【推荐1】微生物的抗性突变是自发产生的？还是与相应的环境因素有关？有人设计下列实验，以研究探讨该问题。实验选用对链霉素敏感的大肠杆菌K12。培养基3、7、11中含有链霉素，其它培养基中不含链霉素。请据实验回答：
   
（1）将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养，接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养。“印章”位置保持不变。培养皿2、3根据其功能，分别称为______培养基、______培养基。“印章”使用前需作_________处理。
（2）培养基2中的菌落是_________，培养基3中的菌落是______________。
（3）培养基3的A点处有菌落生长，将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中。如图反复几次实验。请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”：_____，原因是_________________________________________。
（4）培养液4、8中的菌液越来越少，但培养皿7、11中的菌落越来越多。你的解释是：___________________。
（5）要分离出单个菌落，除了本实验中的涂布法外，还可以用___________法。
（6）上述不含链霉素培养基通常使用的是_______________，下表是另一种培养基配方，该培养基具有
_________作用。

成分	KH2PO4	Na2 PO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂
含量	1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g

（7）现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如右表所示。根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是___________________。

【推荐2】自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N₂的细菌，将玉米种子用自身固氨菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。请回答：

(1)步骤①土样应取自当地____________（填“表层”或“深层”）土壤；步骤②需充分振荡20min，主要目的是____________。
(2)步骤③将土壤悬浮液稀释了____________倍，步骤④所用的接种工具是____________。
(3)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的____________培养基，并加入琼脂后进行高压蒸汽灭菌、倒平板。纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是_______。
Ashby培养基：甘露醇（C₆H₁₄O₆）10g，KH₂PO₄0．2g，MgSO4·7H₂O0．2g，NaCl0．2g，K₂SO₄0．3g，CaCO₃5g，蒸馏水1000mL。
LB培养基：蛋白胨1g，酵母提取物5g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，pH7．0-7．2
(4)将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩大培养48小时，经离心后收集下层细胞并转移至特定培养基中进行固氮能力的测定，筛选出固氮能力最强的菌种CM12为进一步鉴定其固氮，科研人员选用发芽一致的玉米种子进行3组盆栽实验，30d后测定土壤微生物有机氮含量，结果如下图。

CK：对照处理组
N：尿素处理组（每盆土壤中50mL有全营养液：成份为在1000mL无氮植物营养液中加入0．12g尿素）
CM12：自生固氮菌CM12处理组（每盆土壤浇50mL接种自身固氮菌的无氮植物营养液）
①对照组（CK）的处理为____________。
②实验结果表明：施用尿素处理和接种固氮菌CM12处理均能显著增加土壤微生物有机氮含量。与尿素处理组相比，CM12处理组土壤微生物有机氮含量增加了约____________%。
③自生固氨菌较共生固氮菌（如根瘤菌）的应用范围更广，原因是____________。

【推荐3】某个实验小组对微生物的培养和五种香辛料提取的精油（编号为A、B、C、D、E）的抑菌能力进行了研究。首先制备了直径相同的圆滤纸片若干，灭菌后分别放入各组精油中浸泡处理。然后取各种待测菌悬液0．15 mL分别在相应的固体培养基上均匀涂布，制成含菌平板。再取浸泡过精油的滤纸片贴在含菌平板上，每个培养皿贴浸过同一种精油的滤纸3片，放培养箱中培养一定时间。测定抑菌圈直径，结果取三次重复实验的平均值，其数据如表所示（单位：mm）。请分析回答：
（1）从香辛料植物中提取精油的方法有：__________。
（2）在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止_________，不同微生物培养时pH的要求往往不同，培养大肠杆菌和白葡萄球菌时需将培养基pH调至___。
（3）实验使用涂布器接种，接种前涂布器的灭菌方法为_________，接种后将培养基放置在培养箱中_____（填“需要”或者“不需要”）振荡培养。

精油种类 抑菌圈直径（mm） 菌种	A	B	C	D	E
大肠杆菌	21．1	26．0	15．1	24．0	23．2
白葡萄球菌	14．7	22．0	19．1	12．0	29．1
黑曲霉	24．6	33．0	26．0	24．5	49．6
青霉	25．3	38．2	24．3	25．1	42．8

（4）培养一定的时间后，可根据不同微生物在固体培养基上形成的菌落的________（答出2项即可）等特征区分不同的微生物。
（5）根据实验结果，不同精油对不同种类的微生物杀伤作用不同，其中精油______对真菌的杀伤作用最强。该实验还缺少一组空白对照，请尝试补充：______________。

【推荐2】高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。请据图回答下列问题：

（1）Ⅰ号培养基从物理状态来看，属于_______，从用途来看属于______，应以_____作为唯一碳源，原因是___________。
（2）配制固体培养基的基本步骤是______、称量、_________、灭菌、_________。
（3）部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放_______分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成______，挑选相应的菌落，接种到Ⅱ号培养基进一步分离纯化后，再对菌种进行_____培养。
（4）对培养基灭菌的方法一般为_____________。

【推荐3】某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选得到了能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答下列问题：

(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选目的菌，这种培养基属于_____培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源来自于培养基中的_____，该培养基使用前要用_____（方法）灭菌。
(3)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量_____（填“增加”或“减少”）的菌液，接入新的培养液中连续培养，目的是_____。
(4)为了计数目的菌的数量，一位同学在4个培养基平板上分别接种稀释倍数为10⁶的菌液0．1mL，培养后菌落数分别为155、160、176、149个，则每毫升原菌液中上述目的菌的数量约为_____。该结果会比实际结果偏小，原因是_____。
(5)将目的菌制成用于降解有机化合物A的环保生物菌剂时，还需要解决什么问题？（至少答出两点）