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题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:180 题号:14053049
下表中列出了几种限制性核酸内切酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制性核酸内切酶的酶切位点。请回答下列问题:

限制性核酸内切酶

BamHⅠ

HindⅢ

EcoRⅠ

SmaⅠ

识别序列及切割位点

G↓GATCC

CCTAG↑G

A↓AGCTT

TTCGA↑A

G↓AATTC

CTTAA↑G

CCC↓GGG

GGGCC↑C


               
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越________
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是____________________________________________________________
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制性核酸内切酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止________________
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入________酶。
(6)现使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制性核酸内切酶同时处理质粒、外源DNA,并经拼接获得的重组质粒进行再次酶切,假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图1、2中标示的酶切位点及表所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。
①采用BamHⅠ和HindⅢ酶切,得到________种DNA片段。
②采用EcoRⅠ和HindⅢ酶切,得到________种DNA片段。

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