【推荐1】研究发现一些嗜冷细菌产生的蛋白酶可使乳蛋白分解，导致牛奶变质。为了筛选检测变质牛奶中的嗜冷细菌，某研学小组做了如图所示实验。（注：培养皿旁的数字代表菌落数目），请回答下列问题：
(1)牛奶饮用前要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物，与煮沸消毒相比，巴氏消毒的牛奶在常温（约28℃）下保存时间较短，原因是____________________________________，导致牛奶变质。
(2)配制培养基是培养微生物的第一步。各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、无机盐、__________、氮源。若要筛选嗜冷细菌，应将牛奶样品稀释液接种在以_________为唯一氮源的固体培养基上，并且在_________的环境条件下培养，以利于嗜冷细菌生长，抑制或阻止其他微生物的生长。
(3)据图分析，研学小组采用的是___________法分离和计数嗜冷细菌。
   
(4)用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组？______（填“需要”或“不需要”），其原因是________________________________。
(5)按照菌落计数的要求，据图可得出1ml牛奶样品中嗜冷细菌的活菌数为_________个。

【推荐2】为了研究大肠杆菌对抗生素抗药性的形成是否由抗生素刺激产生，科学家用影印法进行下列实验。请回答下列问题：
步骤1：取普通大肠杆菌培养基若干，分别标记 A₁、A₂、A₃…取 含青霉素的大肠杆菌培养基若干，分别标记B₁、B₂、B₃。
步骤2：将待测大肠杆菌培养液接种在A₁培养基表面，在适宜条 件下培养一段时间，培养基的表面会出现一些菌落。
步骤3：用灭菌后的丝绒包上棉花在A₁上轻轻盖一下，再在B₁上轻轻盖一下，将A₁的菌落位置准确“复制”到B₁中。培养一段时间后，B₁中一定部位出现了少量菌落。
步骤4：根据B₁中菌落的位置，将A₁中对应位置的菌落取出（见图），均匀涂抹在A₂的表面，培养一段时间后，培养基表面又会出现许多菌落。
步骤5：反复重复步骤3、4。

（1）制备该实验使用的培养基时，除了加入水、营养物质和抗生素以外，还必须加入__________。平板冷凝后，要将平板倒置的原因是___________。
（2）该实验中，将大肠杆菌接种在A₁培养基上应使用____________法。此法得到的菌落数往往____________接种液中的活菌数。
（3）接种后，将未接种的培养基同时放在恒温箱里24 h，若_____________，则说明培养基没有被杂菌污染。
（4）经过多次反复重复步骤 3、4，最后 A_n和 B_n培养基上的菌落数会________（填“不同”或“基本相同”），这说明大肠杆菌抗药性的产生_______________（填“早于”或“晚于”）与青霉素接触的时间。

【推荐3】 （一）疫情下，各地的口罩使用量居高不下，为加快废弃口罩的处理，避免污染环境，某科研团队准备从土壤中筛选出能高效降解一次性口罩（熔喷布）的细菌（不分解琼脂），请回答下列问题。
（1）培养基的配置和灭菌：根据目标微生物的特性，配置相应的培养基，熔喷布主要成分为聚丙烯纤维（PP，组成仅含有C、H两种元素），用于筛选的固体培养基除需加入经过处理的聚丙烯粉末作为_______________外，还应加入___________、无机盐、水、琼脂等。配置好后，用______________________法进行灭菌。
（2）目的菌的获取、选择、扩大培养：目的细菌大多分布在距地表约5～10cm的潮湿土壤层， 因此土壤取样时，一般_____________________。在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂，目的菌的作用可使目的菌落周围出现透明圈，应当选择_______________________________的菌落作为目的菌群，接种于液体培养基中再进行扩大培养。
（3）目的菌的保存：在无菌操作下，用______________获取目的菌接种在斜面培养基上，培养适当时间后，置于4℃冰箱中保存。
（4）工业化使用：已知目的菌分解PP需要多种酶的共同参与，目的菌比酶分子大得多，工厂化降解PP时，通常采用______________法来固定目的菌。影响目的菌降解熔喷布效果的因素有温度、pH以及____________________________________________________等（答出两点即可）。
（二）草甘膦是一种广谱高效的灭生性除草剂，它通过与 EPSPS（叶绿体中的一种酶）结合，抑制EPSPS的作用，阻断芳香族氨基酸的合成，从而引起细胞死亡。为了提高普通棉花对草甘膦的抗性，科学家通过转基因的方法获得转基因抗草甘膦棉花植株。请回答下列问题：
（1）方法一叶绿体基因工程：科学家通过转基因的方法将某外源EPSPS基因转入棉花植株的叶绿体中，使其产生更多的 EPSPS，使得转基因棉花对草甘膦的抗性可达5mmol/L （比野生型棉花高10倍）。体外扩增 EPSPS基因常采用_____________。将外源基因导入叶绿体需穿过____________________________膜（具体名称），科研人员为将EPSPS基因导入叶绿体，利用压缩气体产生的动力，将EPSPS基因包裹在钨粉粒子表面成功打入叶绿体中。EPSPS基因导入成功后，是否赋予了棉花对草甘膦的预期抗性，还需要对转基因棉花进行的鉴定操作是________________。
（2）方法二细胞核基因工程：获取目的基因，将获取的三个抗草甘膦基因G10插入质粒，重组质粒的部分结构（箭头表示转录方向）如图所示。G10插入质粒后，不能影响质粒的_____________。将消毒后的棉花胚与含重组质粒的农杆菌在培养基上共培养，目的是___________________。将共同培养后的棉花胚转入含有营养物以及___________________的培养基中脱菌、诱导培养和筛选，从而得到转基因抗草甘膦棉花植株。

（3）从生物安全角度分析，叶绿体基因工程与细胞核基因工程相比，安全性更高的原因是____。

【推荐1】饲料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，家畜、家禽等动物因不含植酸酶而不能充分利用植酸中的磷元素，造成磷元素的浪费。植酸酶能催化分解植酸，生成肌醇和磷酸，有利于动物的吸收利用。因此，植酸酶成为饲料的添加剂，商品化植酸酶主要来自微生物。
微生物的培养需要适宜的培养基，下表是微生物培养基的成分，其中，植酸钙不溶于水，呈不透明的白色，但能被植酸酶分解。

培养基	蛋白胨	牛肉膏	NaCl	水	植酸钙
1号	10克	5克	5克	1L	—
2号	10克	5克	5克	1L	3克
3号	10克	5克	5克	1L	5克

（1）表中的蛋白胨、牛肉膏主要提供微生物生长所需_____________至少写出3种）元素。其中1号培养基的作用是_____________。
（2）为了有效分离出高产植酸酶的菌种，培养基中还需要添加_____________；接种菌种的方法一般采用____________。为防止菌量过多，接种前一般要对菌液进行____________。
（3）培养基中加植酸钙的目的是___________________________________。
（4）微生物培养一段时间后，可以根据培养基有关现象进行高产分泌植酸酶菌种的筛选，写出你判断、筛选合乎要求菌种的方法：__________________________________________

【推荐2】人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的利用价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选出纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素的能力进行了研究；刚果红（CR溶液）可以与纤维素形成红色复合物，不与纤维素降解产物（纤维二糖和葡萄糖）发生这种反应。
(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即_____、_____和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成_____，第三种酶将其进一步分解为葡萄糖。
(2)在涂布平板筛选时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多（不超过0．1mL）的原因是_____。
(3)刚果红（CR溶液）可以与纤维素形成红色复合物，不与纤维素降解产物（纤维二糖和葡萄糖）发生这种反应，我们可以通过观察菌落是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，透明圈越大说明_____，此时用的培养基按物理性质划分属于_____。
(4)该小组采用稀释涂布平板法检测样品中纤维素分解菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_____；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为79、78和77．据此可得出每升样品中的活菌数为_____。

【推荐3】黄粉虫又叫“面包虫”，对环境条件适应能力极强，可以肤皮等小麦加工副产品为食，干燥的黄粉虫不同发育时期的蛋白质含量如下表所示。

发育阶段	幼虫	蛹	成虫
蛋白质含量（g/100g干重）	40	57	60

(1)黄粉虫被誉为“蛋白质饲料库”，是进行家禽、鱼类、牛蛙等高蛋白类特种养殖不可多得的良种饲料，这是因为它具有_____等优点（至少答两点）。
(2)北京航空航天大学研究团队发现取自美国的黄粉虫肠道细菌能高效降解低密度泡沫塑料（主要成分为聚苯乙烯）。为从黄粉虫肠道内分离纯化能降解聚苯乙烯的细菌，研究者进行了如图所示实验。

注：Ⅰ号培养基：物质X、无机盐、氮源、水；Ⅱ号培养基：物质X、无机盐、氮源、物质Y、水
①物质X和物质Y分别是_____。
②富集培养黄粉虫肠道细菌时需要对培养基（培养物）进行一定的处理，这些处理应当包括_____。
A、将培养基pH调至弱酸性
B、给培养基中加入凝固剂（琼脂）
C、对培养基进行高压蒸汽灭菌
D、将培养物置于低氧环境中
E、将培养物置于恒温培养箱中
③为使菌液能均匀的涂布在培养基表面，进行涂布时应当转动培养皿，若实验操作准确，但在培养基表面却未发现单菌落，原因可能是_____。
④从上述平板中共得到颜色、透明度、菌落形状等不同的3种菌落PI、P2和P3。研究人员欲进一步比较3种菌对PS的分解效率，请补充完善分离实验的操作步骤。
a、分别挑取3种菌，制成菌悬液。
b、实验组处理：将适量菌悬液分别加入含聚苯乙烯薄片的_____（填“液体”或“固体”）无碳培养基中培养。对照组的处理是_____。
c、60天后，比较各组的塑料薄片大小。

【推荐1】手机是一种便捷通讯工具，在方便人们通讯联络的同时，也逐渐成为细菌等病原体的传播媒介。为了解附着在手机上的细菌种类和数量，某生物兴趣小组的同学进行了取样调查，实验操作流程如下图所示。请据图回答下列问题：
   
(1)对附着在手机上细菌进行取样培养后，对菌液进行系列梯度稀释的目的是______。通常平板中菌落数为______时，适于计数。
(2)平板A上生长的菌落有多种形态，说明_____。若要使菌落都能在平板A上生长，下列培养基组分中最合理的是______（选填“甲、乙、丙”），原因是_____。涂布菌液前要检验平板A的培养基是否合格，可采用的方法是______。

培养基编号	培养基组分
甲	蔗糖、NaCl、琼脂、水
乙	牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、水
丙	蛋白胨、NaCl、蔗糖、水

(3)初筛后将平板B的菌落通过“影印”方法接种到C培养基上培养，使C培养基对应位置上出现相同菌落。然后用伊红—美蓝染液（可鉴别大肠杆菌）对C进行染色，根据染色后D中出现的结果，可判断平板B中______（选填图中数字）是大肠杆菌的菌落。
(4)某同学采用平板划线法进一步纯化大肠杆菌，第一次划线前灼烧接种环的目的是______，第二次划线前灼烧接种环的目的是_______，实验结束后灼烧接种环的目的是_____。接种培养一段时间后，发现第一划线区不间断长满菌落，第二划线区上几乎无菌落，产生此情况的可能原因______。

【推荐2】牛奶是微生物的良好培养基，饮用前需要消毒，牛奶也可以被加工成酸奶，不同品牌的酸奶具有不同的口味。请回答下列问题：
(1)对牛奶进行消毒常用的方法是_____，使用这一种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是_____。
(2)家庭制作酸奶时，一般在牛奶中加入少量酸奶，相当于微生物培养技术中的_____操作。牛奶变成酸奶，口味改变的同时会导致所含能量减少，原因是 乳酸菌在发酵时使牛奶的营养成分发生改变；乳酸菌细胞呼吸消耗部分有机物，从而使能量减少。
(3)某生物兴趣小组探究某品牌酸奶中乳酸菌数量，实验操作如下图。

①统计微生物的方法有很多，图中过程①②③所示的方法为_____。 以下4种菌落分布图中，一般不能由该方法得到的是_____。

②用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘以10ⁿ后，才可表示酸奶样品中乳酸菌的数量（单位：个/mL） ，这里的n=_____
③用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个平板，目的是_____。如果平板菌落数超过300，一般还需进一步_____。

【推荐3】中国是名副其实的“胃病大国”。究其原因除了国人的饮食习惯、生长环境外，幕后推手其实是——幽门螺旋杆菌（Hp），它主要寄生在食道、胃及十二指肠等处，可导致胃炎、消化道溃疡、胃癌等疾病，主要通过消化道传播。某科研小组在胃病患者体内采集样本制成菌液后进行培养和分离，其基本步骤为：配制培养基→灭菌→X→接种→培养→观察。请回答下列问题：
(1)膳食中的亚硝酸盐在适宜的pH、温度和一定的微生物作用下可转变为致癌物______________。实验室培养微生物时获得纯净培养物的关键是________________。
(2)步骤X为_____________，需要在酒精灯火焰旁操作，待培养基冷却凝固后，要将培养皿____________，原因是________________（答出两点）。
(3)利用平板划线法分离纯化微生物的原理是_____________________________。
(4)请写出可以预防幽门螺旋杆菌传染的健康生活方式_____________________________（答出1点即可）。

【推荐1】中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图。请回答问题。

(1).为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为________，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中宜采用________________法对样品中的活菌进行接种和计数，以评估菌株增殖状况。若某次取样中，对菌液稀释了10⁵倍后，在每个平板上涂布菌液的体积为0.1ml，平板上的平均菌落数为220个，则菌液中H菌的细胞数为 ________个/L。菌落数目需要每隔一段时间统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样做的目的是________________。
(2).发酵装置中搅拌器的作用是_______________。
(3).基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。分析该系统不需要灭菌的原因是 ___________________ 。

【推荐2】乳链菌肽（Nisin，由34个氨基酸组成）是由某些乳酸乳球菌产生的天然生物活性抗菌肽。Nisin能有效地杀死或抑制引起食品腐败的革兰氏阳性菌，对人体无毒，且易被人体消化道内的蛋白酶水解。研究发现：将含有杀菌物质的滤纸片放到滴有细菌培养液的固体培养基上，经过培养，杀菌物质杀死细菌后会在滤纸片周围形成抑菌圈。
(1)现从新鲜牛奶中获得多株产Nisin的菌株，欲筛选并扩大培养抑菌作用最强的菌株，研究人员将_____涂布于平板上，将大小相同的灭菌的滤纸片均匀地摆放在培养基表面，在其上分别滴加等量备选菌株培养液的上清液，对比观察选取_____即为抑菌作用最强的菌株。
(2)研究人员要通过发酵工程生产Nisin，扩大培养前需对抑菌作用最强的菌株进行纯培养，微生物的纯培养是指_____。
(3)人们一直都试图将Nisin当作一种抗生素用于医疗方面，由于_____和溶解度不高，以及在其它方面存在着一些缺陷，目前还不适于药用。据题推测Nisin在食品生产中的应用价值是_____。

【推荐3】金黄色葡萄球菌对人的危害很大，国家规定对食品要进行金黄色葡萄球菌的检测。金黄色葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题：
（1）金黄色葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl可以将它分离出来。此培养基从用途上属于___________________培养基。
（2）检测果汁类食品中是否含有金黄色葡萄球菌的主要步骤如下：
①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节________________，分装到锥形瓶后________________，在无菌状态下加入卵黄液（100mL浓度为10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀，立即倒平板。
②接种：取待检果汁2.5mL加入22.5mL灭菌生理盐水中，制成接种样液。
实验组：将接种样液用______________法接种在含卵黄的固体培养基上。
对照组：将________________________用划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作空白对照。
将上述接种后的培养皿同时放在36℃的恒温箱中培养48h。
③观察：观察培养基表面_______________________________________________________________。
（3）某果汁厂生产的果汁中检测出金黄色葡萄球菌，他们认为不是果汁的问题，而是实验人员的操作有误差。如果实验结果出现_______________________________，则可基本排除操作误差对实验结果的影响。