【推荐1】下图为大肠杆菌DNA分子的局部结构示意图。请据图回答：

（1）图中1表示______，2表示______，1、2、3结合在一起的结构叫______。
（2）图中3有______种，中文名字分别是______ 。3与4通过______相连接。
（3）若该DNA分子共有a个碱基，其中腺嘌呤有m个，则该DNA分子复制2次，需要游离的胞嘧啶脱氧核苷酸______个。
（4）某同学制作了DNA分子双螺旋结构模型，其中一条链所用A、C、T、G碱基模型的数量比为1∶2∶3∶4则该DNA分子模型中上述碱基模型的数量比应为______。
A．1∶2∶3∶4        B．3∶4∶1∶2            C．1∶1∶1∶1          D．2∶3∶2∶3

【推荐2】科学家以大肠杆菌为实验材料进行实验（如图所示）：将大肠杆菌在含¹⁵N的培养基中培养若干代，使其DNA双链均被¹⁵N标记（试管①）；将被¹⁵N标记的大肠杆菌转至含¹⁴N的培养基中培养，大肠杆菌每30min繁殖一代；取出每代DNA样本，离心分层。②③④⑤是模拟实验中可能出现的结果，回答下列问题：

(1)该实验主要运用了________技术和离心技术。转入含¹⁴N的培养基中后DNA复制1次的结果如图中试管_________所示。
(2)图中试管________是DNA半保留复制2次的结果。若向试管③中加入解旋酶一段时间后离心，出现的结果将如图中试管___________所示。
(3)若大肠杆菌中的一个双链均被¹⁵N标记的DNA分子在含¹⁴N的培养基中共培养了120min，则总共能产生_________个DNA分子，其中含¹⁵N的DNA分子的占比为________。

【推荐3】如图甲中DNA分子有a和d两条链，将甲图中某一片段放大后如乙图所示，结合所学知识回答下列问题：

（1）请用文字写出图中序号代表的结构名称：3_____________，7_____________。
（2）甲图中，A和B均是DNA分子复制过程中所需要的酶，其中B能将单个的脱氧核苷酸连接到单链末端形成脱氧核苷酸链，从而形成子链；则A、B两种酶分别是_____________。
（3）已知G和C之间有3个氢键，A和T之间有2个氢键。若某DNA片段中，碱基对为n，A有m个，则氢键数为_____________。
（4）科学家运用_____________技术可探究甲过程的方式为_____________。若甲所示模板分子为，将其放在含¹⁵N的培养液中进行3次甲过程，则子代中含¹⁴N的DNA所占比例为_____________。

【推荐1】近年来，在处理富营养化水体的污水过程中，与化学、物理除氮方法比较，目前认为微生物反硝化去除氮素污染更为经济有效。科研工作者采用基因工程技术构建具有定向高效降解含氮化合物能力的工程菌，进行了相关研究。请回答问题。
（1）微生物的反硝化作用，是氮循环中一个重要的生物过程。亚硝酸盐还原酶（Nir）是该过程的关键酶，是由野生菌株YP4的反硝化基因（nirS）转录后，再翻译出具有___________作用的蛋白质。
（2）工程菌的构建
①研究者利用NCBI数据库查到nirS基因的碱基序列，设计引物，利用PCR技术扩增nirS基因。PCR技术利用了___________的原理，使用耐高温Taq酶而未使用普通DNA聚合酶的主要原因是______________________。
②研究者用HindⅢ和BamHI两种限制酶处理nirS基因与p质粒，在_______________酶的作用下进行体外连接，用连接产物转化大肠杆菌DH5，在含庆大霉素的培养基中进行培养并提取质粒，如果用HindⅢ和BamHI双酶切，得到两个片段电泳结果分别与_______________电泳结果基本一致，说明获得重组质粒pYP4S。
③将pYP4S转化到野生菌株YP4中形成工程菌YP4S，培养后进行PCR鉴定。为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。图1所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的最佳一对引物组合是_________。某学生错选了图中的另外一对引物组合，扩增出长度为2．1kb的片段，原因是_______________。

（3）检测工程菌YP4S除氮的效能(%)）
①工程菌株YP4S在已灭菌的模拟污水中培养36h后，检测结果如图2。结果表明___________________。
②要进一步证明工程菌对含氮污水治理更有效，应___________________________。

【推荐2】为使甘蓝具有抗除草剂能力，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入甘蓝植株，获得抗草甘膦转基因甘蓝。

(1)基因工程中最核心的步骤是①基因表达载体的构建。步骤②用Ca²⁺处理农杆菌后获得感受态细胞，以便将重组质粒导入。步骤③将农杆菌与甘蓝愈伤组织共培养后，在步骤④的培养基中添加_________以便筛选出含目的基因的甘蓝植株。
(2)草甘膦抗性基因一条链的两端序列如下，采用PCR技术获取和扩增草甘膦抗性基因，应选用的引物组合为___

A．5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TCTGTTGAAT-3'

B．5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TAAGTTGTCT-3'

C．5'-ATTCAACAGA-3'和S'-ATCATCCAAG-3'

D．5'-ATTCAACAGA-3'和5'-GAACCTACTA-3'

(3)若目的基因用BamHI和BglⅡ剪切，质粒用BamHI剪切，酶切后的目的基因存在正向与反向两种连接方式。可用BamHI和EcoRI酶对两种重组质粒进行剪切，正向连接的重组质粒会被切去_________kb长度的片段，反向连接的重组质粒会被切去________kb长度的片段。通过凝胶电泳分析产物大小进行区分，如下图所示，图中________（样品1/样品2）为所需基因表达载体。

限制酶	识别序列和切割位点
BamHI	—G'GATCC—
BglII	—A'GATCT—
EcoRI	—G'AATTC—

【推荐3】人乳头瘤病毒（HPV）是一种球形、微小、无包膜的环状双链DNA病毒，该病毒的持续感染是女性宫颈癌的主要发病原因。HPV的主要衣壳蛋白是L1。注射HPV疫苗作为目前唯一可以有效预防宫颈癌的方法，一直受到公众的高度关注。回答下列问题：

限制酶	识别序列和切割位点
BamHⅠ	5'-G↓GATTC-3'
EcoRⅠ	5'-G↓AATTC-3'
MfeⅠ	5'-C↓AATTG-3'
KpnⅠ	5'-GGTAC↓C-3'
HindⅢ	5'-A↓AGCTT-3'

(1)目前可以利用基因工程来制备HPV疫苗，首先需要获得L₁蛋白基因，可采用PCR的方法，反应时需要在缓冲体系中添加的物质有模板DNA、dNTP、引物、______和______。
(2)要用PCR扩增L₁蛋白基因并保证其与质粒正确连接，应设计的基因上游引物序列是（写出前10个碱基）：______。
(3)PCR经过______过程，完成一轮循环。至少经过______次循环后可以得到等长的DNA片段。经过多轮循环后，还需要使用琼脂糖凝胶电泳的方法对产物进行鉴定，电泳时影响DNA分子迁移速率的因素有____________（答两点）