基因工程在农业和卫生领域已有广泛的应用。例如利用抗虫玉米可以减少化学农药的使用,“山羊乳腺生物反应器的研制”项目可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶等医药产品,造福人类。下图是利用基因工程研发转基因山羊和棉花的示意图,据图回答下列问题:
(1)A是基因工程基本操作程序的第一步,A表示_____________ ,如果直接从苏云金芽孢杆菌中切取抗虫基因,①过程使用的酶区别于DNA酶的特点是_____________ 。
(2)在研究过程中,研究人员首先利用相关基因组,采用_____________ 技术对目的基因进行扩增,然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组载体的构建过程中需要的工具酶有_____________ 。
(3)将目的基因导入玉米受体细胞的过程中,在③过程中可以采用的方法有_________________________ (要求答出3种方法)
(4)由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中,检测其乳汁中是否出现药用蛋白,在分子水平上的检测方法及预期结果是什么?__________________________ 。
(1)A是基因工程基本操作程序的第一步,A表示
(2)在研究过程中,研究人员首先利用相关基因组,采用
(3)将目的基因导入玉米受体细胞的过程中,在③过程中可以采用的方法有
(4)由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中,检测其乳汁中是否出现药用蛋白,在分子水平上的检测方法及预期结果是什么?
更新时间:2021-04-14 21:09:57
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【推荐1】利用人的生长激素基因培育的转基因动物,生长速率明显加快。如图中通过过程1能获得大量的用于构建人的生长激素基因表达载体的DNA片段(DNA子链的合成方向是)。有关限制酶的识别序列()和酶切位点分别为、、、、,回答下列问题:(1)过程1使用的酶的突出特点是______ ;引物1的碱基序列(由)应包含______ 。
(2)限制酶的专一性体现在______ ;在基因工程的过程2中,一般使用双酶切的方法来构建基因表达载体,原因是________________________ 。
(3)据图可知,过程2中应选择限制酶______ 进行切割,除了(2)中的原因外,还与______ 有关。已知图中目的基因的转录方向是从左边往右边进行。为了使图中扩增后的目的基因能与图中的质粒构建基因表达载体,需要对图中目的基因片段的引物序列区进行改造,增加限制酶的识别序列,以便能将目的基因完整切割下来,与图中的质粒构成基因表达载体,则改造后的引物1由应该增加______ 酶的识别序列。
(4)过程3通常采用显微注射技术将目的基因导入受体细胞,那么受体细胞一般为______ 导入目的基因的受体细胞先要在体外培养成早期胚胎才可以用于移植,培养过程中需要一定的气体条件,具体的条件及作用是______ 。
(2)限制酶的专一性体现在
(3)据图可知,过程2中应选择限制酶
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【推荐2】“生物导弹”可用于杀死人类某些癌细胞,制备“生物导弹”是单克隆抗体的重要应用之一,其过程如下图所示。请据图回答:
(1)在①-⑤批量生产A蛋白抗原的过程中,要快速获得大量的A基因可采用_____ 技术。 在该技术中,解旋的方法是_______ 。
(2)在⑥-⑨批量生产“生物导弹”的过程中,⑦过程所用的“脾脏中的细胞”为_______ ,⑦过程区别于植物体细胞杂交技术所特有的诱导因素是_______ ,要得到所需的杂交瘤细胞一般要经过_____ 个阶段筛选。
(3)培养杂交瘤细胞的培养液通常需要加入血清的作用是_______ 。
(4)步骤⑧获得的单克隆抗体最终可以从_____ (①小鼠腹水、②培养液)提取,抗体的靶向作用是利用了其_____ 的特点。
(5)单克隆抗体通过上图所示的基因工程来制备,此技术的核心步骤是_______ 。
(1)在①-⑤批量生产A蛋白抗原的过程中,要快速获得大量的A基因可采用
(2)在⑥-⑨批量生产“生物导弹”的过程中,⑦过程所用的“脾脏中的细胞”为
(3)培养杂交瘤细胞的培养液通常需要加入血清的作用是
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【推荐3】淀粉酶抑制剂基因产生的淀粉酶抑制剂,能抑制蚜虫消化道中淀粉酶的活性,使蚜虫不能消化所食的淀粉,从而阻断蚜虫的能量供应,科研人员用农杆菌转化法将淀粉酶抑制剂基因导入烟草,增强了其抗蚜虫的能力,提高了烟草的产量和品质。回答问题:
(1)利用PCR技术扩增淀粉酶抑制剂基因时,需要已知一段目的基因的核酸序列,目的是设计______ 。设计该物质时,要避免该物质之间形成______ ,而造成该物质自连。
(2)将淀粉酶抑制剂基因的表达载体转入农杆菌时,需要用Ca2+处理农杆菌,目的是___________ 。
利用农杆菌转化烟草受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是________________________ 。
(3)转基因烟草如果______ 和_____ ,即可分别在分子水平和个体生物水平说明淀粉酶抑制剂基因成功表达。
(4)化学农药也能防治蚜虫,利用化学农药防治蚜虫的缺点是____________________ (答2点)。
(1)利用PCR技术扩增淀粉酶抑制剂基因时,需要已知一段目的基因的核酸序列,目的是设计
(2)将淀粉酶抑制剂基因的表达载体转入农杆菌时,需要用Ca2+处理农杆菌,目的是
利用农杆菌转化烟草受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是
(3)转基因烟草如果
(4)化学农药也能防治蚜虫,利用化学农药防治蚜虫的缺点是
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【推荐1】含有人类疾病基因的转基因动物模型,常用于致病机理的研究及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。请据图分析并回答下列问题:
(1)卵母细胞可从雌鼠的______________ 中获取。
(2)图中的高血压相关基因作为______________ ,受体细胞是______________ 。
(3)子代大鼠如果______________ 和______________ ,即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已经成功表达,可将其作为高血压转基因动物模型。
(4)在上述转基因大鼠的培育过程中,涉及的胚胎工程技术有______________ 、早期胚胎培养和胚胎移植。
(1)卵母细胞可从雌鼠的
(2)图中的高血压相关基因作为
(3)子代大鼠如果
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【推荐2】四尾栅藻生长周期短、适应性强,是一种高潜力生物柴油新型原料,但油脂产量低。研究人员从含油量高的紫苏中提取DGAT1(催化油脂合成的关键酶)基因,并成功导入到四尾栅藻细胞内,获得转基因的产油四尾栅藻。其制备流程如下图,图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,LacZ基因可使细菌利用培养基中的物质X-gal进而使菌落呈现蓝色,无该基因或该基因被破坏,菌落呈白色。回答下列问题:
(1)从油量高的紫苏组织细胞中提取总的RNA,经逆转录获得cDNA,用于PCR扩增。该过程获得cDNA的原理是_________________ 。
(2)PCR扩增DGAT1基因时,需在反应体系中添加2种引物,引物是指__________ 。
(3)构建的pMD19—DGAT1导入到经CaC12溶液处理的感受态大肠杆菌细胞中,并通过稀释涂布平板法接种到含__________ 的培养基中培养。一段时间后,挑选_______ 色的菌落以提取质粒pMD19—DGAT1。
(4)用限制酶BamH I和Xba I切割pMD19—DGAT1和pBI 121,将其连接成重组表达载体pBI121—DGAT1,并将其导入四尾栅藻细胞中。与单酶切相比,双酶切的优点是_______________________________________ 。
(1)从油量高的紫苏组织细胞中提取总的RNA,经逆转录获得cDNA,用于PCR扩增。该过程获得cDNA的原理是
(2)PCR扩增DGAT1基因时,需在反应体系中添加2种引物,引物是指
(3)构建的pMD19—DGAT1导入到经CaC12溶液处理的感受态大肠杆菌细胞中,并通过稀释涂布平板法接种到含
(4)用限制酶BamH I和Xba I切割pMD19—DGAT1和pBI 121,将其连接成重组表达载体pBI121—DGAT1,并将其导入四尾栅藻细胞中。与单酶切相比,双酶切的优点是
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【推荐3】青蒿素是最有效的抗疟疾药物,但野生黄花蒿青蒿素产量低,为缓解青蒿素供应不足的状况,科学家将tms基因和tmr基因导入黄花蒿的愈伤组织从而获得了黄花蒿的冠瘿组织,改造过程用到的部分结构如图。
tms:编码产物控制合成生长素
tmr:编码产物控制合成细胞分裂素
vir:编码产物控制激活T-DNA转移
T:终止子
(1)科学家将目的基因导入黄花蒿愈伤组织细胞的常用方法是_____________________ 。
(2)图中结构P、T是基因成功转录的保证,其中结构P的作用是______________________ 。
(3)在具体操作中常常使用两种能产生不同黏性末端的限制酶对目的基因和运载体的两端分别进行切割,这样做的好处是_______________________________________________ 。
(4)要检测目的基因是否插入到冠瘿组织细胞的染色体DNA上,可采用__________ 技术。
(5)与愈伤组织相比,冠瘿组织的生长速度更快,原因可能是_______________________ 。
tms:编码产物控制合成生长素
tmr:编码产物控制合成细胞分裂素
vir:编码产物控制激活T-DNA转移
T:终止子
(1)科学家将目的基因导入黄花蒿愈伤组织细胞的常用方法是
(2)图中结构P、T是基因成功转录的保证,其中结构P的作用是
(3)在具体操作中常常使用两种能产生不同黏性末端的限制酶对目的基因和运载体的两端分别进行切割,这样做的好处是
(4)要检测目的基因是否插入到冠瘿组织细胞的染色体DNA上,可采用
(5)与愈伤组织相比,冠瘿组织的生长速度更快,原因可能是
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【推荐1】玉米是重要的粮食作物,其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白,由P基因编码,在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白的转基因玉米,回答下列问题。
(1)利用PCR技术以图1中的DNA片段为模板扩增P基因,需要的引物有______ (从A、B、C、D四种单链DNA片段中选择)。上述过程中,至少经过______ 次循环后会产生双链等长的P基因片段,循环4次共需要的引物数为______ 。
(2)研究人员利用PCR技术获得了P基因,有关该过程的叙述正确的有______
(3)图2中强启动子是______ 的结合位点,可驱动基因的表达。在P基因表达过程中,转录所需的原料是______ 。
(4)培育超量表达P蛋白的转基因玉米过程中所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图2所示。为使P基因在玉米植株中超量表达,应优先选用______ 酶组合,理由是____________ 。
(5)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养,培养基中需加入____________ (填“潮霉素”“卡那霉素”或“潮霉素或卡那霉素”)进行筛选,筛选出的愈伤组织经______ 形成丛芽,最终获得多个转基因玉米株系。
(6)P蛋白在玉米株系的表达量如图3所示,可作为超量表达P蛋白转基因玉米的生理特性研究实验材料的有____________ 。
(1)利用PCR技术以图1中的DNA片段为模板扩增P基因,需要的引物有
(2)研究人员利用PCR技术获得了P基因,有关该过程的叙述正确的有______
A.需要了解P基因的全部碱基序列 |
B.新链的合成只能从3′→5′ |
C.反应体系加入的酶需具有热稳定性 |
D.G/C含量高的引物在与模板链结合时,复性的温度较高 |
(4)培育超量表达P蛋白的转基因玉米过程中所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图2所示。为使P基因在玉米植株中超量表达,应优先选用
(5)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养,培养基中需加入
(6)P蛋白在玉米株系的表达量如图3所示,可作为超量表达P蛋白转基因玉米的生理特性研究实验材料的有
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【推荐2】1型糖尿病是由胰岛B细胞受损导致胰岛素分泌不足引起的,可通过工程菌的方法生产胰岛素进行治疗,也可通过胰岛移植的方法进行治疗。回答下列相关问题:
(1)获取胰岛素基因时,可从人的胰岛细胞中获取胰岛素的mRNA,以胰岛素的mRNA为模板通过
(2)研究人员将胰岛素基因导入受体菌中,获得Y1、Y2两株目的菌。研究人员对两株目的菌和导入胰岛素基因前的受体菌中的胰岛素表达情况进行了检测,其中导入胰岛素基因前的受体菌中未检测到胰岛素,两株目的菌中均检测到了胰岛素,该种检测方法的原理是
(3)某科研小组通过培养Y1、Y2两株目的菌,从两者的培养液中提取出了胰岛素,分别记为胰岛素A、胰岛素B,然后,取等量的两种胰岛素分别注入甲、乙两组1型糖尿病模型鼠的体内,一段时间后检测两组小鼠的血糖下降情况,结果如图所示。
据图分析,可以得出的结论是①
(4)胰岛移植是一种旨在替代受损胰岛B细胞的治疗方法。移植的胰岛B细胞可以来自胚胎干细胞,胚胎干细胞在形态上表现为
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【推荐3】新型冠状病毒的S蛋白和N蛋白是能引起人体免疫反应的两种抗原,两种抗原中起关键作用的分别是肽链片段Ⅰ和肽链片段Ⅱ。通过以下流程得到的蛋白质X,既能与S蛋白抗体特异性结合,又能与Ⅳ蛋白抗体特异性结合,可提高检测的灵敏度。回答下列问题。
(1)重组蛋白X与肽链片段Ⅰ和肽链片段Ⅱ的关系是_____ ,肽链片段Ⅰ和肽链片段Ⅱ在结构上的区别可能是_____ 。
(2)仅依据肽链片段Ⅰ推测出的DNA碱基序列有多种可能性,原因是_____ ,获取基因X的方法是_____ 。
(3)将基因X表达载体导入大肠杆菌前,需用Ca2+处理大肠杆菌的目的是_____ 。能用含氨苄青霉素和氯霉素的培养基筛选出含基因X表达载体大肠杆菌的原因是_____ 。
(4)含基因X表达载体的大肠杆菌经培养后,需对分离纯化的蛋白质进行检测,如果纯化的蛋白质能_____ ,则说明获得了所需要的蛋白质。流程图中获得蛋白质X的过程属于_____ 工程。
(1)重组蛋白X与肽链片段Ⅰ和肽链片段Ⅱ的关系是
(2)仅依据肽链片段Ⅰ推测出的DNA碱基序列有多种可能性,原因是
(3)将基因X表达载体导入大肠杆菌前,需用Ca2+处理大肠杆菌的目的是
(4)含基因X表达载体的大肠杆菌经培养后,需对分离纯化的蛋白质进行检测,如果纯化的蛋白质能
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