土壤中的某些细菌能产生脲酶,脲酶能使尿素分解产生NH3和CO2。从土壤中分离和纯化尿素分解菌的部分操作如图所示。回答下列问题:
(1)制备培养基平板的过程中,调节pH应在____________ (填“灭菌前”或“灭菌后”)。系列梯度稀释后,采用____________ (填工具)将0.1mL稀释液接种到培养基平板上。
(2)为保证上述实验中统计结果更接近实际值,下列处理合理的是____________ (填序号)。
①每个稀释度下至少接种3个平板,统计菌落数并求其平均值
②24h后统计菌落数,将记录的菌落数目的平均值作为结果
③选取菌落数为30~300的平板计数
若每个平板上单菌落数目均符合统计要求,且单菌落数目的平均数为n,则可估算出1g该土壤样品中尿素分解菌的数目约为____________ 个,用此法估算尿素分解菌数目的前提条件之一是在培养基中添加____________ 作唯一氮源。
(3)感染幽门螺杆菌(Hp)会引起一系列胃部疾病,在消化内科,患者常被要求做Hp检测。
①Hp能产生脲酶,基于这一原理的13C—尿素呼气试验是Hp检测的重要手段:口服含13C—尿素的胶囊,一段时间后,收集受试者呼出的气体并用红外光谱仪来检测其中13CO2的情况。若呼出的气体中检测出13CO2,则可判断受试者为Hp感染者。请简述13C—尿素生成13CO2。并转运到呼出的气体中的过程:____________ 。
②少数患者因感染耐药性Hp,用常规方法无法进行根除治疗,此时可以采取分离培养的方法,有针对性地筛选出最有效的抗生素:取少量从患者体内分离纯化的耐药性Hp接种在培养基平板上,将用不同候选抗生素和_____________ 浸润的圆形滤纸片贴在细菌平板上,将培养皿倒置于37℃的恒温培养箱中培养,观察____________ 。
(1)制备培养基平板的过程中,调节pH应在
(2)为保证上述实验中统计结果更接近实际值,下列处理合理的是
①每个稀释度下至少接种3个平板,统计菌落数并求其平均值
②24h后统计菌落数,将记录的菌落数目的平均值作为结果
③选取菌落数为30~300的平板计数
若每个平板上单菌落数目均符合统计要求,且单菌落数目的平均数为n,则可估算出1g该土壤样品中尿素分解菌的数目约为
(3)感染幽门螺杆菌(Hp)会引起一系列胃部疾病,在消化内科,患者常被要求做Hp检测。
①Hp能产生脲酶,基于这一原理的13C—尿素呼气试验是Hp检测的重要手段:口服含13C—尿素的胶囊,一段时间后,收集受试者呼出的气体并用红外光谱仪来检测其中13CO2的情况。若呼出的气体中检测出13CO2,则可判断受试者为Hp感染者。请简述13C—尿素生成13CO2。并转运到呼出的气体中的过程:
②少数患者因感染耐药性Hp,用常规方法无法进行根除治疗,此时可以采取分离培养的方法,有针对性地筛选出最有效的抗生素:取少量从患者体内分离纯化的耐药性Hp接种在培养基平板上,将用不同候选抗生素和
更新时间:2022-09-22 03:46:35
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【推荐1】回答下列关于微生物培养与纯化的问题:
(1)在筛选降解塑料的细菌时,配制的培养基应选择_____________ (填“塑料粉”或“塑料粉+葡萄糖”或“葡萄糖”)作为碳源。不选择其他两组的理由是___________ 。
(2)欲从被豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株。可将适量的____________ 染液滴加在平板中的菌落周围,洗去浮色后,如果菌落周围的现象是出现_____________ ,或不出现_________ ,则说明此种菌能够分泌脂肪酶。
(3)在平板上进行划线时,第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始,其目的是___________ 。
(4)微生物培养与纯化实验操作过程中应在酒精灯火焰附近进行的原因是____________ 。
(1)在筛选降解塑料的细菌时,配制的培养基应选择
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【推荐2】为控制牛奶对疾病的传播,国家食品安全规定每毫升牛奶中细菌数应少于200万个。下图是牛奶消毒及细菌检测实验的简要操作流程。请回答下列问题:
(1)牛奶的消毒有巴氏消毒法、高温瞬时消毒法及煮沸消毒法等,图中步骤①采用的消毒方法是_____ ,该消毒方法的优点是既达到消毒目的又减少_____ 。步骤②对牛奶的稀释倍数为_____ 。
(2)进行步骤③操作的培养基中,牛肉膏、蛋白胨主要为微生物提供_____ 和无机盐等营养成分,该步骤应选用的接种工具是_____ 。培养后,如果接种过菌液的多个平板培养基中有一个培养基上未出现菌落,从操作层面分析,最可能的原因是接种工具经火焰灼烧后_____ 。
(3)接种后,通常在培养皿的_____ 做适当标记。然后将接种过菌液的培养基和_____ 培养基同时放入37℃恒温培养箱中,培养24~48小时。
(4)培养后可观察到菌落。进行菌落有效计算的前提是_____ 、_____ 。
(1)牛奶的消毒有巴氏消毒法、高温瞬时消毒法及煮沸消毒法等,图中步骤①采用的消毒方法是
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【推荐3】生物反应器是指利用生物体的功能,通过生物体代谢过程获得目标产物。PCR技术需要大量耐高温的DNA聚合酶,生产上常用生物反应器获得。科研人员计划从自然环境中筛选耐高温的微生物菌株运用于生物反应器,并获取目标产物,实验流程如图。回答下列问题:
样品→选择培养→梯度稀释→接种到鉴别培养基上→挑选保存
(1)科研人员应在_______________ 的环境寻找耐高温、耐盐碱的微生物菌株,获得微生物菌株后需在实验室进一步筛选,筛选的方法是__________________ 。
(2)分离纯化自然环境中的微生物菌种时,要对滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是_____________________ 。此后可将稀释液接种到鉴别培养某上进行培养计数,原理是_______________ 。
(3)筛选得到的菌种若要临时保藏,应接种到试管的_____________________ 斜面培养基上。欲降低生产成本,可将筛选得到的菌种利用包埋法进行固定,这样做的优点是___________________ 。
(4)用筛选得到的耐高温菌种作为生物反应器,生产过程不易染菌,原因是__________________ 。
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【推荐1】桑椹酿酒使用的多为葡萄酒酵母菌。现科研人员从桑园中分离出发酵性能优良的专用桑樵酒酵母菌E44,并用葡萄酒酵母菌(CK)做对照,对其相关性能进行测定。分析回答下列问题:
(1)分离E44菌株的培养基一般需用______________ 灭菌,常用的分离方法是平板划线法和______________ 。研究发现,酿酒酵母菌不能以赖氨酸作为氮源,因此可将分离获得的酵母菌接种在____________________________ 的培养基上进行鉴定,结果发现菌株不能生长。
(2)普遍认为酵母菌的发酵能力与菌株对酒精的耐受性有关。为此,科研人员对E44菌株和CK菌株在不同酒精浓度下的死亡率进行了测定,由实验结果判断E44菌株的酒精耐受性更高,该结果的检测过程中先用次甲基蓝染色,再借助显微镜运用______________ 法计数后,计算出各菌株的死亡率。次甲基蓝可将死细胞染成蓝色,而活细胞不着色,原因是____________________________ 。
(3)为进一步确定E44菌株的发酵性能,科研人员分别测定并绘制了E44菌株和CK菌株的发酵性能曲线(如下图)。由图可知,第1d酵母菌降糖速率缓慢,酒精度增长较慢的原因是______________________ 。从第2d开始,糖度迅速下降,酒精度也较快增长的原因是____________________________ 。通过对比发现,E44菌株比CK菌株起酵快,发酵平稳,是优良的桑棋酒酿酒酵母菌种。
(1)分离E44菌株的培养基一般需用
(2)普遍认为酵母菌的发酵能力与菌株对酒精的耐受性有关。为此,科研人员对E44菌株和CK菌株在不同酒精浓度下的死亡率进行了测定,由实验结果判断E44菌株的酒精耐受性更高,该结果的检测过程中先用次甲基蓝染色,再借助显微镜运用
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【推荐2】临床使用抗生素前,有时需要进行细菌的耐药性实验。试验时,首先从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤进行操作,以确定从病人身上获得的致病菌对不同抗生素的敏感性。
(1)取该致病菌单菌落适当稀释,用________ 法接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。
(2)为了检测获得的致病菌对于抗生素的敏感性,将含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片分别均匀地放置在四块平板上,培养一段时间后,得到的结果为:含A抗生素的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对A抗生素________ ;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明____________________________________ ;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个小菌落,在排除杂菌污染的情况下,很可能此菌对D抗生素产生了________ 。
(3)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素_______ 。
(1)取该致病菌单菌落适当稀释,用
(2)为了检测获得的致病菌对于抗生素的敏感性,将含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片分别均匀地放置在四块平板上,培养一段时间后,得到的结果为:含A抗生素的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对A抗生素
(3)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素
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【推荐3】对生活垃圾进行分类处理,是提高垃圾的资源价值和改善生活环境的重要措施。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾,如剩菜剩饭、骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。(1)科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时,要想达到筛选的目的,该培养基与普通培养基相比,最大的区别是:该培养基___ 。若要测定土壤中的微生物活菌数,常用的方法是___ 。
(2)获得产脂肪酶的菌株后,在处理含油垃圾的同时,可获得单细胞蛋白,实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的AB两种菌株,并进行了培养研究,结果如图1所示。据图1分析,应选择菌株___ 进行后续相关研究,理由___ 。
(3)科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时,加碘液染色后,选择培养基上出现了A、B和C三种菌落(如图2所示)。若要得到淀粉酶活力最高的菌株,应选择___ 菌落进一步纯化。经检测A菌落为硝化细菌,A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是___ 。
(4)在微生物分解处理垃圾的过程中,纤维素分解菌能够分泌纤维素酶,该酶可将纤维素分解为葡萄糖。若让你从土壤中分离纤维素分解菌,应该选择到的环境中采集土样,为什么?___ 。
(5)实验室中微生物的分离、纯化和培养试验结束后,为了防止病原微生物污染环境或感染科研工作者,应采取的防护措施有___ (至少答2点)。
(2)获得产脂肪酶的菌株后,在处理含油垃圾的同时,可获得单细胞蛋白,实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的AB两种菌株,并进行了培养研究,结果如图1所示。据图1分析,应选择菌株
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(4)在微生物分解处理垃圾的过程中,纤维素分解菌能够分泌纤维素酶,该酶可将纤维素分解为葡萄糖。若让你从土壤中分离纤维素分解菌,应该选择到的环境中采集土样,为什么?
(5)实验室中微生物的分离、纯化和培养试验结束后,为了防止病原微生物污染环境或感染科研工作者,应采取的防护措施有
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