【推荐1】如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，回答下列问题：
   
(1)质粒中氨苄青霉素抗性基因的化学本质是____________，其作用是___________。
(2)携带外源DNA片段的质粒进入细胞后，停留在细胞中进行____________或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行___________。
(3)若质粒DNA分子的切割末端为   ，则与之连接的目的基因切割末端应为___________。
(4)质粒DNA分子上有__________个限制酶切割位点，供外源DNA片段（基因）插入其中。依据复制与宿主菌相关程度不同，细菌中的质粒分松散型质粒和严谨型质粒。当宿主菌蛋白质合成停止时，严谨型质粒DNA复制随之停止，松散型质粒DNA复制仍可进行。通常选用松散型质粒作为基因工程载体，原因是____________。

【推荐2】下图四种质粒含有E₁和E₂两种限制酶的识别位点，Ap^r表示抗青霉素的抗性基因，Tc^r表示抗四环素的抗性基因。                                                            

（1）基因工程中使用的限制酶，其特点是____________________________________   。
（2）将两端用E₁切开的Tc^r 基因与用E₁切开的质粒X-1混合连接，连接后获得的质粒类型有______________（可多选）。
A．X-1             B.X-2                 C.X-3               D.X-4
（3）将上图所示四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养基上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有 ___________、____________。
（4）若将外源的Tc^r 基因两端用E₂切开，再与用E₂切开的X-1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含X-4的细胞数与含X-1的细胞数之比为1:3，增大DNA连接酶用量能否提高上述比值？ _______ ，原因是________________________________________。

【推荐3】重组人血小板生成素（rhTPO）是一种造血生长因子，如图是科学家培育乳汁中含有rhTPO的羊的相关过程。请回答下列相关问题。

（1）利用PCR技术对目的基因进行扩增时，利用的原理是__________。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学根据已知的rhTPO基因的核苷酸序列设计的两对引物如下图所示，其中引物对__________（填“A”或“B”）设计不合理，原因是__________。

引物对A	P1     GTCCGCTAGTGGCTGTG P2     AGCTGGCGTTTAGCCTG
引物对B	S1     AAGCCGGGCGCGCGGAA S2     TTCGGCCCGCGCGCCTT

（2）HindIII和XhoI两种限制酶切割出的黏性末端不同，将含有rhTPO基因的DNA片段和质粒都通过HindIII和XhoI切割，可以避免__________。拼接成重组质粒时，需要加入__________酶才能完成。rhTPO基因能否在羊受精卵细胞中稳定遗传的关键是__________。
（3）通常需要在胚胎移植前对早期胚胎进行性别鉴定，应从发育到__________时期的胚胎的__________中取样做DNA分析性别鉴定。
（4）为了使rhTPO基因只在羊乳腺细胞中表达，在构建基因表达载体时需要在rhTPO基因前端加上__________。移植的胚胎可以在受体母羊中存活的原因是__________。

【推荐1】下面是获得转基因抗虫棉的技术流程示意图。

请回答：
(1)A→B利用的技术称为______，其中②过程需要__________酶才能完成。
(2)图中将目的基因导入棉花细胞需要经过③过程，该过程为构建基因表达载体，其目的是_____________________________________________________________________。
(3)上述流程示意图中，将目的基因导入棉花细胞所采用的方法是__________法，该方法一般______(填“适宜”或“不适宜”)用于将目的基因导入单子叶植物。
(4)将目的基因导入植物细胞，除采用上图中的方法外，还可采用____________法和花粉管通道法。
(5)从F→G的过程利用的主要技术为______________，欲确定抗虫基因在G体内是否表达，在个体水平上需要做__________实验。如果抗虫基因导入成功，且与某条染色体的DNA整合起来，该转基因抗虫棉可视为杂合子，将该转基因抗虫棉自交一代，预计后代中抗虫植株占______。

【推荐2】农业上常用一定浓度的除草剂除去单子叶农作物中的双子叶杂草。农业科研人员将抗除草剂基因转入大豆，培育出抗除草剂大豆，培育过程中使用的质粒如图1所示，使用的含抗除草剂基因的DNA片段如图2所示，使用含抗除草剂基因的农杆菌对大豆细胞进行转化，并将该细胞培养成抗除草剂大豆幼苗的过程如图3所示。已知限制性内切核酸酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。请回答下列问题：

(1)质粒是独立于_____之外，具有自我复制能力的环状双链DNA分子。构建基因表达载体时，可以用限制酶_____（只写一种限制酶）切割质粒，用限制酶_____（只写一种限制酶）切割含目的基因的DNA片段，这样切割的缺陷是_____。
(2)将上述切开的质粒与抗除草剂基因混合，加入DNA连接酶连接后，导入大豆受体细胞（不考虑基因突变）。若将大豆受体细胞分别在含青霉素、四环素的培养基上培养，这些大豆受体细胞会出现都能生长，_____，_____三种情况。
(3)从个体生物学水平上，鉴定图3中转抗除草剂基因大豆幼苗是否抗除草剂的方法是_____。

【推荐3】以我国科学家为主的科研团队将OSNL（即4个基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的缩写）导入黑羽鸡胚成纤维细胞（CEFs），诱导其重编程为诱导多能干细胞（iPS），再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞（iPGCs），然后将iPGCs注射到孵化2.5天的白羽鸡胚血管中，最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代，实验流程如图。回答下列问题。

(1)培养CEFs获得iPS细胞时，需要定期更换培养液并通入CO₂的目的分别是________。
(2)CEFs是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的，为获得单细胞悬液，鸡胚组织剪碎后需用________处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加________等天然成分，以满足细胞对某些细胞因子的需求。
(3)体外获取OSNL的方法有________。（答出1种方法即可）若要在CEFs中表达外源基因的蛋白，需构建基因表达载体，载体中除含有目的基因和标记基因外，还须有启动子和________等。启动子是________识别和结合的部位，有了它才能驱动________。
(4)iPS细胞和iPGCs细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是________。
(5)该实验流程中用到的生物技术有________（答出2点即可）

【推荐1】自然条件下牛的繁殖率过低，严重制约养牛业的发展。目前人们利用胚胎工程来提高牛的繁殖率，常采用试管动物技术使普通雌性黄牛产下良种小牛。回答下列问题：
(1)试管动物技术选择的供体母牛和受体母牛的要求分别是_____、_____。
(2)实验操作过程中，常用激素对供体和受体母牛进行_____处理，使胚胎能正常着床。大量研究已经证明，受体对移入宫的外来胚胎基本上不发生_____反应，这为胚胎的存活提供了可能。
(3)体外受精时，从输卵管中冲取得到的成熟的卵子与_____精子在体外受精，形成受精卵，受精卵发育形成早期胚胎时，为补充合成培养基缺乏的物质，应在培养液中加入_____。
(4)最终产下的良种小牛的遗传物质与受体母牛的遗传物质_____（填“相同”或“不相同”），原因是_____。

【推荐2】2017年引起世界轰动的克隆猴在中国诞生。科研人员提取了一个流产的雌性猕猴胎儿的部分体细胞，将其细胞核“植入”若干个“摘除”了细胞核的卵母细胞，经过一系列技术操作，先后得到了“华华”和“中中”两只长得几乎一模一样的猕猴。请回答下列问题。
（1）在培养提取细胞的过程中，为保证培养的细胞处于无菌无毒的环境中，通常采取的措施是________________。在核移植过程中通常选用10代以内的细胞作为供体细胞，原因是________________。
（2）采集的卵母细胞需培养至________________（时期）：对卵母细胞摘除“细胞核”，目前普遍采用的方法是________________。
（3）供体细胞注入去核卵母细胞后，经________________使两细胞融合，构建重组胚胎。重组胚胎通过胚胎移植在代孕母猴体内存活，其生理学基础是________________________ 。
（4）随着“华华”和“中中”的生长发育，他们的性状________________（填“是”“不是”或“不一定”）完全相同，理由是___________________________________________。

【推荐3】传统医药实验常以小鼠为研究对象，但因其与人类遗传背景相差较远，而存在诸多弊端。2018年中国科研团队利用一只流产的雌性猕猴胚胎的成纤维细胞经克隆得到一对克隆猴“姐妹花”，她们的诞生具有重大意义以下相关叙述错误的是（       ）

A．以小鼠为模型选出的候选药物用于人类患者时，可能无效或有严重的副作用

B．克隆猴与人类遗传背景更接近，以其为模型研发药物可有效缩短药物研发进程

C．这对“姐妹花”是经无性繁殖产生

D．克隆这对猕猴时利用的体细胞核移植技术比胚胎细胞核移植技术更容易成功

【推荐1】2018年1月25日，我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物-食蟹猴，流程如图所示，①~⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。

请分析回答:
(1)动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是___，去掉卵母细胞细胞核的目的是____。
(2)图中过程⑤用到胚胎移植技术，其实质是早期胚胎在___条件下空间位置的转移。
(3)研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如下图所示。分析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是______。

(4)假如用胚胎分割移植的方式来克隆食蟹猴，依据的原理是___，胚胎分割时应注意的问题是___。

【推荐2】下图是科学家培养转基因试管牛的过程示意图，据图回答问题：

(1)过程①通常用____________处理，可达到促使动物超数排卵的目的。过程②将目的基因导入受精卵的方法是____________。转基因牛的生产的过程中，DNA重组技术的基本操作需要用到的工具酶有_____________。基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心步骤是____________。
(2)图中1是____________，2是____________，3是_____________。
(3)进行过程③时，受体应处于适合的生理状态，可事先用激素对供体和受体进行____________处理。

【推荐3】人类疾病的转基因生物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选｡利用正常大鼠（2n）制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示（注：基因B为高血压相关基因）｡回答下列问题：

（1）在上述转基因大鼠的培育过程中，涉及的现代生物技术有______________（写出三项）｡转基因大鼠的胚胎在代孕母体内能够存活的生理学基础是_____________。若想充分利用早期胚胎获得多个相同的转基因大鼠，还需采用_____________技术。
（2）若从基因文库中获得基因B，则从_____________文库中获取的基因有启动子，启动子的功能是__________________________。
（3）为检测B基因是否导入受精卵中，可采用_____________技术｡如果要建立高血压转基因动物模型，就要检测高血压相关基因是否已成功表达，在个体水平上大鼠出现_____________症状，则证明相关基因已成功表达｡