微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节。乳酸菌和我们的生活紧密相连,现有研究人员打算从泡菜中获取可用于酸奶发酵的菌种。回答下列问题:
(1)研究人员要分离纯化乳酸菌,在配制培养基时,除了要加入各种营养物质外,一般还需要添加琼脂的原因是________________________ 。
(2)培养基中的碳酸铵______ (填“能”或“不能”)为乳酸菌提供碳源,原因是________________________ 。
(3)若用稀释涂布平板法计数乳酸菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的____________ 。为了能鉴别乳酸菌菌落,往往在配制培养基时加入碳酸钙,原因是____________________________________ 。
(4)若要调查统计泡菜滤液中微生物的浓度,要设置空白对照组和多个实验组,若某个实验组平板上菌落平均数为52个/平板,而空白对照组中一个平板上出现了7个菌落,这种结果说明此次调查出现了____________ 现象。对这次调查数据应如何处理?__________________ 。
(1)研究人员要分离纯化乳酸菌,在配制培养基时,除了要加入各种营养物质外,一般还需要添加琼脂的原因是
(2)培养基中的碳酸铵
(3)若用稀释涂布平板法计数乳酸菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的
(4)若要调查统计泡菜滤液中微生物的浓度,要设置空白对照组和多个实验组,若某个实验组平板上菌落平均数为52个/平板,而空白对照组中一个平板上出现了7个菌落,这种结果说明此次调查出现了
更新时间:2021-11-08 17:26:00
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【推荐1】啤酒的工业化生产可分为麦芽制备、麦汁制备、发酵和后处理四大工序。请根据生物学知识回答下列问题。
(1)麦芽制备:麦芽中的淀粉在a淀粉酶等的作用下最终水解成_____ ,可以此为原料酿制啤酒。刚收获的大麦有休眠期需要较长时间才能产酶,而工厂用植物生长调节剂;______ 处理,可使大麦种子无须发芽就能产生a淀粉酶。
(2)某些微生物也能合成并分泌a淀粉酶,为筛选胞外a淀粉酶分泌型菌种,一般从_____ (填“枯枝落叶周围”“肉类加工厂周围”或“面粉加工厂周围")获取土样,用_____ 水稀释后,涂布到以淀粉为______ 的培养基上培养,一段时间后在培养基表面滴加碘液,可在菌落周围观察到透明圈。若要筛选酶活性较高的菌种,需挑选若干个_______ 比值大的菌落,分别利用液体培养基振荡培养,再将培养液离心,通常取_________ (填“上清液”或“沉淀物”)用于检测酶活性。
(3)啤酒发酵:向制备好的麦汁中添加酵母。要提高啤酒的产量,应控制的发酵条件有____ 。
(1)麦芽制备:麦芽中的淀粉在a淀粉酶等的作用下最终水解成
(2)某些微生物也能合成并分泌a淀粉酶,为筛选胞外a淀粉酶分泌型菌种,一般从
(3)啤酒发酵:向制备好的麦汁中添加酵母。要提高啤酒的产量,应控制的发酵条件有
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【推荐2】葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣(皮渣)。目前这些皮渣主要用作饲料或肥料,同时研究者也采取多种措施拓展其利用价值。回答下列问题:
(1)为了解皮渣中微生物的数量,取10g皮渣加入90mL无菌水,混匀、静置后取上清液,用稀释涂布平板法将0.1mL稀释液接种于培养基上。104倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95,则每克皮渣中微生物数量为______________ 个。
(2)皮渣堆积会积累醋酸菌,可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时,需要将培养基的pH调至____________ 性。培养筛选得到的醋酸菌时,在缺少糖源的液体培养基中可加入乙醇作为__________ 。
大熊猫是我国特有的珍稀野生动物,每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12-38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题:
(3)为筛选纤维素分解菌,将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以____________ 为唯一碳源的固体培养基上进行培养,该培养基从功能上分类属于_________ 培养基。
(4)配制的培养基必须进行灭菌处理,目的是__________ 。检测固体培养基是否灭菌彻底的操作是________ 。
(5)为高效降解农业秸秆废弃物,研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌,在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验,结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株_________ (填A/B/C),理由是______________ 。
(1)为了解皮渣中微生物的数量,取10g皮渣加入90mL无菌水,混匀、静置后取上清液,用稀释涂布平板法将0.1mL稀释液接种于培养基上。104倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95,则每克皮渣中微生物数量为
(2)皮渣堆积会积累醋酸菌,可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时,需要将培养基的pH调至
大熊猫是我国特有的珍稀野生动物,每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12-38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题:
(3)为筛选纤维素分解菌,将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以
(4)配制的培养基必须进行灭菌处理,目的是
(5)为高效降解农业秸秆废弃物,研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌,在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验,结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株
菌株 | 秸秆总重(g) | 秸秆残重(g) | 秸秆失重(%) | 纤维素降解率(%) |
A | 2.00 | 1.51 | 24.50 | 16.14 |
B | 2.00 | 1.53 | 23.50 | 14.92 |
C | 2.00 | 1.42 | 29.00 | 23.32 |
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【推荐3】秸秆还田,既可以减少焚烧秸秆造成的环境污染,又可以增强土壤肥力。小明同学准备从土壤中分离出纤维素分解菌,以加速秸秆的分解。其实验过程如下。
(1)在实验前,小明将滤纸埋在土壤中,30天后取出腐烂的滤纸筛选纤维素分解菌。此时,滤纸片的作用是____________ 。
(2)配置纤维素分解菌的培养基:
①配置培养基时,先要计算培养基配方比例,再称量、熔化,最后还应_____________ 。
②上表中的培养基是____________ 培养基(从功能来看),判断依据是____________ 。
(3)纤维素分解菌的鉴定
①纤维素分解菌的鉴别培养基倒平板前,需要计入按一定比例灭过菌的____________ 溶液,混匀倒平板。
②吸取适量的培养液,一般采用____________ 方法接种到纤维素分解菌的鉴别培养基上。
(4)为高效降解农业秸秆废弃物,兴趣小组利用从土壤中筛选获得的A、B、C3株纤维素分解菌,在37℃条件下进行玉米秸秆和降解实验,结果如图所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株____________ ,理由是____________ 。
(1)在实验前,小明将滤纸埋在土壤中,30天后取出腐烂的滤纸筛选纤维素分解菌。此时,滤纸片的作用是
(2)配置纤维素分解菌的培养基:
培养基配方 | |||||||
纤维素 | 酵母膏 | NaNO3 | KH2PO4 | Na2HPO4·7H2O | MgSO4·7H2O | KCl | 水解酪素 |
5g | 0.5g | 1g | 0.9g | 1.2g | 0.5g | 0.5g | 0.5g |
②上表中的培养基是
(3)纤维素分解菌的鉴定
①纤维素分解菌的鉴别培养基倒平板前,需要计入按一定比例灭过菌的
②吸取适量的培养液,一般采用
(4)为高效降解农业秸秆废弃物,兴趣小组利用从土壤中筛选获得的A、B、C3株纤维素分解菌,在37℃条件下进行玉米秸秆和降解实验,结果如图所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株
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【推荐1】PET全称为“聚对苯二甲酸乙二酯”,是以石油为原料制造的常见化工材料,广泛用于生产食品容器和电子产品,而PET塑料制品废弃后在自然界中极难降解,成为塑料“白色污染”的主要来源。为筛选出能高效分解PET塑料的微生物,某团队进行相关实验,回答下列问题:
(1)研究人员在垃圾填埋场的PET塑料瓶残骸寻找目的菌株的原因是_____ 。
(2)在筛选所需微生物时,以PET颗粒和薄膜为唯一碳源的培养基进行培养,其中PET可以为微生物的生存提供_____ 和_____ (从细胞呼吸意义的角度考虑)。对配制好的培养基用_____ 法进行灭菌,而对接种环用_____ 法灭菌。待长出菌落后,直接挑取菌落采用_____ (接种方法)将菌落接种至PET颗粒(2g·L-1)无机盐固体培养基和无PET颗粒的无机盐培养基,最终筛选纯化得到能够对PET塑料具有降解作用的菌株。将菌落接种至无PET颗粒的无机盐培养基的目的是_____ 。
(3)已知含有PET颗粒的培养基具有不透明的特点,微生物将PET颗粒分解后,培养基呈现出透明圈。据图判断,应该选择_____ (填“A”、“B”、“C”、“D”、“E”)为选择的菌种,判断的理由是_____ 。
(1)研究人员在垃圾填埋场的PET塑料瓶残骸寻找目的菌株的原因是
(2)在筛选所需微生物时,以PET颗粒和薄膜为唯一碳源的培养基进行培养,其中PET可以为微生物的生存提供
(3)已知含有PET颗粒的培养基具有不透明的特点,微生物将PET颗粒分解后,培养基呈现出透明圈。据图判断,应该选择
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【推荐2】以下是花药培养和细菌培养的基本过程。
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请回答下列问题:
(1)选材时,确定花药中花粉的发育时期最常用的染色方法是________ ;细菌培养中常用的接种方法是________ 。
(2)材料消毒时,用酒精和氯化汞溶液对花蕾处理后均需用无菌水冲洗,目的是________ ;对培养基灭菌的常用方法是________ ;在接种过程中,对接种环和镊子等金属器具进行灭菌的方法是________ 。
(3)在花药培养过程中,花粉可经过愈伤组织产生丛芽生根后发育成植株,还可经过________ 途径发育成植株;花药各阶段的培养基组分差异通常比细菌各代培养基的组分差异________ (填“大”或“小”)。
(4)花药培养的目的是获得花粉植株,用于________ ;细菌培养过程中,使用选择培养基的目的是________ 。
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请回答下列问题:
(1)选材时,确定花药中花粉的发育时期最常用的染色方法是
(2)材料消毒时,用酒精和氯化汞溶液对花蕾处理后均需用无菌水冲洗,目的是
(3)在花药培养过程中,花粉可经过愈伤组织产生丛芽生根后发育成植株,还可经过
(4)花药培养的目的是获得花粉植株,用于
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【推荐3】金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌,由于抗生素的滥用,出现了抗药性强的金黄色葡萄球菌,几乎能抵抗人类所有的药物,但是万古霉素可以对付它。请回答下列问题:
(1)有人认为,抗药性强的金黄色葡萄球菌的产生是滥用抗生素诱发了金黄色葡萄球菌基因突变所致。该观点______ (填“正确”或“不正确”),原因是______________________________ 。
(2)若想对某样品中的超级细菌进行计数,应对样品中的菌株进行纯化,一般采用______ 法进行接种。接种后的平板应______ 放入培养箱中培养一段时间后,统计平板上的菌落数目,这样放置的好处是___________________________ 。
(3)研究发现,不同浓度的万古霉素的效果不同,为探究万古霉素杀灭抗药性强的金黄色葡萄球菌的最佳浓度,实验的设计思路是________________________________________________ 。
(1)有人认为,抗药性强的金黄色葡萄球菌的产生是滥用抗生素诱发了金黄色葡萄球菌基因突变所致。该观点
(2)若想对某样品中的超级细菌进行计数,应对样品中的菌株进行纯化,一般采用
(3)研究发现,不同浓度的万古霉素的效果不同,为探究万古霉素杀灭抗药性强的金黄色葡萄球菌的最佳浓度,实验的设计思路是
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解题方法
【推荐1】当人体内分泌的乳糖酶数量不足以完全消化和分解乳糖时,就会引起腹泻,称为乳糖不耐受症。据统计,世界上约有三分之二的人患有此症,乳糖酶的应用能很好地解决这一问题。为提高乳糖酶的产量,我国科研人员通过图的实验过程筛选出生产乳糖酶的优良酵母菌菌株。
(1)取少量奶酪配制成悬浮液,接种到①中,①应为适合_________ 生长的选择培养基,其中奶酪的最主要作用是_________ 。
(2)把①置于合适的环境下培养一段时间,通过稀释后涂布于②固体培养基上,对涂布器和培养基的灭菌方法依次为_________ 。②中培养出的单个菌落是否全部由单一个体繁殖所得?_________ 。原因是_________ 。
(3)纯培养时可使用_________ 法,挑选单菌落接种到含X—gal(乳糖酶的显色底物)的培养基中,乳糖酶可以将无色的X—gal切割成半乳糖和蓝色的溴靛蓝,因此③中的目标菌落应该呈_________ 色。产酶能力不同,呈现的颜色深浅不同,据此应选择图中的y_________ 菌落用于提取乳糖酶。_________ 。
(1)取少量奶酪配制成悬浮液,接种到①中,①应为适合
(2)把①置于合适的环境下培养一段时间,通过稀释后涂布于②固体培养基上,对涂布器和培养基的灭菌方法依次为
(3)纯培养时可使用
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解题方法
【推荐2】研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌,并对其进行研究。回答下列问题:
(1)在细菌筛选过程中,将土壤样品稀释液接种至以_____ 为唯一碳源的固体培养基上进行培养,除碳源外,该培养基还含有氮源、水、无机盐和_____ 。不同微生物生长所需的pH是不同的,在配制培养基时,pH的调节应在灭菌_____ (填“前”或“后”)。
(2)在将筛选到的微生物进行分离纯化时,采用了两种不同的接种方法,培养一段时间后得到如下图所示的菌落。_____ ,平板B所采用的接种工具是_____ 。A、B两个平板所采用的接种方法适合用来计数的是_____ (填“A”或“B”),该方法能用于估算土壤样品中菌种数的原理是_____ 。_____ 倍,根据图示的三个平板上的菌落结果,可以估算1克土壤中的细菌数为_____ 个。
(1)在细菌筛选过程中,将土壤样品稀释液接种至以
(2)在将筛选到的微生物进行分离纯化时,采用了两种不同的接种方法,培养一段时间后得到如下图所示的菌落。
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解题方法
【推荐3】为提高作物产量,种植业往往使用大量的氮素化肥,既增加了生产成本,又易造成环境污染。自生固氮菌营独立生活,为改变这种现状带来了希望。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究,部分实验流程如下图1.回答下列问题:_____ 。
(2)下表为两种培养基的配方,步骤④应选其中的培养基_____ 。
(3)纯化培养时,需同时进行未接种培养基的培养,目的是_____ 。
(4)④的平板上统计结果数一般用_____ 表示,一般选择数目_____ 在范围的平板上计数。若甲研究员做这个实验,统计的菌落数分别是132、136、128,则每克土壤中含有的固氮菌为_____ 个,运用这种方法统计的结果往往较实际值_____ 。原因是_____ 。
(5)图3是某同学利用不同于图1方法从稀释液中分离菌株的示意图。下列对其操作及结果的叙述不正确的有_____ (填字母)。
b.划线时将沾有菌种的接种环插入培养基
c.只有在5这一区域中才能得到所需菌落
d.整个过程需要对接种环进行6次灼烧
(2)下表为两种培养基的配方,步骤④应选其中的培养基
培养基类型 | 培养基组分 |
培养基甲 | 甘露醇、![]() ![]() ![]() ![]() |
培养基乙 | 甘露醇、![]() ![]() ![]() ![]() |
(4)④的平板上统计结果数一般用
(5)图3是某同学利用不同于图1方法从稀释液中分离菌株的示意图。下列对其操作及结果的叙述不正确的有
b.划线时将沾有菌种的接种环插入培养基
c.只有在5这一区域中才能得到所需菌落
d.整个过程需要对接种环进行6次灼烧
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【推荐1】我国《生活饮用水卫生标准》对饮用水中细菌的规定:因水源与净水技术受限时,菌落总数指标限制在每毫升不超过500个菌落。某兴趣小组对本地饮用水资源进行了测定。请回答下列问题:
(1)测定细菌活菌数目时,需制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,其中牛肉膏能为细菌提供的营养成分有___________ (答两点)。
(2)为了便于统计饮用水中活菌的数目,可选用滤膜法接种,取待测水样1mL加入无菌水___________ mL制备稀释倍数为100的稀释液。取稀释后的菌液10mL进行过滤,然后将滤膜放置在培养基上培养。为了了解稀释、过滤和放置滤膜等操作过程是否感染杂菌,需设置对照实验,请简单写出设置对照实验方法:___________ 。
(3)将放有滤膜的平板置于适宜条件下培养,每隔12小时统计一次菌落数目、选取___________ 作为实验结果,原因是___________ 。若对照组的菌落数为0个,实验组的4个平板上菌落数分别为68个、50个、60个、48个,据此分析,所取饮用水的细菌含量____________ (填“符合”或“不符合”)国家标准。为降低饮用水中细菌的含量,还可用___________ 进行消毒杀菌。
(1)测定细菌活菌数目时,需制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,其中牛肉膏能为细菌提供的营养成分有
(2)为了便于统计饮用水中活菌的数目,可选用滤膜法接种,取待测水样1mL加入无菌水
(3)将放有滤膜的平板置于适宜条件下培养,每隔12小时统计一次菌落数目、选取
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【推荐2】科学家从长期受到废弃油脂污染的淤泥中得到两种油脂降解菌A和B,现对两种油脂降解菌进行培养分析,请回答下列问题:
(1)科学家配置了含有NH4NO30.3%、KH2PO40.05%、K2HPO40.05%、MgSO40.02%、微量元素液和含废弃油脂等的培养基,从功能上来看,该培养基属于____________ 培养基,加入KH2PO40.05%和K2HPO40.05%的目的是________________________ 。
(2)如图所示,科学家称取了5g淤泥样品,将其加入45mL无菌水中,进行梯度稀释,在5个平板上分别接入0.1mL稀释液,经适当培养后,5个平板上的菌落数分别为155、175、150、41、160个,则1g淤泥中的活菌数约为____________ 个(保留小数点后两位)。用这种方法统计得到的数值往往____________ (填“偏大”或“偏小”)。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/3/22/2941786074972160/2943106512674816/STEM/0982888cfcc64b5594bc6f46e4b96a59.png?resizew=488)
(3)废弃油脂具有污染与资源两重性,A、B两种细菌在降解废弃油脂的同时还能获得高附加值的次生代谢产物鼠李糖脂。为评价A、B两种细菌的相关性能,对A、B两种细菌进行分别培养,得到如下结果。由图可知两种菌株在培养过程中都出现了____________ 型增长,且____________ 菌株更适合用于分解油脂。
(4)利用能降解废弃油脂的微生物降解废弃油脂时需要多步化学反应,因此在生产中常用____________ (填“固定化细胞”或“固定化酶”)技术,该技术多采用____________ 法固定化。
(1)科学家配置了含有NH4NO30.3%、KH2PO40.05%、K2HPO40.05%、MgSO40.02%、微量元素液和含废弃油脂等的培养基,从功能上来看,该培养基属于
(2)如图所示,科学家称取了5g淤泥样品,将其加入45mL无菌水中,进行梯度稀释,在5个平板上分别接入0.1mL稀释液,经适当培养后,5个平板上的菌落数分别为155、175、150、41、160个,则1g淤泥中的活菌数约为
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/3/22/2941786074972160/2943106512674816/STEM/0982888cfcc64b5594bc6f46e4b96a59.png?resizew=488)
(3)废弃油脂具有污染与资源两重性,A、B两种细菌在降解废弃油脂的同时还能获得高附加值的次生代谢产物鼠李糖脂。为评价A、B两种细菌的相关性能,对A、B两种细菌进行分别培养,得到如下结果。由图可知两种菌株在培养过程中都出现了
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/3/22/2941786074972160/2943106512674816/STEM/99ea6b4ae71f4f3d83f1bee10ddf7c61.png?resizew=357)
(4)利用能降解废弃油脂的微生物降解废弃油脂时需要多步化学反应,因此在生产中常用
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(0.65)
【推荐3】某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解,会对环境造成污染,只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基,甲的组分为无机盐、水和S,乙的组分为无机盐、水、S和Y。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/6/15/2743486961664000/2745166165344256/STEM/1c1c6f6b-6db8-470a-bfca-0489698a10cb.png)
回答下列问题:
(1)实验时,盛有水或培养基的摇瓶通常采用________ 的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______ 。甲、乙培养基均属于_______ 培养基。
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107 个/mL,若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_________ 倍。
(3)在步骤⑤的筛选过程中,发现当培养基中的S超过某一浓度时,某菌株对S的降解量反而下降,其原因可能是_________ (答出1点即可)。
(4)实验室培养微生物常用的接种方法除以上方法外还有__________ 。
(5)上述实验中,甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同,但都能为细菌的生长提供4类营养物质,即__________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/6/15/2743486961664000/2745166165344256/STEM/1c1c6f6b-6db8-470a-bfca-0489698a10cb.png)
回答下列问题:
(1)实验时,盛有水或培养基的摇瓶通常采用
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107 个/mL,若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,则至少应将摇瓶M中的菌液稀释
(3)在步骤⑤的筛选过程中,发现当培养基中的S超过某一浓度时,某菌株对S的降解量反而下降,其原因可能是
(4)实验室培养微生物常用的接种方法除以上方法外还有
(5)上述实验中,甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同,但都能为细菌的生长提供4类营养物质,即
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