【推荐1】下图中的①②③表示培育番茄新品种的三种育种方法。

（1）方法①和③的育种原理______________，其中方法_____可实现不同物种间的育种。
（2）方法②是____________育种，育种过程使用秋水仙素的目的是__________________。
（3）方法③育种过程中使用的工具酶是______________。
（4）上述三种育种方法能培育出新物种的是(      )
A．①                           B．②                           C．③                           D．没有

【推荐2】土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有一个大的质粒叫Ti质粒（含冠瘿瘤基因），它携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才转入植物细胞的基因组。其结构及转化过程如图所示，回答相关问题

（1）若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即___________，将抗旱基因转移至Ti质粒的____________中，且要保证复制起始位点和____________不被破坏。然后在一定条件下将外植体在含有___________的土壤农杆菌的稀释培养基上培养，使得抗旱基因转入植物细胞并整合到植物基因组中。
（2）将上述外植体置于一个含有某种抗生素的合适培养基中进行筛选，发生转化的外植体通过__________形成愈伤组织，再通过____________产生不定芽和体细胞胚再长出整个植物。
（3）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，如果培育成的植株能适应干旱环境，还应进行_________水平鉴定，以确定该变异能否遗传给后代。为获得纯合的转基因植株，还需要对转基因植株进行________。

【推荐3】回答下列与“生物技术”相关的问题：
（1）生物技术是应用自然科学及工程学的原理，以________________作为反应器，将物料进行加工，以提供产品为社会服务的技术。例如，以_____________为反应器制酒，以______________为反应器制醋，以转基因的大肠杆菌为反应器生产_________________，以植物_________________为反应器生产试管幼苗。
（2）生物工程主要包括___________、发酵工程、蛋白质工程、酶工程和基因工程5中。其中，实施基因工程需要具备4个条件：___________、基因的分离、基因载体、__________。
（3）发酵技术就目前而言都是一次性的，每次都需要经过“________________→接种→发酵→____________”这样一个周而复始的流程。任何一种发酵产品都要经过一系列酶促反应，都是生化反应的产物。例如，用糯米酿酒，就是使用微生物在一定条件下，经过一系列酶促反应获得产物的结果，是一个从淀粉→糖→酒→醋的变化过程。首先，糯米中的淀粉在有氧和温度较高的条件下水解成糖，这一过程是由酒曲中的黑根霉或黑曲霉中的_____________完成的。然后，在较低温度和无氧的条件下酵母开始生长，经过糖酵解和____________反应，产生了乙醇，使酒味越来越浓。如果存放时间过长，发酵物的酒味将变淡并有些变酸，这是因为醋杆菌将乙醇氧化成____________的结果。
（4）为什么就储存的时间愈长愈好？________________________________。

【推荐1】接种疫苗是预防传染病的一项重要措施，乙肝疫苗的使用可有效阻止乙肝病毒的传播，降低乙型肝炎发病率。乙肝病毒是一种DNA病毒。重组乙肝疫苗的主要成分是利用基因工程技术获得的乙肝病毒表面抗原（一种病毒蛋白）。回答下列问题。
(1)制备重组乙肝疫苗时需要构建重组表达载体，构建重组表达载体的需要的工具酶是___________。需要利用重组表达载体将乙肝病毒表面抗原基因（目的基因）导入酵母细胞中表达。导入前要对酵母菌用_____________处理，目的是______________________。
(2)若重组表达载体中含有四环素的抗性基因，筛选已经成功导入此重组表达载体的酵母菌时应在培养基中加入______________。能识别载体中的启动子并驱动目的基因转录的酶是___________。
(3)目的基因导入酵母细胞后，若要检测目的基因是否插入染色体中，需要用___________技术。

【推荐2】PCR技术是模拟体内DNA复制的方式在体外选择性地将DNA某个特殊区域进行扩增的技术。DNA扩增过程的产物有长产物片段和短产物片段两种，其形成过程如下图所示。请回答下列问题：

（1）DNA分子具有方向性，通常将其羟基末端称为3端，磷酸基团末端称为5端。DNA复制时子链延伸的方向是__________（填“5′→3′”或“3′→5′”）。由于DNA聚合酶不能直接催化两个单核苷酸之间反应，因此DNA复制需要一段单链DNA或RNA作为___________。
（2）下图为某环状DNA分子中的一段已知序列片段，现欲通过PCR技术扩增出未知序列，以进行基因测序，请从下表列出的引物中选出一对合适的引物___________。
5′- GACCTGTGGAAGC…… CATACGGGATTG-3′
3′- CTGGACACCTTCG…… GTATGCCCTAAC-5′

引物Ⅰ		引物Ⅱ
甲	5′-GACCTGTGGAAGC	A	5′-CATACGGGATTG
乙	5′-CTGGACACCTTCG	B	5′-GTATGCCCTAAC
丙	5′-CGAAGGTGTCCAG	C	5′-GTTAGGGCTTAC
丁	5′-GCTTCCACAGGTC	D	5′-CAATCCCGTATG

（3）下面为某同学利用PCR仪进行PCR的操作步骤请完善相关步骤内容。
a．按配方准备好各组分。b．用微量移液器向微量离心管中依次加入各组分：模板DNA、4种脱氧核苷三磷酸、__________、引物、缓冲液等。c．进行_________，使反应液集中在微量离心管底部。
d．将微量离心管放入PCR仪设计好PCR仪的循环程序。e．进行PCR反应。
（4）PCR的产物片段中，只有______________才是符合要求的目标产物。若将一个源DNA进行PCR反应，从理论上推测第30轮循环产物中不符合要求的DNA片段有___________个。

【推荐3】基因疫苗是指将编码外源性抗原的基因导人人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划采用基因工程和胚胎工程技术，培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：
(1)研究人员可采用_____技术扩增得到抗原蛋白基因cDNA，并将扩增得到的cDNA导入受体菌的群体中储存，这个群体称为_____。
(2)抗原蛋白基因cDNA可通过克隆筛选获得，该cDNA比染色体DNA上的抗原蛋白基因短，原因是该cDNA没有_____。
(3)为使抗原蛋白基因在高产奶牛细胞中高效表达，需要把抗原蛋白基因片段正确插入表达载
体的_____和_____之间。
(4)将重组表达载体导入高产奶牛受体细胞常用的方法是_____。
(5)为获得更多的转基因高产奶牛，可以采用体细胞克隆技术，将纯合转基因高产奶牛的体细胞核注入_____细胞中，构建重组胚胎进行移植。与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是_____。

【推荐1】干扰素是一种抗病毒特效药，传统方法提取难度大，价格昂贵。某制药公司通过下图方式生产干扰素。请据图回答。

（1）干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种_____________________。
（2）研究证明，DNA分子复制时，子链延伸的方向是5′→3′。构建基因表达载体前要利用PCR技术扩增干扰素基因，可以从图二中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取___________作为引物。综合图二、图三分析，对含干扰素基因的DNA片段和质粒进行酶切时，可选用的限制酶组合为___________。
   
（3）若要使获得的转基因牛乳汁中含有人的干扰素，构建的基因表达载体应含有牛乳腺蛋白基因的启动子，原因是_________________________________。
（4）图一中A过程为_____________，该过程要注意_____________，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
（5）为了实现干扰素的批量生产，早期胚胎移植之前要进行质量检测，并选择细胞中的性染色体组成为_____________的早期胚胎进行移植。图一中B、C过程移入受体的胚胎能够在受体内存活的原因是__________________________。

【推荐3】水稻胚乳中含直链淀粉和支链淀粉，直链淀粉所占比例越小糯性越强。科研人员将能表达出基因编辑系统的DNA序列转入水稻，实现了对直链淀粉合成酶基因（Wx基因）启动子序列的定点编辑，从而获得了3个突变品系。
   
(1)基因工程的核心工作是
____。将能表达出基因编辑系统的DNA序列插入Ti质粒，常用Ti质粒做载体的原因是
____。
(2)根据启动子的作用推测，Wx基因启动子序列的改变影响了
____，从而改变了Wx基因的转录水平。与野生型水稻相比，3个突变品系中Wx基因控制合成的直链淀粉合成酶的氨基酸序列没有发生改变，推测原因是
____。
(3)为检测启动子变化对Wx基因表达的影响，科研人员需要检测Wx基因转录产生的mRNA （Wx mRNA）的量。检测时分别提取各品系胚乳中的总RNA，经
____过程获得总cDNA。为了确保PCR扩增出的是Wx基因的cDNA，关键操作是
____。
(4)各品系Wx mRNA量的检测结果如图所示，据图推测糯性最强的品系为
____，原因是
____。