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题型:非选择题-实验题 难度:0.65 引用次数:267 题号:14888395
S蛋白是新冠病毒(SARS-COV-2)感染机体的关键组分,也是研制新冠疫苗的关键起点。两种针对新冠病毒疫苗的操作过程如下:
I.基因工程疫苗:S蛋白基因→基因表达载体→大肠杆菌→S蛋白→人体
Ⅱ.腺病毒载体重组疫苗:蛋白基因→上呼吸道腺病毒基因表达载体→人体
(1)已知S蛋白的氨基酸序列,采用___________方法得到S蛋白基因,并采用PCR技术扩增S蛋白基因。采用该方法得到的S蛋白基因碱基排列顺序可以有多种,理由是___________
(2)S蛋白的基因表达载体的组成除了启动子、S蛋白基因和终止子之外,还需具有的结构是___________,其作用是___________
(3)生产基因工程疫苗时,基因表达载体中目的基因的首端必须含有使其仅能在大肠杆菌细胞中特异性表达的___________。当其与___________识别和结合,才能驱动转录过程,最终翻译成功。
(4)生产腺病毒载体重组疫苗时,利用缺失E1基因的腺病毒(E1基因是腺病毒基因组复制的关键基因)来制备的疫苗的优点是___________

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非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
名校
【推荐1】回答下列有关基因工程的问题。苜蓿俗称金花菜,上海人称草头,营养价值很高。但是病菌往往威胁着苜蓿的生长。为提高产量,研究人员将溶菌酶基因(LYZ基因)与Ti-质粒重组,通过农杆菌介导,成功获得了抗病苜蓿。(过程如下图一所示),请回答下列有关问题:

(1)图示基因工程中为了目的基因能与Ti-质粒重组,步骤③应选取限制酶________切割目的基因。
(2)若选用上题中的限制酶切割目的基因,则形成的重组DNA可被下列哪些限制酶识别并酶切________。
A.BamHⅠB.HindⅢC.BclⅠ
(3)步骤④是筛选含目的基因的农杆菌,具体操作为配制分别含氨苄青霉素、新霉素的培养基甲、乙,通过稀释平板涂布法将农杆菌接种到甲培养基中培养,一段时间后,利用“影印法”把甲培养基的菌落接种到乙培养基的相同位置培养,比较甲、乙培养基上的菌落数量和位置。试在下图二中圈出含目的基因的农杆菌菌落。

(4)下列有关基因工程中运载体的描述,正确的是________。
A.能够在受体细胞中复制并稳定保存是运载体的必备条件之一
B.一种运载体只能运载一种目的基因
C.基因工程中使用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等
D.质粒的复制可以在受体细胞外完成
(5)依据所学知识,比较农杆菌和苜蓿细胞并填写下表:(填“有”或“无”)
染色体RNA核膜细胞壁
农杆菌
苜蓿细胞

________;②________;③________;④________;⑤________;⑥________;⑦________;⑧________
2022-10-07更新 | 67次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐2】大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X- gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。右图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题:

(1)作为受体大肠杆菌应___________以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,并加入__________________
(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入____________________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果
______________________________________________________________________
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2016-11-26更新 | 138次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
名校
【推荐3】巴斯德毕赤酵母菌是一种甲醇营养型酵母,能以甲醇作为唯一碳源。启动子(5′AOX1)可在甲醇的诱导下,使外源基因在该种毕赤酵母菌中得到高效表达。现拟利用此酵母菌生产人胰岛素,请分析并回答下列问题:
(1)由于5′AOX1的首端及其上游碱基序列未知,因此在利用PCR技术扩增5′AOX1之前,进行了下图所示的处理,据图回答:①过程使用的两种酶是___________,②过程利用___________(填“酶1”或“酶2”)完成。若用酶1和酶2同时切割片段2和片段3并将其产物分别进行电泳,得到的条带___________(填“相同”或“不相同”)。

(2)引物的作用是___________。片段3经过三轮复制后,产生的8个双链DNA片段有___________种。
(3)基因表达载体中,5′AOX1应位于人胰岛素基因的___________,是___________识别与结合的部位。为使人胰岛素基因在毕赤酵母菌中高效表达,培养基中应添加诱导物___________
2022-05-29更新 | 288次组卷
共计 平均难度:一般