流感是由流感病毒引起的传染病,接种疫苗是预防流感的有效手段。科研工作者研究如何利用流感病毒血凝素(HA)基因制作mRNA疫苗。请回答问题:
(1)流感病毒是RNA病毒,需要先通过__________ 得到cDNA,再经__________ 获取HA基因的DNA序列。
(2)为研究非编码序列UTRs(
和
)对基因表达的影响,研究者设计了nl、n2、n3三种UTRs,再加入增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因和多个酶切位点,组成DNA片段M,用限制酶__________ 分别处理M和质粒G,构建下图所示的重组质粒。
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(3)将重组质粒导入细菌,大量扩增后,提取质粒,利用Xho I单酶切获得线性DNA,体外条件下加入__________ 作为原料,合成mRNA,经处理后,与含有某种癌细胞的培养液混合一段时间后,用流式细胞仪检测分析各组EGFP阳性细胞率,结果如下图。
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据结果推测,可以采用n3作为疫苗实际生产中的UTRs,理由是__________ .
(4)用HA基因的DNA序列替换EGFP基因,构建重组质粒,重复(3)的操作和,提取蛋白质进行电泳分离并检测。若__________ 含量最高,则与(3)的推测相符。
(5)mRNA疫苗进入人体细胞内,其翻译产物将被呈递给不同T细胞,引起机体产生__________(选填下列字母)反应,从而达到预防流感的效果。
(1)流感病毒是RNA病毒,需要先通过
(2)为研究非编码序列UTRs(
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(3)将重组质粒导入细菌,大量扩增后,提取质粒,利用Xho I单酶切获得线性DNA,体外条件下加入
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据结果推测,可以采用n3作为疫苗实际生产中的UTRs,理由是
(4)用HA基因的DNA序列替换EGFP基因,构建重组质粒,重复(3)的操作和,提取蛋白质进行电泳分离并检测。若
(5)mRNA疫苗进入人体细胞内,其翻译产物将被呈递给不同T细胞,引起机体产生__________(选填下列字母)反应,从而达到预防流感的效果。
A.细胞免疫 | B.体液免疫 |
更新时间:2022-02-02 11:19:50
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【推荐1】肾上腺位于肾脏的上方,是人体重要的内分泌腺,分为皮质和髓质两部分。回答下列问题:
(1)当机体遭遇紧急情况,如寒冷时,通过传入神经纤维将有关信息传到下丘脑及大脑皮层,进而使______ (“交感神经”或“副交感神经”)兴奋,释放______ 作用于肾上腺髓质,促使其分泌肾上腺素,该调节过程为______ (A.神经调节B.体液调节C.神经-体液调节)。肾上腺素可与皮肤血管上的______ 结合,使皮肤血管______ 以减少机体散热。
(2)实验发现,切除双侧肾上腺的动物很快就死亡,若能及时补充肾上腺皮质激素则能维持生命,这说明______ 。糖皮质激素能抑制淋巴细胞分裂、促进淋巴细胞凋亡,致使淋巴结和胸腺萎缩,故在器官移植中可以利用糖皮质激素的这种特性抑制______ 。
(3)糖皮质激素的分泌受______ 调控轴的调节,当机体内糖皮质激素浓度超过一定范围时,可通过反馈作用抑制______ 的活动,从而维持血液中糖皮质激素含量的稳态。临床上长期大剂量使用糖皮质激素后突然停药,会因糖皮质激素骤减而出现急性肾上腺皮质功能减退,这是由于______ 。
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【推荐2】新型冠状病毒(SARS-CoV-2)会侵染人呼吸道上皮细胞引起呼吸道感染。图1是SARS-CoV-2结构示意图,SARS-CoV-2侵染宿主细胞进行增殖的过程如图2所示。回答下列问题:
(1)SARS-CoV-2的主要化学成分包括蛋白质、______ 和______ 。由图2可知,该病毒的刺突蛋白S与宿主细胞表面的______ 发生特异性结合,从而侵入宿主细胞。
(2)SARS-CoV-2的遗传物质为+RNA,进入宿主细胞后,+RNA还具有两方面的作用,分别是翻译产生病毒蛋白和______ 。
(3)进入机体的SARS-CoV-2会被______ (答出2种)等抗原呈递细胞摄取、处理,抗原呈递细胞会将抗原传递给______ ,促进其分泌细胞因子。
(4)针对SARS-CoV-2的S蛋白研发疫苗是预防SARS-CoV-2感染的主要手段。利用生物工程技术生产S蛋白,将该蛋白注射到人体内可对该病毒进行免疫预防,其原理是______ 。
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【推荐3】S蛋白是新冠病毒(单链RNA病毒)感染机体的关键组分,也是研制新冠疫苗的关键起点。我国科学家以缺失E1基因(E1基因是腺病毒基因组复制的关键基因)等的人复制缺陷腺病毒为载体研制新冠疫苗的部分流程如图所示,其中HEK细胞是一种特殊的人胚胎肾细胞。回答下列问题:___ 。将图中质粒导入HEK细胞常用的方法是___ 。质粒Ⅰ和质粒Ⅱ可在相关酶的作用下获得含S蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒,该过程主要利用了___ 的生物学原理。
(2)HEK细胞在体外培养时,所需的气体环境为___ 。为防止HEK细胞在培养时受到外界环境的污染,可采用___ (答出2点)等措施。
(3)新冠病毒易发生基因突变,原因是___ 。该疫苗对变异后的该病毒仍具有免疫作用,原因可能是___ 。
(2)HEK细胞在体外培养时,所需的气体环境为
(3)新冠病毒易发生基因突变,原因是
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【推荐1】基因工程的相关技术可用于病毒检测,也可用于制备疫苗。利用荧光PCR技术检测是否感染某种RNA病毒时,基本操作流程为:提取病毒的RNA→荧光PCR扩增反转录DNA→荧光检测。请回答下列问题:
(1)分离病毒的RNA通常在冰浴条件下进行,目的是抑制________________ 的活性,防止病毒的RNA降解。荧光PCR反应体系中需要加入的酶和原料是________________ 。为保证反应体系只扩增病毒特异性核酸序列,应先根据病毒的特异性核酸序列设计________________ 。
(2)荧光染料能掺入DNA双链中发出荧光,在游离状态下不发出荧光。若检测到荧光量达到某个临界值,则代表阳性,说明________________________________ 。若检测出现“假阴性”现象,原因可能是________________________________ 。
(3)某病毒的E蛋白和P蛋白会引起机体产生特异性免疫反应。构建重组活病毒载体疫苗时,获取某病毒的________________ 插入腺病毒的基因组中。通过重组腺病毒感染动物可使其获得免疫力,原因是________________________________________________ 。
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【推荐2】害虫损伤番茄的叶片后,叶片细胞的细胞壁能释放出一种类激素物质,这种物质可以扩散到番茄的其他部位,诱导细胞内蛋白酶抑制剂基因表达,合成蛋白酶抑制剂,导致害虫不能消化食物而死亡。科学家利用转基因技术把番茄的蛋白酶抑制剂基因转移到玉米中,玉米获得了与番茄相似的抗虫性状,有效抵御了玉米螟对玉米的危害。
(1)转移了番茄蛋白酶抑制剂基因的玉米合成番茄蛋白酶抑制剂的具体部位是_____ ,合成的化合物还需要在内质网、高尔基体中加工才具有生物活性。
(2)这种抗玉米螟玉米品种的培育技术属于转基因技术,这种变异的原理为_____ 。
(3)有人认为在种植了这种转基因玉米的农田中的杂草不会出现抗玉米螟性状,分析可能的原因是_____ ,玉米的花粉不能传递给杂草。
(4)抗玉米螟玉米具有显著的生态效应,该项科技成果在环境保护上的重要作用是_____ 。
(5)有人对食用该玉米的安全性表示担忧,你认为这种担忧的理由是_____ 。
(6)叶绿体基因工程的核心是构建基因表达载体,表达载体中除目的基因外,还必须有启动子、终止子、复制原点、_____ 等。启动子的作用是_____ 。
(7)检测目的基因是否成功导入受体细胞的叶绿体时,实验组以待测的样本DNA为模板,使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增,同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组,将以_____ 为模板的组别作为阴性对照组。若_____ ,则说明目的基因导入成功。
(8)转入叶绿体中的基因_____ (填“会”或“不会”)随花粉传递给子代,理由是_____ 。
(1)转移了番茄蛋白酶抑制剂基因的玉米合成番茄蛋白酶抑制剂的具体部位是
(2)这种抗玉米螟玉米品种的培育技术属于转基因技术,这种变异的原理为
(3)有人认为在种植了这种转基因玉米的农田中的杂草不会出现抗玉米螟性状,分析可能的原因是
(4)抗玉米螟玉米具有显著的生态效应,该项科技成果在环境保护上的重要作用是
(5)有人对食用该玉米的安全性表示担忧,你认为这种担忧的理由是
(6)叶绿体基因工程的核心是构建基因表达载体,表达载体中除目的基因外,还必须有启动子、终止子、复制原点、
(7)检测目的基因是否成功导入受体细胞的叶绿体时,实验组以待测的样本DNA为模板,使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增,同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组,将以
(8)转入叶绿体中的基因
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名校
【推荐3】ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术(原理见图1)可以抑制这两个基因的表达,从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点,下图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。请回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/9/21/14cb8048-820b-41d2-8f26-911994383e52.png?resizew=743)
(1)图 2 中的2A11为特异性启动子,是__________________ 识别和结合的部位,进而可驱动基因的转录,则该2A11应在番茄的_________ (器官)中启动基因的转录。
(2)从番茄成熟果实中提取RNA为模板,在_________ 酶的作用下合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因。
(3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,用限制酶_______________ 对上述两个基因进行酶切,使_____________ 键断开,再利用_______________ 将其串联成融合基因,相应的Ti质粒应用限制酶__________________ 进行切割,确保融合基因能够插入载体中。
(4)为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因反向插入在启动子2A11的下游,即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后,接种在含有_________________ 的培养基中,可筛选出含有反义融合基因的农杆菌,经克隆化培养后,再利用________________ 法获得转基因番茄。
(5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,_____ (填“能”或“不能”)用标记的ACC氧化(合成)酶基因片段做探针进行检测。
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(1)图 2 中的2A11为特异性启动子,是
(2)从番茄成熟果实中提取RNA为模板,在
(3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,用限制酶
(4)为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因反向插入在启动子2A11的下游,即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后,接种在含有
(5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,
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