以海藻酸钠为载体固定化米曲霉生成的果胶酶。为研究海藻酸钠浓度对果胶酶固定化率的影响,将不同浓度的海藻酸钠分别与果胶酶混合后,过滤得到的固定化酶和上清液,然后检测它们的酶活性,结果见下表。
请回答:
(1)果胶酶可以通过米曲霉等微生物来生产,______ 是筛选高表达菌株的最简便方法之一。若需要对所得菌种进行分离计数,应采用______ 法进行接种。
(2)3,5二硝基水杨酸(DNS)与果胶水解的主要产物______ 共热能够产生棕红色氨基化合物,在一定范围内果胶水解产物的量与呈色物溶液颜色成正比,在550nm处测定溶液______ 可算出果胶水解的主要产物含量,从而计算果胶酶酶活。
(3)在合适条件下,将果胶酶与海藻酸钠混合后,滴加到一定浓度的钙离子溶液中,使液滴形成凝胶固体小球,该过程是对酶进行______ 。随着海藻酸钠浓度的升高,上清液中果胶酶酶活性逐渐______ 。当海藻酸钠浓度≥4%时,溶液黏度高,固定化时几乎不成球,不利于固定化酶的回收,选取浓度为______ 的海藻酸钠为载体,可得到较好的固定化效果。
海藻酸钠浓度/% | 2.0 | 2.5 | 3.0 | 3.5 | 4.5 | 5.0 |
上清液酶活性/U | 1271 | 1200 | 1138 | 1080 | 966 | 938 |
固定化酶酶活性/U | 871 | 943 | 1005 | 1062 | 1176 | 1205 |
固定化率/% | 40.7 | 44.0 | 46.9 | 49.6 | 54.9 | 56.2 |
请回答:
(1)果胶酶可以通过米曲霉等微生物来生产,
(2)3,5二硝基水杨酸(DNS)与果胶水解的主要产物
(3)在合适条件下,将果胶酶与海藻酸钠混合后,滴加到一定浓度的钙离子溶液中,使液滴形成凝胶固体小球,该过程是对酶进行
更新时间:2021-11-03 16:48:05
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【推荐1】图1为利用苹果生产果汁、果酒和果醋的大致工艺流程图,图2为某同学进行的澄清苹果汁生产实验图。请回答下列问题: ___________ ,使浑浊的果汁变得澄清。
(2)为了进行果酒的发酵生产,通常先分离、纯化酵母菌,然后扩大培养、固定化酵母细胞,最后才接种、发酵。
①在分离纯化酵母菌时,需要进行无菌操作,其中对培养皿通常采用____________ 法灭菌。
②在使用液体培养基扩大培养的过程中,需要不断地振动或搅拌,目的是____________ ,有利于酵母菌的繁殖。
③制备固定化酵母细胞的过程中,如果制作的凝胶珠颜色过浅,呈白色,说明海藻酸钠___________ ,固定的酵母细胞数目___________ 。
(3)苹果酒经过进一步发酵可形成苹果醋,在此过程中,需要的培养条件是___________ 。
(4)如图2某同学进行的澄清苹果汁实验,将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天,该固定化柱仍可用于苹果汁的制作实验,说明固定化酶可被____________ 使用;在该装置中可以通过____________ 措施保证反应充分进行。
(1)用苹果加工成果汁的过程中,需要加入果胶酶,果胶酶可以将果胶分解成
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③制备固定化酵母细胞的过程中,如果制作的凝胶珠颜色过浅,呈白色,说明海藻酸钠
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【推荐2】水蜜桃具有美肤、清胃、润肺、祛痰等功能,其可以制作成水蜜桃汁、水蜜桃酒和水蜜桃醋等产品,深受大众喜爱。某企业对水蜜桃进行相关的制作实验,如图所示:
回答下列问题:
(1)打开阀2,使浑浊的水蜜桃汁与黑曲霉提取液混合后可得到较多的澄清水蜜桃汁的原因是黑曲霉提取液中含有大量的果胶酶,该酶将果胶分解形成_____________ ,从而使浑浊的果汁变得澄清。
(2)固定化柱2中加入常用_____ 法固定的酵母菌;制备固定化酵母细胞的实验操作中,要配制氯化钙溶液,其作用是___________________________________ 。
(3)固定化果胶酶更适合使用________________ 或_________________ ,理由是 _____________________________________ 。
(4)固定化柱3中需加入的菌种是_____ 。该菌种在氧气充足、_____ 情况下,将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
回答下列问题:
(1)打开阀2,使浑浊的水蜜桃汁与黑曲霉提取液混合后可得到较多的澄清水蜜桃汁的原因是黑曲霉提取液中含有大量的果胶酶,该酶将果胶分解形成
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【推荐3】(一)回答与桑椹汁、桑椹酒和桑椹醋生产有关的问题:
(1)桑椹汁生产:挑选新鲜桑椹制匀浆,匀浆中用果胶酶将果胶彻底酶解得到_______ ,目的是提高果汁的________ 。
(2)桑椹酒生产:桑椹汁中加入由_______ 、发酵红曲、乳酸链球菌素构成的复合发酵工艺组合,能快速启动发酵,并能有效抑制发酵过程中_______ 污染而导致挥发酸超标;在16.6℃下发酵26天,可获得酒精度为4%的桑椹酒;欲加快发酵过程,可以采取的措施有_______ (至少答出2点)。
(3)桑椹醋生产:选择高产醋杆菌时,可将醋杆菌用_______ 法培养在白色的CaCO3培养基上,并挑选_______ 的菌落作为发酵菌种。若增加接种量和接种不同类型醋杆菌,则可以加快产酸的进程,并抑制_______ 对发酵的影响,从而提高醋酸含量,使口感更纯正。
(二)回答与利用生物技术培养抗虫棉有关的问题
(1)获得目的基因:若用化学方法合成目的基因,则该方法的前提是目的基因_______ 。
(2)导入目的基因:农杆菌转化法是选择________ 作为载体,为便于筛选导入成功的细胞,载体上带有________ 基因。将农杆菌与外植体共培养期间,要发生农杆菌的附着,_______ ,这是为了获得含目的基因的受体细胞。影响转化效率的因素有农杆菌的数量、共培养的时间和温度等环境条件,还有_______ 等(至少答出2点)。共培养后,将植物材料转入含植物激素和营养物质的培养基中培养,同时添加_______ 以去除附着的农杆菌。
(3)检测导入是否成功。常用________ 快速筛选出含目的基因的受体细胞。现有抗虫基因整合到一条染色体的转化植株,欲获得纯合植株,常采用的方法有_________________ (至少答出2种)。
(A.聚合酶链式反应 B.同位素标记法 C.抗原抗体杂交 D.光电比色法)
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【推荐1】回答下列(一)、(二)小题:
(一)酒精饮料中的尿素会与酒精反应生成氨基甲酸乙酯,是一种潜在致癌物。现欲从土壤微生物中分离出能分解尿素的微生物并用于酒精饮料的生产,进行如下实验。请分析回答:
(1)在“分离以尿素为氮源的微生物”实验中,配置的无氮源培养基应用_______ 灭菌。涂布后的平板应在恒温培养箱中_______ 培养。培养后发现平板上出现了黄色环带的菌落,该菌种直接利用的氮源可能是_______ 环带的大小体现了相关酶的___________________________________ 。
(2)有人尝试用靛酚蓝比色法定量测定脲酶活性。该方法的原理是利用铵态氮和显色试剂反应,生成水溶性蓝色染料,再通过比色计测定光密度值。关于靛酚蓝比色法的说法,错误的是________
A.该实验需要用标准铵溶液制作标准曲线
B.可用光程1cm的比色杯在550nm处测定OD值
C.测定时需用水作为空白对照
D.根据标准曲线,光密度值越大,脲酶活性越高
(3)筛选出高表达脲酶菌株并扩增后后,可从_______ 中获取酶,并用物理或化学的方法制成_______ ,在消除酒中尿素的同时又不影响酒的风味。
(二)黄曲霉毒素是黄曲霉菌产生的有毒物质,毒性比氯化物高10倍,也是自然界最强的化学致癌物质,主要污染花生、玉米等粮油食品。有人尝试将黄曲霉毒素抗体基因导入大肠杆菌和酵母菌,用生物工程技术制造抗体,导入过程如下:
请回答以下问题:
(1)配置转基因大肠杆菌的培养基时,除必要的营养物质、氯化钠、琼脂和水外,还应加入_______ ,获得菌落后,应用_______ 在_______ 上进行扩大培养。产生的抗体专一性强,灵敏度高,可制成相应的_______ 用于快速检测食物中的黄曲霉毒素
(2)本案例中,转基因成功的标志是____________________ ,可用_______ 法检测。
(3)实际结果发现,酵母菌产生的抗体活性比大肠杆菌产生的高,推测可能的原因是______________________________________________________ 。
(一)酒精饮料中的尿素会与酒精反应生成氨基甲酸乙酯,是一种潜在致癌物。现欲从土壤微生物中分离出能分解尿素的微生物并用于酒精饮料的生产,进行如下实验。请分析回答:
(1)在“分离以尿素为氮源的微生物”实验中,配置的无氮源培养基应用
(2)有人尝试用靛酚蓝比色法定量测定脲酶活性。该方法的原理是利用铵态氮和显色试剂反应,生成水溶性蓝色染料,再通过比色计测定光密度值。关于靛酚蓝比色法的说法,错误的是
A.该实验需要用标准铵溶液制作标准曲线
B.可用光程1cm的比色杯在550nm处测定OD值
C.测定时需用水作为空白对照
D.根据标准曲线,光密度值越大,脲酶活性越高
(3)筛选出高表达脲酶菌株并扩增后后,可从
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请回答以下问题:
(1)配置转基因大肠杆菌的培养基时,除必要的营养物质、氯化钠、琼脂和水外,还应加入
(2)本案例中,转基因成功的标志是
(3)实际结果发现,酵母菌产生的抗体活性比大肠杆菌产生的高,推测可能的原因是
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【推荐2】纤维素是植物秸秆的主要成分,可利用纤维素酶将其降解为葡萄糖,再利用葡萄糖生成酒精。回答下列问题:
(1)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即____________________ 。
(2)在葡萄酒的自然发酵过程中,起主要作用的酵母菌来自____________________ ,发酵后是否有酒精产生可以利用__________ 来检验。
(3)科研人员将纯化的酵母菌与海藻酸钠制成凝胶珠是利用__________ 法固定酵母菌细胞提高其利用率。一般来说,细胞更适合此法固定化,而酶更适合采用__________ 和__________ 法固定化,这是因为____________________ 。
(1)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即
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(3)科研人员将纯化的酵母菌与海藻酸钠制成凝胶珠是利用
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【推荐3】请回答下列有关酶应用的问题:
(1)在果汁生产中,果胶酶能提高出汁率并使果汁澄清,其原因是________________________ 。将果胶酶与果泥混合后,进行充分搅拌的目的是_________________________ 。
(2)加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化学物质包裹的,如果将酶直接添加到洗衣粉中,酶很快会_____ 。为了比较加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果,需要控制的无关变量有___________ (答出两点)。
(3)某小组用纯化后的酵母细胞与海藻酸钠溶液混合,制备了固定化酵母。在相同条件下分别接种固定化酵母与游离酵母进行酒精发酵,测定发酵液中的酒精度如图所示:
①固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在_____ 的技术,一般来说,酶更适合采用_____ 法固定化,而细胞多采用_____ 法固定化。
②上述实验结果表明,在发酵初期用_____ 发酵更具优越性,判断依据是____________________ 。
(1)在果汁生产中,果胶酶能提高出汁率并使果汁澄清,其原因是
(2)加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化学物质包裹的,如果将酶直接添加到洗衣粉中,酶很快会
(3)某小组用纯化后的酵母细胞与海藻酸钠溶液混合,制备了固定化酵母。在相同条件下分别接种固定化酵母与游离酵母进行酒精发酵,测定发酵液中的酒精度如图所示:
①固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在
②上述实验结果表明,在发酵初期用
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