【推荐1】土地油污染造成高浓度油酸侵入土壤，破坏了原有生态的循环体系。某校生物兴趣小组同学欲从土地油污染的土壤中筛选出能高效降解油酸的菌株并纯化该菌株。

（1）若要在土壤样品稀释液中筛选出能降解土地油污染的菌株，则需接种以__________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于__________培养基。
（2）A同学采用平板划线法纯化菌种，若操作时发现第一区域的划线上长满了菌落，第二区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落（如上图），则可能的原因是：________________或______________。
（3）B同学用稀释涂布平板法筛选并统计菌株数目。使用灼烧灭菌后的__________将菌液均匀的涂布在培养基表面，并_________培养皿，使菌液分布均匀。
（4）C同学和D同学均用稀释涂布平板法测定同一样品中该菌株数。均在对应稀释倍数为10⁶培养基中，C同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为68，D同学在该浓度下涂布了三个平板，统计的菌落数分别为55、80、75。
请评价哪位同学的结果有可能偏离真实值，并说明理由。_____________________
另一名同学统计的结果，每毫升样品中的该细菌数为________个（接种时所用的稀释液体积为0．1mL）
（5）E同学采用血细胞计数板计数，统计了5个中格的细菌数（计数板规格25×16），并计数出5个中格共有40个该细菌，则每毫升样品中细菌数为________个。（稀释的倍数为10²）

【推荐2】针对新冠病毒（SARS-CoV-2）的重组蛋白疫苗、核酸疫苗（包括DNA疫苗和RNA疫苗）等疫苗都在研发当中。下图为其中一种疫苗的研发思路，图中①～⑦表示过程，虚线箭头表示NcoI、SphI、NheI、BamHI的酶切位点（四种酶的识别序列详见表），标记基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培养基中的蔗糖生存。

限制酶	NcoⅠ	SphⅠ	NheⅠ	BamHⅠ
识别序列和切割位点	C↓CATGG	GCATG↓C	G↓GATCC	G↓CTAGC

（1）图中①过程需要使用___________酶先得到cDNA，再使用___________技术扩增得到S基因。
（2）为使③过程顺利进行，需先使用限制酶___________和___________切割质粒B，选用两种限制酶对新冠病毒的S基因进行切割的目的是___________（答出1点即可）。
（3）图中表示筛选的过程是___________（填编号），筛选时应使用以___________为唯一碳源的培养基。
（4）重组疫苗注入志愿者体内后，S蛋白基因指导合成的S蛋白作为___________，刺激机体产生能与之相结合的抗体，抗体的分泌量可作为检测疫苗对志愿者免疫效果的指标。参加临床试验的志愿者需要满足的条件之一是___________（选填“有”或“无”）SARS-CoV-2感染史，理由是___________。

【推荐3】研究人员测定了病斑直径为1、2、3cm的苹果中①~⑤号部位的Pat含量，结果如图.

(1)根据图分析，下列错误的是__________。

A．腐烂部位中的Pat含量最高

B．病斑越大腐烂部位的Pat含量越高

C．离腐烂部位越远的果肉中Pat含量越低

D．1cm和2cm病斑苹果中，从①号到②号部位的Pat含量下降幅度较大

(2)腐烂苹果去除腐烂部位后是否仍可放心食用？请判断并结合图中信息阐述理由__________。

【推荐1】自然界中无处不在的金黄色葡萄球菌对人类健康有严重影响。典型的金黄色葡萄球菌具有高度的耐盐性，可在NaCl质量浓度为10%～15%的培养基上生长；具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低。下面是土壤中金黄色葡萄球菌的分离和纯化实验。
（一）1000mL牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备：
（1）将称好的5g牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量蒸馏水后加热，待牛肉膏溶化并与称量纸分离后，取出称量纸；往烧杯中加入称好的10g蛋白胨、100~150g____________，用玻璃棒搅拌使其溶解；加入20g琼脂，边加热边搅拌，当琼脂完全熔化后，____________________；调节pH为7.4。
（2）将上述培养基转移至锥形瓶中灭菌；待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近按如图1中________（填字母）的顺序倒平板；将制好的平板放入37℃的温室中培养24~48h，选用_________的平板进行后续实验。

（二）金黄色葡萄球菌的分离和纯化：
（3）称取5g土样，在无菌条件下放入灭菌的锥形瓶中，加入50mL无菌水，再加入0.2mL磺胺类药物，振荡10min，既使土样充分混匀，又杀死其他细菌。从锥形瓶中取5mL上清液放入一支干净的试管中，在温度为30℃，转速为200rpm的摇床上振荡培养24h。培养的目的是__________________。
（4）取培养好的菌液，按如图2所示方法依次制备成稀释倍数为10¹、10²、10³、10⁴的稀释液。有关该过程，下列描述正确的有__________（填编号）。
①吸液时，移液管要插入液面       ②注液时，移液管要接触液面
③吸液时，移液管要吹吸三次       ④注液时，移液管要吹吸三次
⑤吹吸三次时，每次吸上的液面要高于前一次 ⑥每一个稀释度换用一支移液管
（5）分别取0.2mL相关稀释液用________________法接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，置于37℃培养箱中培养24h。从平板上的菌落中挑取适量菌种，用平板划线法接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，置于适宜温度培养箱中培养24h，得到如图3所示结果，则划线操作过程中接种环灼烧了________次。

【推荐2】 空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：
①配制培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H₂O）；
②制作无菌平板；
③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；
④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题：
(1)该培养基中微生物所需的氮来源于___________________。 硝化细菌在没有碳源的培养基上___填“能够”或“不能”）生长，原因是__________________________________。
(2)若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是________________。用平板培养细菌时一般需要将平板__________（填“倒置”或“正置”）。
(3)步骤③中，实验组的操作是_______________。
(4)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了___________________现象。

【推荐3】乳酸菌是一种厌氧型细菌，实验室常利用溶钙圈法对产酸菌进行筛选，其原理是产酸菌产生的酸性物质和CaCO₃反应而出现的溶解圈，另外，CaCO₃还可中和产生的酸，维持培养基品质相对稳定。北方小吃浆水中的产酸菌主要是乳酸菌（厌氧型）和醋酸菌（好氧型），现欲对某浆水样品中这两种产酸菌进行筛选，其操作过程如下图一，图二为两种不同的接种方法。请分析回答下列相关问题：

(1)①操作中制备的培养基时，除加入____作为营养成分外，还需加入_____，并对培养基用____法进行灭菌。
(2)③操作前，应随机抽取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是_____，若只需获得乳酸菌一种菌种，则④操作中的培养必须在______条件下培养。
(3)若对筛选获得的菌株进行计数，应选择图二中_____图对应的操作方法，用此方法测定菌体的数目，其原理是_______。但是，用此方法统计的菌落数比接种活菌的实际数目要低，原因是_________。