为保障公共健康,需要定期对公共饮用水进行卫生检测。居于大肠中的各种细菌统称为大肠菌群。一般用大肠菌群作为水体受粪便污染的指示菌,饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠菌群(或者1000mL饮用水中不超过3个大肠杆菌)。若要确定饮用水是否合格,可采用膜过滤法检测饮用水中的大肠菌群,过程如下图所示:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/7/13/4719e3bb-3eaf-4254-b6ab-6b20ab90c34f.png?resizew=432)
(1)大肠杆菌在人体肠道内生存时,可发酵多种糖类产酸、产气,随粪便排出后在水体中存活时间比其他病原微生物略长,摇床振荡培养更利于其快速繁殖。据此推断,大肠杆菌代谢类型为________。
(2)检测前需要进行灭菌处理的材料用具有________ (选择字母代号填写);它们均可以采用________ 法灭菌。
a.水样收集瓶b.滤膜c.培养基d.镊子e.水样
(3)完成过滤后需将滤膜的________ (A面/B面)接触配置好的培养基,此过程在微生物实验操作中称为________ 。
(4)不用稀释涂布平板法检测饮用水中的大肠菌群的原因是________ ;用上图方法观察样本菌落时是否需要设置对照组?______ 。为什么?__________ 。
(5)KONFIRM培养基可以检测大肠杆菌的存在。KONFIRM中含有ONPG和MUG可作碳源,色氨酸可作为氮源。在检测大肠菌群时,检测指标如下表所示。
(注:出现上述颜色变化为阳性,未现上述颜色变化为阴性)
结合表中内容分析,若上述检测结果为________ (选择字母代号填写),则可以确定待测菌为大肠杆菌。
a.ONPG检测和吲哚检测为阳性,MUG检测为阴性 b.吲哚检测为阳性,ONPG检测和MUG检测为阴性c.ONPG检测、MUG检测、吲哚检测均为阴性 d.ONPG检测、MUG检测、吲哚检测均为阳性
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(1)大肠杆菌在人体肠道内生存时,可发酵多种糖类产酸、产气,随粪便排出后在水体中存活时间比其他病原微生物略长,摇床振荡培养更利于其快速繁殖。据此推断,大肠杆菌代谢类型为________。
A.自养需氧型 | B.异养厌氧型 | C.异养兼性厌氧型 | D.自养厌氧型 |
a.水样收集瓶b.滤膜c.培养基d.镊子e.水样
(3)完成过滤后需将滤膜的
(4)不用稀释涂布平板法检测饮用水中的大肠菌群的原因是
(5)KONFIRM培养基可以检测大肠杆菌的存在。KONFIRM中含有ONPG和MUG可作碳源,色氨酸可作为氮源。在检测大肠菌群时,检测指标如下表所示。
菌群 | 检测项目及原理 |
大肠菌群(有β-半乳糖苷酶) | ONPG检测:β-半乳糖苷酶水解无色的ONPG为黄色物质 |
肠杆菌群(降解色氨酸为吲哚) | 吲哚检测:吲哚可与特定显影剂显为绿色 |
大肠杆菌(有β-葡糖醛酸酶) | MUG检测:β-葡糖醛酸酶降解 MUG为具有荧光的物质 |
(注:出现上述颜色变化为阳性,未现上述颜色变化为阴性)
结合表中内容分析,若上述检测结果为
a.ONPG检测和吲哚检测为阳性,MUG检测为阴性 b.吲哚检测为阳性,ONPG检测和MUG检测为阴性c.ONPG检测、MUG检测、吲哚检测均为阴性 d.ONPG检测、MUG检测、吲哚检测均为阳性
更新时间:2022-07-10 08:24:31
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【推荐1】土壤残留农药中的3,4-二甲苯酚具有致癌、致畸和致突变作用,研究发现有一种极毛杆菌能分解土壤中3,4-二甲苯酚。回答下列问题:
(1)某兴趣小组欲从土壤中筛选出能高效降解3,4-二甲苯酚的极毛杆菌菌株,则该土壤首先应满足的条件是______ 的含量要高。在配制筛选极毛杆菌的培养基时,应以3,4-二甲苯酚为唯一碳源,原因是______ 。在实验室一般采用______ 法对配制的培养基进行灭菌。
(2)分离纯化极毛杆菌菌种时,发现划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成第二划线区域无菌落的操作失误可能是______ 。仔细观察平板上长出的菌落,发现形态、大小和颜色不完全相同,这说明______ 。
(3)为了统计土壤浸出液中极毛杆菌的总数,他们选用104、105、106稀释倍数的稀释液进行涂布,每种稀释液都设置了3个培养皿。为了保证实验的准确性,还应设置的一组对照实验是______ 。
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【推荐2】在某地的农业生产中,为提高生产效率,广泛使用的除草剂莠去津(C8H14CLN5)。已知该除草剂是一种有机物,在水中溶解度低,有毒;且在土壤中不易被降解,长期使用会导致土壤被污染。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下图程序选育能降解该除草剂的细菌A。________ 环境里寻找目的菌细菌A。根据细菌A对营养物质的需求,培养基的配方为莠去津、磷酸盐、镁盐以及微量元素、水、碳源等,配制图中步骤Ⅱ的培养基时,通常需加入____ ;莠去津在筛选目的菌的作用是____________ 。
(2)接种前需要对培养基及培养皿等进行灭菌,对培养皿进行灭菌的方法__________ 。
(3)上图II中对细菌A接种的方法是___________ 。若对细菌A菌落进行计数,需采用________________ 接种,该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数少,原因是______________
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【推荐3】 油菜籽中有一种有机化合物L-5-乙基呃唑烷一硫酮(VOT),可诱发甲状腺疾病。研究发现反刍动物瘤胃中的部分细菌可以分解VOT,下图是研究人员从瘤胃提取物中分离VOT分解菌的流程。请据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/8/5/3038005142503424/3038149652692992/STEM/19b4bbf7883149e398081a5aad32c85d.png?resizew=492)
(1)在配制菌悬液时,需将瘤胃提取物加入_____________ 进行配制。
(2)图中①过程使用的接种工具是____________ ,除图示方法外,还可以用________________ 法获得纯培养物。
(3)培养基甲为微生物提供的营养成分,除氮源外还有__________ 。氮源进入细胞后,可参与合成的多聚体有___________________ (答出两点即可)。
(4)从培养基功能分析,甲、乙均为选择培养基,其能选择VOT分解菌的原因是_____ 。甲中的细菌比乙中的生长速度快,原因是____________ 。
(5)图中乙在培养时,培养皿的放置方式如图_________ (填“a”或“b”)。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/8/5/3038005142503424/3038149652692992/STEM/45bdbef99074466cb27b99e924b89cb0.png?resizew=245)
(6)实验中初步估测甲瓶中细菌数为3×106个/mL,若要在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过300个,则至少应将甲瓶的菌液稀释_____ 倍。
(7)使用后的培养基丢弃前一定要进行____________________ 处理,以免污染环境。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/8/5/3038005142503424/3038149652692992/STEM/19b4bbf7883149e398081a5aad32c85d.png?resizew=492)
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【推荐1】黄曲霉毒素B1(AFB1)是污染农产品与食品最常见的真菌毒素之一,危害不容忽视。研究者尝试从微生物中获取能够降解AFB1的物质。
(1)取被污染谷物样品10g置于90mL无菌蛋白胨培养基中振荡培养,一段时间后采用_______ 法,将样品接种于以_______ 为唯一碳源的培养基中,多次筛选获得菌株A,并确定其为一种酵母菌。
(2)制备菌株A悬液进行分组实验,实验处理及检测结果见下图1。_______ 。
(3)从菌株A中筛选到编码上述蛋白的M基因,导入用_______ 处理的大肠杆菌中,发现M蛋白合成量少且活性低。原因是:原核与真核生物编码同一氨基酸的密码子使用的频率不同(见下表1)。M基因在大肠杆菌内表达的过程中,识别酵母菌_______ (选填“低频”或“高频”)密码子的tRNA少,核糖体在此处停留时间更长,导致多肽链延伸速率降低甚至停止,从而影响M蛋白的合成量及活性。据此,需要对所用大肠杆菌进行改造,改造思路是_______ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/1/26/8eff1aab-ac73-4073-8ff6-a40da714abb7.png?resizew=361)
表两种菌中精氨酸密码子使用频率
(4)将M基因导入改造后的大肠杆菌中,获得生产M蛋白的工程菌,经_______ 后,接种到发酵罐中,实现工业化生产。
(1)取被污染谷物样品10g置于90mL无菌蛋白胨培养基中振荡培养,一段时间后采用
(2)制备菌株A悬液进行分组实验,实验处理及检测结果见下图1。
(3)从菌株A中筛选到编码上述蛋白的M基因,导入用
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【推荐2】请回答下列问题:
(1)酸奶是以新鲜的牛奶为原料,加入一定比例的蔗糖,经过____________ 法杀死牛奶中的微生物并冷却后,再加入__________ (菌种)培养而成的一种奶制品,口味酸甜细滑,营养丰富;该生物属于_____________ (填“需氧型”或“厌氧型”)生物,所以培养过程中需要____________ 处理。
(2)发酵过程某些菌种使奶中糖、蛋白质有20%左右被水解成为小的分子(如半乳糖和乳酸、小的肽链和氨基酸等)。奶中脂肪含量一般是3%~5%,经发酵后,酸奶中的脂肪酸可比原料奶增加2倍。从发酵过程中物质的变化来看,这些菌种能分泌的酶有___________________________________________ 。
(3)发酵过程中,牛奶相当于培养微生物的_______________ ,但是牛奶中不能含_________________ ,否则很难发酵成功。某研究小组想分离出酸奶中的菌种,他们应选用_______________ (填“液体”或“固体” )培养基,最好用___________________ 法接种。如果在富含蛋白质的培养基中加入双缩脲试剂,培养一段时间后,我们会发现产生________________ 的菌落中的菌种分解蛋白质的能力较强。
(1)酸奶是以新鲜的牛奶为原料,加入一定比例的蔗糖,经过
(2)发酵过程某些菌种使奶中糖、蛋白质有20%左右被水解成为小的分子(如半乳糖和乳酸、小的肽链和氨基酸等)。奶中脂肪含量一般是3%~5%,经发酵后,酸奶中的脂肪酸可比原料奶增加2倍。从发酵过程中物质的变化来看,这些菌种能分泌的酶有
(3)发酵过程中,牛奶相当于培养微生物的
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【推荐3】(35%~40%的甲醛水溶液(福尔马林)可作为防腐剂,其防腐的原理是使蛋白质变性。自然界中有能分解甲醛的细菌和真菌。下图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程,请分析回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/4/29/2451944183398400/2452608531521537/STEM/06a9c5bdec5e41219d298b4934788176.png?resizew=521)
(1)②过程的目的是_________________ ,③过程培养出的是_____________________ 。
(2)上述实验中,不需要进行灭菌处理的材料是______ ,培养基灭菌的常用方法为_______ 。
(3)由③→④的接种可选用___________ 法,通过培养能获得_________ 。经过⑤过程后,取样测定甲醛浓度,选出__________ ,再分离、培养得到目的菌株,理由是_________ 。、
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/4/29/2451944183398400/2452608531521537/STEM/06a9c5bdec5e41219d298b4934788176.png?resizew=521)
(1)②过程的目的是
(2)上述实验中,不需要进行灭菌处理的材料是
(3)由③→④的接种可选用
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【推荐1】在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按如图所示程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/20/2962312346533888/2963424300007424/STEM/d2e928db0d4245678c3a245b68bc2995.png?resizew=698)
(1)制备土壤浸出液要从长期使用该除草剂的土壤处取样,原因是____________ 。图中的培养基中____________ 是唯一的氮源,且要加入琼脂,目的是_____________ 。
(2)图中的接种方法是____________ ,每次划线要从上一次划线的末端开始,目的是____________ 、____________ 的菌落最可能是由单个细菌繁殖而成的。
(3)D环节中要选取带透明圈的菌落,透明圈形成的原因是____________ ,且透明圈越大,说明_____________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/20/2962312346533888/2963424300007424/STEM/d2e928db0d4245678c3a245b68bc2995.png?resizew=698)
(1)制备土壤浸出液要从长期使用该除草剂的土壤处取样,原因是
(2)图中的接种方法是
(3)D环节中要选取带透明圈的菌落,透明圈形成的原因是
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【推荐2】酸奶中含大量活力较强的乳酸菌,酸奶的营养价值与酸奶中乳酸菌的含量相关。MRS培养基常用于测定食品中的乳酸菌总数,下表是某研究小组在不同贮藏条件下测得的酸奶在MRS培养基中乳酸菌数量变化(CFU/mL)。请回答下列问题:
(1)在制作酸奶的保温发酵过程中,若被醋酸菌污染,________ (填“会”或“不会”)经发酵产生大量乙酸,理由是______ (答出2点)。家庭制作酸奶时,在纯牛奶中加人少量酸奶相当于微生物培养技术中的________ 操作。
(2)简要写出测定酸奶中乳酸菌活菌数的实验过程:_________ 。
(3)若酸奶中的乳酸菌数量变化与MRS培养基中的相近,则由表格数据可知,4℃和室温两种温度下的最佳饮用时间分别为出厂后的第________ 天。
贮藏条件出厂后天数 | 4℃ | 室温 |
第1天 | 1.12×109 | 1.38×109 |
第3天 | 1.47×109 | 1.78×109 |
第5天 | 2.07×109 | 5.33×108 |
第7天 | 6.11×109 | 6.44×107 |
第9天 | 3.06×109 | 2.11×107 |
第11天 | 3.89×108 | 4.51×106 |
(2)简要写出测定酸奶中乳酸菌活菌数的实验过程:
(3)若酸奶中的乳酸菌数量变化与MRS培养基中的相近,则由表格数据可知,4℃和室温两种温度下的最佳饮用时间分别为出厂后的第
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【推荐3】如图1是某同学制作果酒果醋的实验流程示意图
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/3/10/2416385109876736/2416756601004033/STEM/020b4407-c9e6-4b29-a36f-7163d6ae58b7.png)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/3/10/2416385109876736/2416756601004033/STEM/19d31e5a-56d7-40a4-8cce-48608c97379b.png)
(1)发酵罐1和发酵罐2中的微生物在结构上的主要区别是前者_______________________________ 。要保证酒精发酵和醋酸发酵的正常进行,除了满足适宜的温度、pH等条件外,还需做___ 。
(2)判断发酵罐1中优势菌种的数量最简单的实验方法是__________________________ ,通过此种方法统计获得的优势菌种的数量往往____________________ (大于、小于)发酵罐1优势菌种活菌的实际数量。
(3)图2表示纯化菌种的操作过程,过程一是_________________ 方法,过程二是__________________ 方法,欲从发酵罐2中分离出优势菌种并进行计数应选用过程_______________________ 。
(4)分离并获得菌种后,若需长期保存,应使用__________________ 法。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/3/10/2416385109876736/2416756601004033/STEM/020b4407-c9e6-4b29-a36f-7163d6ae58b7.png)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/3/10/2416385109876736/2416756601004033/STEM/19d31e5a-56d7-40a4-8cce-48608c97379b.png)
(1)发酵罐1和发酵罐2中的微生物在结构上的主要区别是前者
(2)判断发酵罐1中优势菌种的数量最简单的实验方法是
(3)图2表示纯化菌种的操作过程,过程一是
(4)分离并获得菌种后,若需长期保存,应使用
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