养殖家禽的饲料中富含谷物,纤维素是谷物的重要成分,但家禽消化道中缺少能降解纤维素的酶,阻碍了家禽对饲料的吸收与利用。研究人员利用转基因技术改造乳酸杆菌,将其添加于饲料中,以提高家禽养殖效率。
(1)乳酸杆菌是动物胃肠道的优势细菌之一。家禽肠道内的乳酸杆菌通过细胞_______ 呼吸产生乳酸等代谢产物,可抑制有害细菌的生长和繁殖,维持肠道的正常机能,乳酸杆菌与家禽的种间关系属于________ 。
(2)枯草芽孢杆菌分泌可降解纤维素的一种酶,这种酶由W基因编码。为在乳酸杆菌中表达W基因,需使用图1中质粒为载体。图2为克隆得到的含W基因的DNA片段,W基因以乙链为转录模板链,转录时mRNA自身延伸的方向为5’→3’。①很多启动子具有物种特异性,在图1质粒中插入W基因,其上游启动子应选择____ (填写字母)。
A.枯草芽孢杆菌启动子 B.乳酸杆菌启动子 C.农杆菌启动子
②下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点。
根据上述信息,应使用限制酶___________ 切割图1中质粒,使用限制酶___________ 切割图2中含W基因的DNA片段,以获得能正确表达W基因的重组质粒。所得重组质粒转化乳酸杆菌后,使用含抗生素________ 的培养基筛选,以得到转入W基因的乳酸杆菌。
(3)为确定导入重组质粒的乳酸杆菌是否具有分解纤维素的能力,研究人员用液体培养基分别培养下表所示菌种。所得部分菌液接种于固体鉴定培养基上,另取部分菌液上清液测定酶活力,实验方案及测定结果如下表所示。
①表中的X应为______ 。
②在配制固体鉴定培养基时,除加入无机盐、刚果红、维生素、氮源外,还需要添加________ 。导入了重组质粒的乳酸杆菌在此培养基上应出现____________ 。
(4)解决谷物中纤维素难以被消化吸收的另一思路是将W基因转入家禽中,使转基因家禽消化道特异表达能够降解纤维素的酶。上述研究方法与该思路相比,有哪些优点________ (写出2点)。
(1)乳酸杆菌是动物胃肠道的优势细菌之一。家禽肠道内的乳酸杆菌通过细胞
(2)枯草芽孢杆菌分泌可降解纤维素的一种酶,这种酶由W基因编码。为在乳酸杆菌中表达W基因,需使用图1中质粒为载体。图2为克隆得到的含W基因的DNA片段,W基因以乙链为转录模板链,转录时mRNA自身延伸的方向为5’→3’。①很多启动子具有物种特异性,在图1质粒中插入W基因,其上游启动子应选择
A.枯草芽孢杆菌启动子 B.乳酸杆菌启动子 C.农杆菌启动子
②下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点。
限制酶 | EcoR I | BamH I | KpmI | Mfe I | Hind II |
识别序列及切割位点 |
(3)为确定导入重组质粒的乳酸杆菌是否具有分解纤维素的能力,研究人员用液体培养基分别培养下表所示菌种。所得部分菌液接种于固体鉴定培养基上,另取部分菌液上清液测定酶活力,实验方案及测定结果如下表所示。
菌种 | 酶活性相对值 |
乳酸杆菌 | 未检出 |
X | 未检出 |
导入了重组质粒的乳酸杆菌 | 0.96 |
②在配制固体鉴定培养基时,除加入无机盐、刚果红、维生素、氮源外,还需要添加
(4)解决谷物中纤维素难以被消化吸收的另一思路是将W基因转入家禽中,使转基因家禽消化道特异表达能够降解纤维素的酶。上述研究方法与该思路相比,有哪些优点
2021·北京海淀·二模 查看更多[5]
2021届北京市海淀区高三二模生物试题(已下线)专练22 基因工程20题-【尖子生创造营】2022年高考生物总复习高频考点必刷800题(全国通用) (已下线)一轮巩固卷3-【赢在高考·黄金20卷】备战2022年高考生物模拟卷(北京专用)(已下线)专题6基因工程北京市延庆区第一中学2023-2024学年高二下学期期中考试试题
更新时间:2021-05-12 16:38:06
|
相似题推荐
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
【推荐1】柠檬酸是一种有机酸,无毒环保,既可以去除纺织品上的甲醛,又可以做面料防皱整理剂,效果好、成本低,实现降本增效。研究发现将 gltA 基因(柠檬酸合酶基因)和 cad 基因(顺乌头酸脱羧酶基因)导入大肠杆菌 W 共同表达可得高产柠檬酸工程菌 wgc。图 1 是重组质粒 pCOLA-gltA 与 pCDF-cad,图 2 示在其他发酵培养条件为最适时,蔗糖浓度对柠檬酸产量的影响。
回答下列问题:
(1)获得高产柠檬酸工程菌 wgc 的大致过程如下:
①通过 PCR 扩增目的基因片段和载体片段,此过程共需要设计__ 对引物。
②对回收纯化后的目的基因片段和载体片段进行双酶切,然后在 T4 DNA 连接酶的作用下连接基因片段与质粒片段,形成重组质粒。
③将重组质粒 pCOLA-gltA,通过__________ 法导入大肠杆菌 W,获得工程菌 wg,再将重组质粒 pCDF-cad,导入工程菌 wg,获得工程菌 wgc。分析图 1(a)(b)可知,gltA 基因和 cad 基因都要接在各自载体的__________ 之间。在选择成功导入了重组质粒的大肠杆菌 W 时,应该用_________ 的培养基来培养大肠杆菌。
(2)分析图 2,在其余培养条件均为最适的情况下,在图示各组中宜选用_____ 的蔗糖浓度进行工程菌 wgc 的发酵培养。进一步研究发现蔗糖浓度过高但蔗糖利用反而降低,原因可能是______ 。
(3)gltA 基因是柠檬酸合成不可或缺的基因,而 cad 基因的表达从理论上来说能加速柠檬酸的消耗,使柠檬酸的含量降低,但在工程菌中共表达 gltA 基因和 cad 基因比起单独过表达 gltA 基因柠檬酸合成量明显增高,可能是由于_____ 。
回答下列问题:
(1)获得高产柠檬酸工程菌 wgc 的大致过程如下:
①通过 PCR 扩增目的基因片段和载体片段,此过程共需要设计
②对回收纯化后的目的基因片段和载体片段进行双酶切,然后在 T4 DNA 连接酶的作用下连接基因片段与质粒片段,形成重组质粒。
③将重组质粒 pCOLA-gltA,通过
(2)分析图 2,在其余培养条件均为最适的情况下,在图示各组中宜选用
(3)gltA 基因是柠檬酸合成不可或缺的基因,而 cad 基因的表达从理论上来说能加速柠檬酸的消耗,使柠檬酸的含量降低,但在工程菌中共表达 gltA 基因和 cad 基因比起单独过表达 gltA 基因柠檬酸合成量明显增高,可能是由于
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐2】在荧光素酶中加入相应的荧光素底物就可以发荧光。荧光素酶及其基因在生物研究中有着广泛的应用。请回答下列问题:
(1)荧光素酶基因可以人工合成,也可以从_______ 中获取。利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用_________ 的原理。
(2)限制酶是切割DNA的工具酶,主要从微生物中分离纯化出来下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点,下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点.若只选用1种酶切获得荧光素酶基因,最应选择的限制酶是________ 产生黏性末端。若选用2种限制酶,应选用__________ ,该方法的优点是____________________ 。
(3)荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因,其作用是将____________ 筛选出来。荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶。将目的基因导入动物细胞之后经过____________ (写2种)等技术获得转基因哺乳动物。将目的基因导入植物细胞,目前常用的目的基因载体是Ti质粒,目的基因需插入到该基因载体的__________ ,将导入荧光素酶基因的植物细胞,可经过__________ 技术获得转基因植株
(1)荧光素酶基因可以人工合成,也可以从
(2)限制酶是切割DNA的工具酶,主要从微生物中分离纯化出来下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点,下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点.若只选用1种酶切获得荧光素酶基因,最应选择的限制酶是
限制酶 | Msp I | BamH I | Mbo I | SmaI |
酶切位点 |
(3)荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因,其作用是将
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
【推荐3】玉米是人类粮食和畜牧饲料的重要来源,普通玉米缺乏人体及单胃动物生长发育必需的赖氨酸。科研工作者利用基因工程技术将马铃薯中已知序列的高赖氨酸蛋白基因(SBgLR)转入玉米细胞获得高赖氨酸玉米新品种。具体操作流程如图所示,其中强启动子能驱动基因的持续转录。
(1)获取马铃薯高赖氨酸蛋白基因后通过___ 扩增SBgLR基因。
(2)构建基因表达载体时,应选用的限制酶是___ 。图中目的基因上的强启动子是___ 的结合位点,Ti质粒中的卡那霉素抗性基因是一种标记基因,其作用是___ 。
(3)将重组的质粒导入经过___ 处理的农杆菌,利用农杆菌侵染可将SBgLR基因送到玉米细胞中,原因是___ 。
(4)筛选转化的玉米细胞时,需在培养基中加入___ ,若加入的该抗生素浓度___ (填“过高”或“过低”)时,常会出现很多假阳性植株。
(5)愈伤组织到幼苗的过程属于___ ,该过程需要加入的激素有___ ,另外该过程还需要光照。
回答下列问题:
(1)获取马铃薯高赖氨酸蛋白基因后通过
(2)构建基因表达载体时,应选用的限制酶是
(3)将重组的质粒导入经过
(4)筛选转化的玉米细胞时,需在培养基中加入
(5)愈伤组织到幼苗的过程属于
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐1】甜菜是我国重要的糖料作物之一,景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(SBPase)是卡尔文循环过程中的关键酶。为提高甜菜的产量,科研工作者利用农杆菌转化法将拟南芥SBPase基因转入甜菜中,对甜菜进行遗传改造。人工改造的质粒载体和SBPase基因如图1和图2所示。请回答下列问题:____ 的识别序列,具体操作是在PCR引物设计时____ 。将质粒载体与PCR扩增得到的目的基因用限制酶切割后再用DNA连接酶处理,构建重组质粒。
(2)①根据内共生学说,线粒体和叶绿体是某些细菌被“吞食”后逐步演化而来的。抗生素卡那霉素和潮霉素都是通过与原核细胞核糖体(真核细胞与原核细胞的核糖体不同)结合,直接影响基因的____ 过程而起作用。据此分析,重组质粒导入农杆菌后,需在含____ (选填“卡那霉素”“潮霉素”或“卡那霉素和潮霉素”)的培养基上培养,从而筛选出含重组质粒的农杆菌。
②将含有重组质粒的农杆菌与甜菜叶柄共培养一段时间后,再转入含有潮霉素的选择培养基,可筛选出抗性植株,机理为____ 。
(3)随机选取8株上述抗性植株,利用SBPase基因引物进行PCR扩增,产物的电泳结果如图3所示,初步判断目的基因____ (选填“是”或“否”)已经整合到甜菜染色体中。____ 。
(1)SBPase基因两端不具有限制酶切割位点,为保证SBPase基因正确连接在质粒载体上,应在SBPase基因左、右两端分别添加限制酶
(2)①根据内共生学说,线粒体和叶绿体是某些细菌被“吞食”后逐步演化而来的。抗生素卡那霉素和潮霉素都是通过与原核细胞核糖体(真核细胞与原核细胞的核糖体不同)结合,直接影响基因的
②将含有重组质粒的农杆菌与甜菜叶柄共培养一段时间后,再转入含有潮霉素的选择培养基,可筛选出抗性植株,机理为
(3)随机选取8株上述抗性植株,利用SBPase基因引物进行PCR扩增,产物的电泳结果如图3所示,初步判断目的基因
经检测,正常表达目的基因的甜菜植株单株生物量显著高于野生型甜菜植株,据本研究分析,可能的原因是
您最近一年使用:0次
非选择题-实验题
|
适中
(0.65)
【推荐2】绿原酸、类黄酮物质属于烟草的次生代谢产物,具抗衰老、预防心脑血管疾病等功效。烟草酰基转移酶(NtHCT)是一种在烟草次生代谢中进行酰基化修饰的蛋白。为研究NtHCT是否参与烟草绿原酸和类黄酮物质的合成,有人构建了pCXSN-NtHCT超量表达载体,并将其导入到野生型烟草中,获得NtHCT稳定高表达的转基因烟草。
(1)提取烟草叶片细胞中总RNA,以其为模板在______ 酶的作用下得到总cDNA,可以设计特异性引物通过PCR从总cDNA中专一性的扩增出NtHCT基因的cDNA,原因是_______ 。
(2)扩增NtHCT基因时,需在上、下游引物中分别加入限制酶_______ 的识别序列,以便与图所示质粒pCXSN构建正确连接的超量表达载体。将该载体转入农杆菌中,通过_______ 法使NtHCT基因整合到受体细胞的染色体DNA上,进而获得转NtHCT基因的烟草。从功能上分析,图中的卡那霉素基因将作为______ ,用于NtHCT基因的检测与鉴定。(3)待烟草长至8叶期时,检测转NtHCT基因烟草(1~5号)和野生型烟草(SS)叶片中的绿原酸和类黄酮物质(芦丁和山柰酚芸香苷)含量的检测结果如下表。
由表可知,NtHCT能够促进烟草的绿原酸和类黄酮物质的合成,依据是______ 。
(4)研究人员对NtHCT的催化中心结构进行分析,推测将第105位的甘氨酸替换为组氨酸,可以大幅提高其催化效率。请完善下列利用蛋白质工程对NtHCT进行改造的基本思路:
提高NtHCT的催化活性→推测将第105位的丙氨酸替换为组氨酸→______ →获得NtHCT→______ 。
(1)提取烟草叶片细胞中总RNA,以其为模板在
(2)扩增NtHCT基因时,需在上、下游引物中分别加入限制酶
样品编号 | 绿原酸(μg/g) | 芦丁(μg/g) | 山柰酚芸香苷(μg/g) |
SS | 283.2 | 12.6 | 11.7 |
1 | 1791.5 | 524.6 | 159.2 |
2 | 1574.4 | 242.7 | 138.7 |
3 | 1485.5 | 331.8 | 93.2 |
4 | 770.8 | 435.9 | 119 |
5 | 767.9 | 214.4 | 115 |
(4)研究人员对NtHCT的催化中心结构进行分析,推测将第105位的甘氨酸替换为组氨酸,可以大幅提高其催化效率。请完善下列利用蛋白质工程对NtHCT进行改造的基本思路:
提高NtHCT的催化活性→推测将第105位的丙氨酸替换为组氨酸→
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
【推荐3】某种小麦具有极强的耐盐性,其耐盐性与小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因(耐盐基因)有关。科学家将该基因转移到水稻细胞中,获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题:
(1)理论上基因组文库含有生物的________ 基因;而cDNA文库含有生物________ 的基因。
(2)若要从该种小麦中获得Na+/K+逆向转运蛋白基因,可首先建立该种植物的基因组文库,再从中________ 出所需基因。
(3)将Na+/K+逆向转运蛋白基因导入水稻细胞中的常用方法是________ 。
(4)为保证Na+/K+逆向转运蛋白基因(耐盐基因)在水稻细胞中能够表达,运载体上应含有特定的________ (填“复制原点”或“启动子”或“标记基因”)
(5)筛选出含有目的基因的水稻细胞,经过________ 过程,培养出愈伤组织,再诱导愈伤组织形成水稻幼苗。将转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中进行耐盐试验,用非转基因幼苗做对照,培养一个月后观察现象,若________ 则说明转基因植株获得了耐盐特性。
(6)假如用得到的二倍体转基因耐盐植株自交,子代中耐盐与不耐盐植株的数量比为3∶1时,则可推测该耐盐基因整合到了________ (填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。
(1)理论上基因组文库含有生物的
(2)若要从该种小麦中获得Na+/K+逆向转运蛋白基因,可首先建立该种植物的基因组文库,再从中
(3)将Na+/K+逆向转运蛋白基因导入水稻细胞中的常用方法是
(4)为保证Na+/K+逆向转运蛋白基因(耐盐基因)在水稻细胞中能够表达,运载体上应含有特定的
(5)筛选出含有目的基因的水稻细胞,经过
(6)假如用得到的二倍体转基因耐盐植株自交,子代中耐盐与不耐盐植株的数量比为3∶1时,则可推测该耐盐基因整合到了
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐1】下图表示从苏云金芽孢杆菌获取抗虫基因(简称Bt基因)培育转基因抗虫棉的图解:请回答:
(1)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是________ ,它主要是从_________ 中分离纯化出来的。
(2)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________________ 。
(3)写出b过程完整表达式:_____________________________________________ 。
(4)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉育种等研究,这将对________________ 和农业可持续发展产生巨大影响。
(5)基因工程是否成功可以在不同水平层次上进行检测。在性状水平上鉴定的方法是__________ ;在DNA水平上鉴定的方法是________________ ;在蛋白质水平进行检测的方法是从转基因植株提取蛋白质,进行________________ ,判断是否产生杂交带。
(1)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是
(2)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是
(3)写出b过程完整表达式:
(4)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉育种等研究,这将对
(5)基因工程是否成功可以在不同水平层次上进行检测。在性状水平上鉴定的方法是
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐2】生长激素在治疗激素分泌过少的矮小症方面有积极的作用,为了批量生产生长激素,可以采用转基因技术将控制生长激素合成的基因转移到微生物细胞内。下表所示是涉及此转基因技术的几种限制酶识别序列及其切割位点;图1、图2中箭头表示相关限制酶对质粒和供体DNA的切割位点,请回答下列问题:
(1)四种酶的识别序列相比较,__________ 酶的识别序列的结构相对稳定,原因是__________ (从碱基种类的含量角度分析)。
(2)为了提高构建重组质粒的成功率,你认为最好先用____________________ (填上表中酶的名称)处理质粒和目的基因,然后用__________ 酶拼接。本题构建重组质粒时绝对不能使用SmaⅠ的原因是________________________________________ 。
(3)为了检测目的基因是否成功翻译,可以用__________ 技术。
(4)受体细胞最好是选择____________ ,以保证能够从工程菌中直接得到具有生物学活性的人的生长激素。受体细胞的另外一种选择是制备“乳腺生物反应器”,即以__________ 受体细胞,进而从奶牛的乳汁中提取人的生长激素。工程菌相对于“乳腺生物反应器”的优点是_______________ 。
(1)四种酶的识别序列相比较,
(2)为了提高构建重组质粒的成功率,你认为最好先用
(3)为了检测目的基因是否成功翻译,可以用
(4)受体细胞最好是选择
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐3】随着科学技术的发展,人们可以根据需求来改造生物的性状。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解,据图回答下列问题。
(1)对①需要剪碎并使用___________ 使其彼此分散,用于传代培养的细胞应不超过10代以保证细胞的__________________ 不发生变化。
(2)在胚胎的早期培养过程中把⑤送入⑥的最佳时期是_______________ 。
(3)在此过程中涉及的细胞工程技术手段有____________ (答两种)。
(4)过程②中,重组质粒中调控目的基因表达的组件是________ , ________ 的作用是鉴别和筛选含有目的基因的受体细胞。
(5)要实现⑦批量生产血清白蛋白,要求③的性染色体组成是____ 。⑦和某些转基因羊可通过分泌乳汁来生产人类所需药物,这类转基因动物被称为_____________ 。
(1)对①需要剪碎并使用
(2)在胚胎的早期培养过程中把⑤送入⑥的最佳时期是
(3)在此过程中涉及的细胞工程技术手段有
(4)过程②中,重组质粒中调控目的基因表达的组件是
(5)要实现⑦批量生产血清白蛋白,要求③的性染色体组成是
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐1】为研究玉米Y基因在逆境胁迫应答中的重要作用,科研人员做了如下研究。回答下列问题:
(1)提取玉米细胞的mRNA在逆转录酶的催化下获得cDNA,根据Y基因的序列设计_____________ 进行PCR扩增,获得Y基因。
(2)将获得的Y基因与绿色荧光蛋白基因(GPF基因)连接构建融合基因,在_____________ 酶和DNA连接酶的作用下插入质粒(见图1)切点构建重组质粒,用_____________ 法将该重组质粒导入玉米细胞中,获得Y基因高表达的转基因玉米植株。
(3)为研究Y基因的作用,科研人员测定了Y基因的表达特点(如图2和图3),推测后续实验中应选用的实验材料及其处理是_____________ 。
(4)为验证Y基因能提高植物的抗盐能力,科研人员设计如下实验,6d后测定结果如下表。
为增加实验的可信度,应补充一组对照实验,该对照组实验处理及预期结果是_____________ 。
(5)结合本实验的研究结果,提出改良盐碱地的可行性措施。__________________________ 。
(1)提取玉米细胞的mRNA在逆转录酶的催化下获得cDNA,根据Y基因的序列设计
(2)将获得的Y基因与绿色荧光蛋白基因(GPF基因)连接构建融合基因,在
(3)为研究Y基因的作用,科研人员测定了Y基因的表达特点(如图2和图3),推测后续实验中应选用的实验材料及其处理是
(4)为验证Y基因能提高植物的抗盐能力,科研人员设计如下实验,6d后测定结果如下表。
玉米类型 | 处理 | 叶片情况 |
野生型 | 清水 | 叶绿素含量高,叶片嫩绿 |
野生型 | 0.15MNaCl溶液处理 | 叶绿素含量低,叶片枯黄 |
转Y基因玉米 | 0.15MNaCl溶液处理 | 叶绿素含量高,叶片嫩绿 |
为增加实验的可信度,应补充一组对照实验,该对照组实验处理及预期结果是
(5)结合本实验的研究结果,提出改良盐碱地的可行性措施。
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐2】单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备,已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示。请回答下列问题。
(1)过程①需要____________ 酶,过程③常用的方法是____________ 。
(2)向小鼠体内注射抗原蛋白,使小鼠产生___________ 免疫,并从小鼠体内分离的细胞Ⅰ是____________ 。
(3)要检测无限增殖调控基因是否插入到细胞Ⅰ中的染色体DNA上,应用_______ 技术,该过程需要______ 作为探针。
(4)细胞Ⅱ应具有的特点是_____________ 。体外培养细胞Ⅰ时,培养箱需要充入二氧化碳,其作用是____________________ 。
(5)该单克隆抗体的制备与常规单抗的制备在所应用的技术方面的不同之处是__________ 。
(1)过程①需要
(2)向小鼠体内注射抗原蛋白,使小鼠产生
(3)要检测无限增殖调控基因是否插入到细胞Ⅰ中的染色体DNA上,应用
(4)细胞Ⅱ应具有的特点是
(5)该单克隆抗体的制备与常规单抗的制备在所应用的技术方面的不同之处是
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐3】引起人类肺炎的某病毒(nCoV)是一种单链RNA病毒,其跨膜表面糖蛋白(GP)是该病毒侵染宿主细胞的关键蛋白,科学家欲利用大肠杆菌批量生产GP以制备相关疫苗,已知Tert为四环素抗性基因,LacZ′基因的表达产物能使白色的大肠杆菌菌落变成蓝色。下图为部分流程示意图(图中EcoRⅠ→为目的基因的插入点),回答下列问题:(1)为了判断是否感染nCoV,利用探针对疑似患者进行核酸检测,要在短时间内大量快速生产探针可利用_______ 技术。从nCoV基因组中直接分离出的nCoV-GP基因不能直接与质粒连接进行重组,其原因是_______ 。
(2)过程①用_______ 酶获得cDNA序列后进行扩增,需设计两种引物。图示cDNA的部分序列,请问两种引物的结合位置是_______ 。
(3)过程②除了得到重组质粒外,还可能得到2种片段大小不一的产物,因此为筛选导入重组质粒的大肠杆菌,应在培养基中加入_______ ,筛选_______ (蓝/白)色菌落。
(4)图示为基因克隆载体,若需要将这个质粒改造成基因表达载体,还需要插入____ 和_______ 。为检测大肠杆菌是否表达出目标产物,可对大肠杆菌的总蛋白质进行提取,并通过______ 技术进行检测。
(2)过程①用
(3)过程②除了得到重组质粒外,还可能得到2种片段大小不一的产物,因此为筛选导入重组质粒的大肠杆菌,应在培养基中加入
(4)图示为基因克隆载体,若需要将这个质粒改造成基因表达载体,还需要插入
您最近一年使用:0次