用情况严重，且以往的抗生素已经不能有效地治疗人类的疾病，所以，继续寻找和筛选产生新型抗菌物质的放线菌有着重要意义。放线菌产生的抗生素抑菌效果可通过抑菌实验来获得。如图一所示为分离和鉴定实验用到的部分仪器。请结合图示分析回答下列问题：

（1）分离放线菌时所用的培养基除了含有微生物生长所必需的营养要素外，还要加入10%的酚，该药品的作用是使细菌、霉菌得以淘汰，可以判断，该培养基属于_________培养基。
（2）分离采用的方法为________，②可用于__________操作，通过该操作才可在平板上得到单菌落。
（3）举出③在分离时的两个用途____________、_______________。

（4）放线菌的抑菌效果鉴定时，先将分离后经活化的放线菌接种到发酵培养液中，37℃培养3天，将培养液离心，应取离心后的______________进行下一步实验。图二中A、B、C分别为涂布有金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌悬液的三个平板，图中各放置了六只牛津杯（图一中④），每个平板右侧三个杯为对照。上述制得的上清液放置的位置为____________，图中抑菌效果最好的是__________组。

【推荐1】已知筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤和大致流程如下。

A．把大量对链霉素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1表面，在适宜的无菌条件下培养；
B．待培养基上长出密集的小菌落后，用影印法依次接种到不含链霉素的培养基2和含有链霉素的培养基3上，然后在适宜的无菌条件下培养；
C．一段时间后，在培养基3上出现了抗链霉素的大肠杆菌菌落，将其挑选出来再进一步筛选。
（1）制备固体培养基的基本步骤一般包括：计算、称量、_________，若需调节pH，应在灭菌之____________（填“前”或“后”）进行操作。实验中对培养皿和培养基一般采用的灭菌方法依次是__________________。
（2）从功能上看，含有链霉素的培养基属于____________，该类培养基的作用原理是____________________________。
（3）欲纯化抗链霉素的菌种，可将图中____________号培养基上的菌落影印到新的含链霉素的培养基上，待长出菌落后重复以上过程。影印法可用于菌种的纯化，常用的纯化方法还有_____________。
（4）现有抗大肠杆菌突变抑制剂，为探究抗链霉素突变发生在大肠杆菌接触链霉素之前，还是在接触之后，请简要写出实验思路，并预期实验结果和结论_______。

【推荐2】普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。

（1）图甲中为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以________作为唯一碳源。②、③过程需重复几次，目的是_______________________________。
（2）在实验室进行酵母菌培养时，为检验使用的培养基灭菌是否合格，最简单的操作方法是_____________________________________。   
（3）某同学甲尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是________________；从接种后酵母菌生长情况推测该同学接种时可能的操作失误是________________________。
（4）另一同学乙在灭菌和倒平板时进行如下操作，其中正确的是______。
A．将玻璃棒、试管、培养基、培养皿及需接种的酵母菌一同放入高压蒸汽锅中灭菌
B．高压蒸汽灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖
C．培养基灭菌后，冷却至室温后再倒平板
D．等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上
（5）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________（填“工程酵母菌”或“普通酵母菌”）的发酵罐需要先排气，其原因是：_______________________________________________________________。

【推荐3】《Live Science》曾撰文指出手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多，最近国内微博、微信又对此大量传播，央视和北京卫视通过某科研单位进行了实验调查，下图为实验调查结果。请分析回答下列相关问题：

（1）为了防止杂菌污染，在实验前需要对用于培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌，常见的灭菌方法有______________________。图中两电视台所采用的接种方法均为稀释涂布平板法，该方法还常用来统计样品中活菌的数目，但往往统计值比实际值偏低，原因是_____________________________________。
（2）经研究发现手机屏上分布有大量微生物，其中有大家所熟知的大肠杆菌、酵母菌等，区别二者的主要依据是_________________________________。通过进一步检查发现，两组实验操作步骤均正确且完全一致，但报道结果却截然不同，你认为最可能的原因是： _____________。
（3）按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10m1菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1ml稀释倍数为10³的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为__________________个/cm²。
（4）已知金黄色葡萄球菌的最适生长温度为37℃，并且有高度的耐盐性，可以在10%~15%NaCl肉汤培养基中生长，某同学想快速培养大量的金黄色葡萄球菌应该如何操作？____________。该同学分离得到金黄色葡萄球菌后，将其接种到试管的固体斜面培养基上进行临时保存，该保存方法的缺点是________________。

【推荐1】如图表示从土壤中分离分解尿素的细菌的实验过程，回答下列有关问题：

（1）该实验中，培养基中除尿素外，还应含有_______________________等营养成分。
（2）实验中为什么要对土壤样品进行稀释？_________________________________________
（3）图中将细菌转移到固体培养基上接种时，可采用的方法是__________________________若将100ml土壤样液稀释10⁵倍，取0.1ml稀释液均匀涂布在培养基表面，测得菌落数的平均值为121个（空白对照组无污染），则原来的100ml样液中含有该细菌_____________个。
（4）如果将此培养基改为用来分离分解纤维素的微生物的培养基，应将培养基的成分做哪些改变？_______________________________________________

【推荐2】回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与分离以尿素为氮源的微生物有关的问题：
（1）有些细菌含有______，它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源。请用化学反应式表示这类细菌降解尿素的过程____________。
（2）本实验需通过比较尿素固体培养基和LB固体培养基菌上的落数，了解土壤稀释液中能以尿素为氮源的微生物的比例，因此要用____________（填方法）进行接种。配置培养基时选择琼脂糖作为凝固剂的原因是__________________。尿素溶液的灭菌选择的方法是____________。
（3）已知氨与纳氏试剂反应生成淡红色络合物。为了定量测定所分离的微生物对尿素的降解能力，可选用液体培养基培养，并利用光电比色法测定培养液NH₃的含量。步骤如下：第一步，预实验。将培养液过滤和脱色处理后，用纳氏试剂显色处理。用光程为1cm的比色杯在570nm处测定______。若该值低，应选择______（A．增大光程，光波长不变B．增大光程，光波长增加C．减小光程，光波长不变D．减小光程，光波长增加）处再次测定，直到数据适宜为止。第二步，标准曲线的制作。用蒸馏水配制______，与茚三酮试剂反应后，用比色计测定，并制作以氨浓度与光密度值的标准曲线。第三步，样品处理。将培养液过滤后，进行脱色处理，用纳氏试剂显色处理。第四步，样品测定与计算。
（二）回答与获得抗除草剂转基因玉米有关的问题：

（1）构建表达载体选择限制酶时，要求Ti质粒内每种限制酶只有一个切割位点，同时要求酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同，这个过程需用______种限制酶，目的是______。若除草剂抗性基因G含量较低，可以通过______得到大量目的基因。草剂抗性基因G和Ti质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是______。
（2）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带______插入受体细胞的核DNA。若核DNA中仅插入一个G基因，自交后代含G基因的植株中，纯合子占______。
（3）获得抗除草剂转基因玉米涉及到多次筛选，其中筛选含重组质粒的农杆菌应使用含______的选择培养基，使用含______的选择培养基筛选出转化的愈伤组织，再诱导愈伤组织再生出抗除草剂转基因玉米。

【推荐3】饮料酒在生产过程中会产生少量尿素，酒体呈酸性。尿素能与酒精反应生成有害物质，脲酶能分解酒体中的尿素。请回答下列问题：
(1)对土壤溶液中酸性脲酶菌进行富集培养(初筛)时，培养基的氮源应选用___________，与固体培养基相比，液体培养基更适于富集培养的原因是___________。
(2)复筛酸性脲酶菌的培养基为中性固体培养基，以酚红为指示剂。经接种、培养后，发现平板上有的菌落周围出现红色圈，有的没有。在挑选时，应选择___________(“有红色圈的菌落”无红色圈的菌落”)。
(3)从酸性脲酶菌中提取脲酶后，不宜直接将脲酶加入酒体中，原因是___________。将酸性脲酶和海藻酸钠混合，用注射器滴入凝结液中形成珠粒，这种固化酶的方法称为___________。研究发现海藻酸钠浓度过高时脲酶的活性偏低，原因是___________。
(4)工业化处理酒体中尿素时，若酒体在一次流经酸性脲酶凝胶反应柱后，尿素含量仍高于产品标准，在不增加柱高的前提下，改进生产工艺流程的措施是___________。

【推荐1】大蒜皮中含有丰富的纤维素，可分解再利用。研究人员从大蒜皮自然降解物中 筛选出 J-5 菌株，该菌株能产生 CMC 酶分解纤维素，相关筛选和分离过程如图 16 所示，其中①和②表示过程。
（1）图中过程①所用的接种方法是_________________________ ；过程②用于分离纯化菌种，其所用的接种方法是 _________________________；①②接种过程均需在_________________________ 条件下进行。
（2） 根据题意和 图分析 ， 图中筛选 J-5 菌株的实验原理是_________________________ 。

为了研究 J-5 菌株的最佳产 CMC 酶条件，研究人员做了不同水平的料水比（大 蒜皮粉与水的比值）、碳氮比和初始 pH 值的组合实验。上表示三种影响因素的 低中高水平 （-1、0、1），下表示各组合对 J-5 菌株产 CMC 酶量的影响结果（以 酶活力表示）。

实验号	料水比	碳氮比	初始 pH 值	CMC 酶活力 （U/g）
1	-1	-1	0	33.054
2	1	-1	0	36.873
3	-1	1	0	47.996
4	1	1	0	55.187
5	-1	0	-1	47.771
6	-1	0	1	42.457
7	1	0	-1	54.962
8	1	0	1	45.524
9	0	-1	-1	37.323
10	0	1	-1	54.625
11	0	-1	1	35.076
12	0	1	1	55.299
13	0	0	0	57.883

（3）表 6 中实验号 3 组合的料水比、碳氮比和初始 pH 值实际数值依次是_________________________。
据表 6 推测，料水比、碳氮比和初始 pH 值这三种因素中，影响产 CMC酶量最显著的因素是________________________。判断依据是________________________

【推荐2】乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备步骤如下：
产乳糖酶微生物L的筛选→产乳糖酶微生物L的培养→乳糖酶的提取纯化
（1）下表的培养液pH均为7．0，若要筛选微生物L，则不能选择表中的_____培养液。

培养液	乳糖	乳糖酶	NaNO2	牛肉膏	K2HPO4	KCl	MgSO4·7H2O	FeSO4
A	25g/L	/	/	/	1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
B	/	/	3g/L	/	1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
C	25g/L	1μg/L	/	3g/L	1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
D	25g/L	/	3g/L	/	1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L

（2）为了获得能产乳糖酶的微生物L的单菌落，可采用_______________法将初筛菌液接种在固体培养基上。
（3）扩大培养微生物L时，通过增加营养物质的比例________(可以/不可以)提高种群密度，分析说明原因_____________________________________________________________________________。
（4）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见图，推测菌______更适合用于发酵，理由是____________________________。

【推荐3】生物乙醇是指通过微生物的发酵将各种生物质转化为燃料酒精。它可以单独或与汽油混含配制成乙醇汽油作为汽车燃料。我国成功利用农作物废弃物—秸秆（主要成分为纤维素）代替粮食作为原料来进行燃料乙醇的工业化生产。其主要技术流程为：秸秆→秸秆颗粒→反应罐水解→过滤除渣→酒精发酵→蒸馏。
（1）将秸秆颗粒装入反应罐进行水解，需加入_______________的微生物，从而能将秸秆中的成分转变成葡萄糖。从土壤中获取该微生物时，首先选择培养，然后通过_______________法直接筛选出该微生物。
（2）若要对筛选获得的菌液进行计数，应将菌液用______________法接种到平板上。如果将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别加入0.1mL的稀释液，经过培养后，3个平板的菌落分别是93、96、99，据此可得出每升菌液中的活菌数为____________，通常运用该方法统计出的菌落数目______（高于、低于或等于）活菌的实际数目，原因是__________________________________________________。
（3）酒精发酵阶段需接种的微生物是___________，该微生物在_______________的发酵液中可以生长繁殖，而绝大多数其他的微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。