【推荐1】孔雀石绿（简称MG）是广泛使用的有机染料，在自然环境中极难降解，容易引起土壤污染，进而危害人体健康。因此从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶解度低，含过量MG的固体培养基不透明。

(1)MG降解菌富集培养时，制备的培养基应该能为其生长提供4类营养物质，即___________________。
(2)图中所示的分离纯化细菌的方法是_________________。对土壤中的MG降解菌进行计数时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_____________________。实验中初步估测A培养瓶中细菌细胞数为1.5×10⁹个/mL，若要在图中每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且每个平板上长出的菌落数约为150个，则应将A中的菌液稀释_______倍。
(3)MG高效降解菌株的鉴定：将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基（其他营养成分等适宜）上，根据培养基是否出现_____________，就可以鉴别出目的菌株。

【推荐2】国家标准规定每毫升酸奶产品中乳酸菌菌数不得低于1×10⁶。为了解某酸奶中的乳酸菌含量是否达到国家标准，某兴趣小组进行了如下实验，请回答下列问题：
(1)制备培养基：培养基的碳源为___（填“含碳无机物”或“含碳有机物”）。检测培养基灭菌是否合格的方法是___。
(2)样品稀释：若要先将样品稀释10倍，可用无菌移液管吸取1mL酸奶样品，加入到盛有___mL无菌水的三角瓶中，使样品与水充分混匀。然后进行系列稀释操作，得到稀释至10⁶、10⁷、10⁸倍的样品。
(3)培养与统计：吸取不同稀释度的样品各1mL，分别置于不同培养皿内，加入适宜温度的溶化状态的培养基，使之混合均匀，冷却成平板。每个稀释度做3个重复。在适宜条件下培养一段时间后，对平板的菌落数进行统计，结果如表：

稀释度（倍）	106			107			108
平板	1	2	3	1	2	3	1	2	3
平板菌落数（个）	432	421	445	78	70	74	9	6	8

为了保证结果准确，应选择上述稀释度为___倍的平板菌落数作为统计结果，计算出样品中每毫升乳酸菌数为___。
(4)测定微生物的数量常采用的接种方法是___，该方法统计样品中活菌数目的原理是___。

【推荐3】饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。

(1)上图培养基中至少需要添加_______________等物质。
(2)为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行灭菌处理，接种后需将培养皿呈________状态放置。
(3)统计平板上的菌落数，就能大致推测出样品中的活菌数。通常每种稀释液需涂布3个平板，取其平均值，若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是à，则1g土壤中含有此菌的菌株数是________。统计获得的菌落数比实际的活菌数________，原因是________________________________________°
(4)若要对上述菌株进行纯化，在第一区域划线后须将该工具____________后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是从上一区域获得菌种。
(5)产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示 A~E 五种菌株中，_______是产植酸酶最理想的菌株。

【推荐1】聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题:
(1)下表是筛选能高效分解PVA的细菌的培养基配方，X物质最可能为_____。培养基配制完成后通过__________法进行灭菌。

成分	MgSO4	蛋白质	PVA溶液	水	X物质
用量	5g	10g	1000mL	7g	20g

(2)若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释10⁴倍后，取1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为180个，空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中有PVA分解菌______个。该方法的测量值与实际值相比一般会偏小，其原因是_______________________________。
(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入_______。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，则需配制相同PVA浓度的培养基来培养不同菌株，一定时间后通过测定_________来确定不同菌株降解PVA能力的大小。

【推荐2】根据“生物技术实践”相关知识，回答下列问题：
（1）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染操作者的双手需要进行消毒，消毒是指____。
（2）为初步测定某处池水中的细菌数目，实验的大致流程为:水样采集→梯度稀释→接种培养→菌落计数。对采集的池水进行梯度稀释时，应先将1mL水样加入________中以获得稀释10倍的稀释液。实验中对采集的池水要进行稀释的原因是_________。
（3）泡菜在腌制过程中，哪些腌制条件容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加？_______(写出三点)
（4）为保证菌落计数结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。用这种方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低，原因是_____。

【推荐3】如图为实验室培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤，请回答下列问题：

(1)该实验中纯化醋酸菌的接种方法是___；完成步骤④的操作，接种环共需要___次灼烧处理，其中最后一次灼烧的目的是___。
(2)划线的某个平板经培养后，第一次划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二次划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，造成划线上无菌落可能的操作失误有___（回答2个即可）。
(3)配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是___。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是___。
(4)为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株___，理由是___。

菌株	秸秆总重/g	秸秆残重/g	秸秆失重/%	纤维素降解率/%
A	2.00	1.51	24.50	16.14
B	2.00	1.53	23.50	14.92
C	2.00	1.42	29.00	23.32

【推荐1】请回答下列葡萄酒生产生活问题：
(1)葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣（皮渣），皮渣中含有较多的天然食用色素花色苷，可用萃取法提取，萃取前将原料干燥、粉碎的目的分别是_______________，萃取效率主要取决于萃取剂的__________。研究发现，萃取时辅以纤维素酶、果胶酶处理可提高花色苷的提取率，原因是____________。
(2)皮渣堆积会积累醋酸菌，可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的pH调至_________性，为了解皮流中微生物的数量，取10g皮渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用__________（填接种方法）将0.1mL稀释液接种于培养基上。10⁴倍稀释对应的5个平板中菌落数量分别为21、113、91、402和127，则每克皮渣中微生物数量为__________个。
(3)皮渣堆积过程中也会积累某些厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时，乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相似。请设计一个简单实验，探究初筛得到的菌落是醋酸菌还是乳酸菌__________。（简要写出实验设计思路）

【推荐2】普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，将普通酵母菌进行如下图所示处理，筛选获得分解淀粉能力强的α－淀粉酶的高效酵母菌。

回答下列问题：
（1）图中通过_____________法接种进行培养，获得菌落。要进行目的菌株的挑选，应选择_______为初选菌落。为了确保挑选获得的是高效酵母菌，该过程还应该设计一个对照组，对照组的设置与实验组的不同之处是________。
（2）以淀粉为原料，用高效酵母菌进行工业化生产发酵，与普通酵母菌相比，发酵过程中第一次排气的时间提前，每次排气的时间间隔缩短，出现该现象原因可能是________。
（3）将高效酵母菌研磨破碎得到提取液，再通过图示的方法可分离纯化获得α－淀粉酶，分离过程中首先得到的是__________（填“相对分子量小”或“相对分子量大”）的蛋白质，原因是_____________。
（4）在工业生产中，一般需要将酶进行固定化处理，这样可以对酶进行反复利用，节约成本，也可实现___________。

【推荐3】佩戴口罩是预防病原体感染的有效措施。熔喷布是口罩生产的重要原料，其主要成分是聚丙烯（分子式（C₃H₆）_n），其易降解程度是评价口罩合格性的重要指标之一。某研究小组从土壤中分离出高效降解聚丙烯的细菌，回答下列问题：
(1)该研究小组所用的培养基应以聚丙烯为唯一碳源，其目的是_____________。这样的培养基按功能划分，属于_________培养基，其含义是指_________。
(2)称取1.0g某土壤样品，转入适量无菌水中，制备成100mL菌悬液，经___________后，获得细胞密度不同的菌悬液，分别取0.1mL菌悬液涂布在该固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了58个高效降解聚丙烯的菌落，则该土壤样品约含高效降解聚丙烯的细菌____________个；在对该细菌进行扩大培养时，若持续增加培养基中营养物质的浓度，将不利于提高菌种的种群密度，原因是___________。

【推荐1】P·pastoris（某种能以甲醇为唯一碳源的酵母菌）可作为生产抗原蛋白的工程菌。研究人员以图1所示质粒为载体，构建含乙型肝炎病毒表面抗原蛋白（HBsAg）基因的重组质粒，将重组质粒导入组氨酸缺陷型大肠杆菌（在缺失组氨酸的培养基中无法生存）中进行扩增，再经酶切后导入酵母菌，经同源重组整合到其染色体DNA上。请回答下列问题：

   

(1)科研人员构建HBsAg基因表达载体时，应选用_______酶对质粒进行酶切处理，并使用E·coliDNA连接酶将扩增后的HBsAg基因正确插入图1所示质粒。目的基因一般插入启动子的________（填“上游”或“下游”），启动子的作用是_______。
(2)已知HBsAg基因的a链的序列为5'-CGCTACTCATTGCTGCG…………CGGATGAGCGCGTAGAT-3'。利用PCR技术获取HBsAg基因时，引物A结合的单链是________（填“a链”或“b链”）。某同学设计了如下的4种引物，其中可选用的引物组合是______。
A.5'-GGATCCATCTACGCGCTCATCCG-3'
B.5'-CCCGGGCGCTACTCATTGCTGCG-3'
C.5'-CGCAGCAATGAGTAGCGGGGCCC-3'
D.5'-CGGATGAGCGCGTAGATGGATCC-3'
(3)将重组载体导入大肠杆菌时，应在含有_______、不含________的培养基上进行筛选。欲从大肠杆菌中提取DNA，需向含DNA的滤液中加入预冷的酒精溶液后进行离心，取_______（填“上清液”或“沉淀物”）即获得大肠杆菌的DNA.将重组质粒导入大肠杆菌的目的是________。
(4)转化的酵母菌在培养基上培养时，需向其中加入甲醇，目的是_______。

【推荐3】为更好地解决冬季污水处理厂某含氮化合物M去除率低的问题，某研究小组尝试从海水中选育在低温下能高效去除M的细菌（目的菌）。将采集到的海水样本加入液体培养基（只以化合物为氮源），放在的培养箱中培养适当时间，然后取少量培养液加入相同成分的中培养，重复以上步骤，最后取少量培养液C在固体培养基上涂布，得到不同形态、颜色的单菌落（如图1）。已知化合物M在水中溶解度低，含过量M的固体培养基不透明。据图回答下列问题：
          
(1)液体培养基A应选用的灭菌方法是______（填“高压蒸汽灭菌”或“干热灭菌”）。
(2)用稀释涂布平板法计算分解M细菌数量时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是______。
(3)图2是瓶的细菌中其中三类细菌的最大密度柱形图，由图推断，从瓶到瓶液体培养的目的是______；甲类细菌密度迅速降低的主要原因是______。
(4)在固体培养基中，无透明带菌落利用的氮源主要是______；有透明带菌落利用的氮源主要是______，据此可筛选出目的菌。
(5)若需对获得的菌种进行长期保存，可采用的方法是______。