组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本操作程序 > 基因表达载体的构建
题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:888 题号:12952348
养殖家禽的饲料中富含谷物,纤维素是谷物的重要成分,但家禽消化道中缺少能降解纤维素的酶,阻碍了家禽对饲料的吸收与利用。研究人员利用转基因技术改造乳酸杆菌,将其添加于饲料中,以提高家禽养殖效率。
(1)乳酸杆菌是动物胃肠道的优势细菌之一。家禽肠道内的乳酸杆菌通过细胞_______呼吸产生乳酸等代谢产物,可抑制有害细菌的生长和繁殖,维持肠道的正常机能,乳酸杆菌与家禽的种间关系属于________
(2)枯草芽孢杆菌分泌可降解纤维素的一种酶,这种酶由W基因编码。为在乳酸杆菌中表达W基因,需使用图1中质粒为载体。图2为克隆得到的含W基因的DNA片段,W基因以乙链为转录模板链,转录时mRNA自身延伸的方向为5’→3’。

①很多启动子具有物种特异性,在图1质粒中插入W基因,其上游启动子应选择____(填写字母)。
A.枯草芽孢杆菌启动子       B.乳酸杆菌启动子       C.农杆菌启动子
②下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点。

限制酶

EcoR I

BamH I

KpmI

Mfe I

Hind II

识别序列及切割位点

根据上述信息,应使用限制酶___________切割图1中质粒,使用限制酶___________切割图2中含W基因的DNA片段,以获得能正确表达W基因的重组质粒。所得重组质粒转化乳酸杆菌后,使用含抗生素________的培养基筛选,以得到转入W基因的乳酸杆菌。
(3)为确定导入重组质粒的乳酸杆菌是否具有分解纤维素的能力,研究人员用液体培养基分别培养下表所示菌种。所得部分菌液接种于固体鉴定培养基上,另取部分菌液上清液测定酶活力,实验方案及测定结果如下表所示。

菌种

酶活性相对值

乳酸杆菌

未检出

X

未检出

导入了重组质粒的乳酸杆菌

0.96

①表中的X应为______
②在配制固体鉴定培养基时,除加入无机盐、刚果红、维生素、氮源外,还需要添加________。导入了重组质粒的乳酸杆菌在此培养基上应出现____________
(4)解决谷物中纤维素难以被消化吸收的另一思路是将W基因转入家禽中,使转基因家禽消化道特异表达能够降解纤维素的酶。上述研究方法与该思路相比,有哪些优点________(写出2点)。
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限制酶

Msp I

BamH I

Mbo I

SmaI

酶切位点


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