【推荐1】Ⅰ.泡菜传统自然发酵方式的发酵周期相对较长，生产效率低。研究人员欲从泡菜中分离筛选出高产酸乳酸菌，为泡菜工厂化生产提供依据。请分析并回答下列问题：
(1)配制CaCO₃-MRS培养基。成分：蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、磷酸氢二钾、葡萄糖、琼脂粉、碳酸钙等。
①根据物理性质分类，该培养基属于______培养基。
②培养过程中，乳酸菌产生乳酸溶解碳酸钙，形成溶钙圈，便于______。
(2)高产乳酸菌的培养与分离。其部分实验目的与具体操作如下所示请完成下表。

实验目的	简要操作过程
梯度稀释	在无菌条件下取样品中泡菜汁1mL，加入①______进行10倍梯度稀释，依次得到10-5、10-6、10-7的稀释液。
接种培养	取上述稀释液1mL分别加入无菌培养皿中，然后将CaCO2-MRS培养基浇注混匀冷凝后，将培养皿倒置，并连续培养48h。
分离纯化	挑取有明显溶钙圈的单菌落进行平板划线培养。
长期保存	将菌种加入30%的______中在-20℃保存。

(3)高产酸乳酸菌的鉴定。提取筛选乳酸菌的DNA，通常采用16SrDNA（编码rRNA对应的DNA序列）的通用引物进行PCR扩增并测序鉴定。以16SrDNA作为细菌分类依据的原因是不同菌属的16SrDNA具有______。
Ⅱ.木质林产品（HWP）是指从森林中采伐的，用于生产诸如家具等的木质材料，是缓解温室效应的重要碳库。请分析并回答下列问题：
(4)图2为森林及HWP的碳储或碳排放随时间变化关系示意图。

①某些HWP可以替代部分非木质材料，从而减少这些材料在加工及使用过程中的能源消耗及CO₂的排放。这种替代减排效应与HWP的使用时间呈______（填“正”或“负”）相关的关系。
②研究发现，自t时刻砍伐森林至HWP形成，大气中的CO₂量出现不降反升现象。造成这种现象的原因可能有______。
A.森林砍伐剩余物的腐烂会导致碳的释放量增加       B.演替而来的次生林碳汇效应低于砍伐前的森林
C.木材的运输和加工等过程需要化石燃料的供能       D.HWP中的细胞能进行呼吸作用产生二氧化碳
③从图2中可看出，上述现象完全消除的时刻为______。

【推荐2】2015年“二孩政策”、“巴黎气候变化大会”所倡导的“低碳生活、减少环境污染”获得人们普遍认同。请回答下列问题：
（1）人口的数量常常随着环境资源、社会发展等因素的改变而发生波动。最新预测我国60岁以上的人口在总人口中的比重如下表：

2020年	2030年	2040年	2050年
16.6%	23.3%	26.5%	28.7%

表中数据说明我国人口呈现____的特点，这将严重影响劳动力来源，导致经济衰退和加重养老负担，因此我国适时放开“二孩”政策。

（2）2015年全球多数国家气温监测显示：年平均气温较往年持续升高。如图是与温室气体有关的循环示意图。
①图中B代表生态系统组成成分中的____________；a代表的主要生理过程是______________。
②在物质循环的过程中，同时伴随着____。若生产者有2 500 kg，位于第三营养级的生物最多可增重_________________________。
③温室效应是由于以__________为主的温室气体增多，打破了生物圈中__________的平衡；为了减少温室气体的含量，有效措施之一是加大图中_____________的途径（用箭头和图中字母表示），也可开发太阳能、水能、核能等新能源，减少人类对燃烧煤炭、石油等化石燃料的依赖。

【推荐3】如图表示生态系统的功能，图中字母代表生态系统的成分，序号代表相应的过程，请回答有关问题：

（1）若此图表示生态系统的能量流动， B、C、D的能量总和 _________(填“大于”、“小于”或“等于”)生产者所固定的太阳能。
（2）若此图表示生态系统的碳循环，则碳在①中存在的形式是__________，图中⑤、⑥、⑦、⑬、⑭过程为____________。
（3）除上述两种功能外，生态系统还存在___________功能。
（4）若生物甲、乙、丙构成了如图所示的食物网，已知丙从乙处获得能量的比例为25％，要使丙同化的能量增加10kJ，则至少需要甲提供的能量为____________kJ。

【推荐2】类黄酮是花粉发育过程中的重要物质，苯基苯乙烯酮合成酶（CAS）是其生物合成的关键酶。科研人员将CAS基因和CaMV35S启动子融合组成反义CAS基因（反义基因是通过原基因反向连接而成的，其转录出的RNA能与原基因转录出的mRNA互补配对），并在矮牵牛花中表达，阻止了花粉的正常发育，得到雄性不育的矮牵牛植株。构建的反义CAS基因的结构如图所示。回答下列问题：

(1)实验室常利用__________技术扩增CAS基因，扩增CAS基因的前提是要有__________，以便合成引物。
(2)可用农杆菌转化法将重组质粒导入矮牵牛植株，构建重组质粒时，要将反义CAS基因插入Ti质粒的__________上。为了提高转化效率，可将矮牵牛花的种子在胚芽处割伤，并加入__________物质，该物质的作用是__________。
(3)与正常植株相比，雄性不育植株在作物育种方面的优势是__________。实验小组欲在个体水平上检测转基因不育植株是否培育成功，将矮牵牛花单独种植（自交），若矮牵牛花单独种植时__________（填“不结实”或“能结实”），人工授粉后__________（填“不结实”或“能结实”），则说明转基因植株培育成功。

【推荐3】近年来烟草叶绿体基因工程在提高作物光合效率、抗性和品质等方面取得了研究进展。如图是将拟南芥果糖1，6—二磷酸醛缩酶基因（简称“醛缩酶基因”）转入烟草叶绿体基因组的部分流程示意图。回答下列问题：

(1)在PCR技术中使模板DNA解聚为单链的条件是____________。图1中，利用PCR技术扩增拟南芥醛缩酶基因时，应选用的引物对是___________。
(2)图2重组质粒中未标注出的必需元件还有___________，构建该重组质粒用的限制性核酸内切酶是___________。
(3)将拟南芥醛缩酶基因导入烟草叶绿体基因组时，一般将含有目的基因的质粒包裹在金粉上，通过轰击进入叶绿体中，这种方法称为___________。叶绿体基因组中存在基因区和基因间隔区，在操作时应将目的基因导入叶绿体基因组中的基因间隔区，其目的是___________。检测目的基因是否成功导入受体细胞的方法是___________技术。

【推荐2】绿色荧光蛋白（GFP）能在荧光的激发下发出绿色荧光，该特性可用于检测细胞中目的基因的表达。核基因RNZ编码的核糖核酸酶能催化tRNA的加工，叶绿体中也含有该种酶。为研究叶绿体中的核糖核酸酶是否由核基因RNZ控制合成，科研人员将核基因RNZ与GFP基因连接形成RNZ-GFP融合基因，该融合基因编码的蛋白质同时具有两种蛋白的特性。
（1）将RNZ-GFP融合基因和质粒在_____酶作用下构建成RNZ-GFP融合基因表达载体，利用该基因表达载体可实现对水稻细胞的_____。
（2）RNZ-GFP融合基因表达载体的受体细胞最好选择水稻幼苗的_____（填分生区或成熟区）细胞，原因是_____。将导入RNZ—GFP融合基因的水稻细胞培养成完整植株时需要的条件有_____（答出两点即可）。
（3）用适宜波长的荧光照射叶绿体，叶绿体会发出红色荧光。用荧光照射转基因水稻细胞，若观察到_________，即可证明分布在叶绿体中的核糖核酸酶是由核基因RNZ控制合成的。为了使实验结果更严谨，本实验还应将_____导入到生理状况相同的水稻幼苗细胞作为对照，观察到的现象是_____。

【推荐3】鸡干抗素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①-④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：

(1)步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是_____________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了______________和_____________序列，以便于后续的剪切和连接。
(2)步骤②所构建的基因表达载体中末标注出的必需元件还有_______________________，步骤③中需先用__________________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过逆转录获得DNA，再通过PCR扩增制备探针，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是_________________________。
(4)用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验，接种后第19天对照组植株进入病情指数(植物受病毒侵染的严重程度)为100的平台期，而转基因植株在第______天才进入平台期，但此时的病情指数为79，说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性，但抗性较低，可能的原因有_______________________________。

【推荐1】虾味酱油是一种原料纯天然、风味独特又有多种保健功效的酱油，其制作流程如下图所示。

(1)制曲前，大豆需要高温蒸煮并冷却，冷却的目的是_______。
(2)制曲时，将米曲霉_____于大豆中，使米曲霉充分生长繁殖。在制曲容器内，上层的米曲霉数量比底层的多，说明米曲霉的代谢类型是______。
(3)待米曲霉达到一定数量后，豆曲中加入适量食盐水。食盐水的作用主要是_____。
(4)发酵过程中，米曲霉会将大豆中的葡萄糖彻底氧化分解，为其生命活动提供______，同时也可将大豆中的蛋白质分解成_____，从而产生独特风味。

【推荐2】“珠三角是中国酿造酱油的大本营”，酱油作为一种深受人民大众欢迎的传统饮食调味品，工艺流程为：原料→制曲→发酵（添加高浓度食盐）→生酱油→配制→澄清→包装→成品，发酵过程的生理指标变化如表所示：

发酵天数（d）	氨基酸等含氮物质（g/100mL）	酸类物质（g/100mL）	糖类物质（g/100mL）	还原糖（g/100mL）	色度	pH
1	1.25	2.16	6.16	5.09	0.99	5.70
5	1.28	2.27	7.53	6.85	1.22	5.36
8	1.47	2.31	6.81	6.53	1.35	5.37
10	1.65	2.34	7.96	6.94	1.53	5.39
13	1.73	2.48	7.90	7.24	1.78	5.28
15	1.84	2.56	7.85	7.74	2.05	5.12

(1)制曲是酱油生产过程中的关键阶段之一，制曲阶段的变化主要是依靠微生物米曲霉分泌大量的酶，如 _________（至少答2种）等，并利用这些酶分解原料。在制曲容器内上层的米曲霉数量比底层的多，说明米曲霉的代谢类型是_________________________。
(2)据表分析，多种微生物及其酶系相互作用有利于 __________，使酱油具有独特的风味和营养价值。 酱油发酵过程中发酵池的底部随着时间的延长，酒味愈浓，产生酒精的反应式为___________________________。
(3)结合工艺流程及表中数据分析，酱油发酵过程中不易受到杂菌污染，原因是 ______________。
(4)黄曲霉毒素是由黄曲霉菌产生的具有强烈致癌作用的物质，酿制酱油的整个生产过程都有污染的可能，请结合你所学知识，提出两条控制酿造酱油被黄曲霉毒素污染的措施：________。

【推荐3】木质纤维素是地球上最为丰富的可再生资源。中国科学家利用基因工程的方法构建了嗜热厌氧杆菌H，以花生壳、玉米芯等为原料发酵生产生物燃料乙醇，以期提高农业废弃物的整体利用价值。据此回答下列问题：
(1)研究者将取样器放入温泉底部取样，利用厌氧技术将样品稀释液接种到以纤维素为__________的选择培养基中，在适宜条件下培养一段时间，加入刚果红后，出现__________的即为初步筛选所得的降解纤维素的嗜热厌氧杆菌菌落。
(2)基于嗜热厌氧杆菌的特殊代谢能力（图a），研究人员构建了双功能醇醛脱氢酶基因（Adh）的过量表达载体，图b为构建表达载体时所需的关键条件。
   
①为保证双功能醇醛脱氢酶基因（Adh）能通过双酶切以正确方向插入质粒，需设计引物1和引物2，其中引物1包含图b中限制酶___________的识别序列，且该序列位于引物1的__________（填“5’端”或“3’端”）。
②将重组表达载体导入嗜热厌氧杆菌，然后置于含有__________的选择培养基中进行筛选，经鉴定及扩大培养得到工程菌H。
(3)将构建的工程菌H进行摇瓶发酵，结果发现乙醇产量提高，副产物乙酸产量下降。结合其代谢途径，分析出现这种结果的原因__________。
(4)嗜热厌氧杆菌最适生长温度为55～75℃，产物乙醇在温度超过50℃即可快速蒸馏出。相对于传统的发酵菌株，利用嗜热厌氧杆菌发酵产乙醇主要的优势有__________（写出两点即可）。