【推荐2】北极比目鱼中有抗冻基因，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，过程①的mRNA序列为5'-AUCUAUGCGCUCAUCAG…（中间省略3n个核苷酸序列）…CGCAGCAAUGAGUAGCG-3'。请回答：
   
(1)过程②中既能连接黏性末端又能连接平末端的DNA连接酶是_____。
(2)为使过程①获取的目的基因能整合到番茄细胞的染色体的DNA上，在构建表达载体时，需要将目的基因插入______中，并且需在目的基因的首端和尾端分别加入_____。
(3)在分子水平上要检测番茄的DNA上是否插入了抗冻基因或抗冻基因是否转录出了mRNA，可以通过______等技术检测；要确认抗冻基因是否在转基因番茄植株中完全表达，应通过_____法检测转基因番茄植株中该基因的表达产物是否呈阳性。
(4)如果目的基因进行PCR扩增，循环5次，理论上至少需要加入______个引物，扩增的产物中同时含有两种引物的DNA分子有_____个，可选用的引物是_____。
①5′-ATCTATGCGCTCATCAG-3′       ②5′-GACTACTCGCGTATCTA-3′③5′-CGCAGCAATGAGTAGCG-3′       ④5′-GCGATGAGTAACGACGC-3′⑤5′-TAGATACGCGAGTAGTC-3′⑥5′-CGCTACTCATTGCTGCG-3′

【推荐3】我国科学家以唾液腺作为生物反应器，从转基因小鼠的唾液中制备出人的神经生长因子蛋白（hNGF）。
（1）制备方法有两种：
方法1：hNGF基因与_____________、终止子等调控组件构建成基因表达载体，使hNGF基因在唾液腺中表达，获得唾液A。
方法2：将hNGF基因插入___________基因中，使hNGF基因在唾液腺中表达，获得唾液B。
（2）hNGF具有促进TF1（人红系白血病细胞）增殖的作用，以此为原理，请设计实验比较通过上述两种方法获得的唾液中的hNGF活性，写出实验思路。_______________________________。
（3）与乳腺反应器相比，唾液腺生物反应器的优势表现在__________________。

【推荐2】为了应对干旱和强降雨等灾害性天气，很多城市增设了雨水截流储存和利用的设施，如布设于道路周边或地势较低区域的生物滞留池。生物滞留池内土壤、植物和微生物等构成了小型生态系统。某城市道路收集到的雨水含有高浓度污染物，其中的多环芳烃（PAHs），会严重危害城市水环境。科研人员基于解决污染问题和维护生态安全两方面考虑，在从当地环境中筛选耐受菌的基础上，通过转基因技术获得高效降解污染物的工程菌。
（1）经检测发现，生物滞留池内PAHs中的芘含量相对较高。研究者尝试筛选能降解芘的菌种。
①筛选能降解芘的菌种基本操作步骤如下。请将下列“方框”内字母后面内容补充完整a________b________c________d________e________。

②从对照区域和生物滞留池中分别培养出占比较高的菌属，结果见图1、图2。在两个区域中均能检测出的菌属有________个，此结果能够说明滞留池土壤中________出现了明显的变化。

③在另一个筛选对芘具有耐受性的菌株的实验中，分离得到四个菌属中的菌株，其生长曲线见图3。研究人员欲从中选择一个构建工程菌。结合图1、图2所示结果，你认为应选择_________，理由是________。

（2）研究者将能高效降解芘的外源基因重组至所选受体菌的同时，还转入了含lac启动子的核酸酶基因。在半乳糖苷分子的诱导下该启动子会被激活，表达的核酸酶会将自身遗传物质降解进而发生菌体自毁。转入该基因在维护生态安全方面的意义是_______。
（3）试举一例说明人类在改造自然的过程中，可能会带来的生物安全隐患_______。

【推荐3】期高血糖可引发血管细胞衰老。科研人员为研究S蛋白在因高血糖引发的血管细胞衰老中的作用，以腺病毒为载体将编码S蛋白的S基因导入血管细胞，实现S蛋白在血管细胞中的大量表达。腺病毒的遗传物质为DNA，其复制需要E1、E2、E3基因共同完成。为将S基因导入腺病毒，科研人员首先构建了含S基因的重组质粒，过程如图1，含S基因重组腺病毒的制作过程如图2。

(1)科研人员将S基因先用____________（填限制酶的名称）酶切后，再用DNA连接酶连入质粒I，得到重组质粒Ⅰ（图1甲所示），导入细菌后。为筛选含有重组质粒I的细菌，除了营养成分外，培养基还需添加____________。
A．卡那霉素                    B．氨苄霉素                    C．DNA连接酶                    D．琼脂
(2)在上述培养基中长出的单菌落提取质粒，无法确定是否含有S基因，原因是____________。如要进一步鉴定重组质粒I是否含有S基因，下列方法可选用的是____________。
①测定重组质粒Ⅰ的长度②测定重组质粒Ⅰ碱基序列③放在青霉素培养基进行筛选④测定重组质粒I的元素
(3)重组质粒Ⅰ长度为3.5kb（千碱基对），质粒Ⅱ长度为5.4kb，用限制酶切重组质粒Ⅰ获得DNA片段，利用pmeI切割将此DNA片段与质粒Ⅱ（图1乙所示）重组产生重组质粒Ⅱ，重组质粒Ⅱ的长度可能为____________，原因是____________。
(4)图2中，将含S基因的重组质粒II，用PacI酶切后，获得改造后的腺病毒DNA，将其导入A细胞的目的是____________，A细胞的基因必须要含有____________基因。
(5)综合上述信息，从生物安全性角度分析重组腺病毒载体的优点：_____________。