甲烷氧化菌生产的单细胞蛋白具有较高的经济效益。如图所示,某研究小组从污泥中分离出甲烷氧化菌。回答下列问题。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/11/19/54c3ed33-90b5-4c6f-9313-429a5c70600a.png?resizew=541)
(1)在培养过程中,获得纯净甲烷氧化细菌的关键是____________________ ;因此,在配制培养基后,需对A和B培养基进行____________________ 灭菌。
(2)利用A培养基多次振荡培养的目的是______________________________ (答出2点)。
(3)若要验证B培养基具有选择作用,则需要设计一组对照组,对对照组的处理是_________________________ 。实验结果是:接种48h后,实验组B培养基上的微生物在________________________________________ (答出3点)等方面表现出稳定的菌落特征。
(4)测定甲烷氧化菌的数量时,通常选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养,目的是___________________ (答出2点)。
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(1)在培养过程中,获得纯净甲烷氧化细菌的关键是
(2)利用A培养基多次振荡培养的目的是
(3)若要验证B培养基具有选择作用,则需要设计一组对照组,对对照组的处理是
(4)测定甲烷氧化菌的数量时,通常选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养,目的是
更新时间:2022-10-01 09:50:36
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【推荐1】金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物,该菌具耐高盐的特性。哥伦比亚血平板含无菌脱纤维羊血,金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞,产生透明的溶血圈。下图为检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/5/27/2988485251874816/3001775744966656/STEM/80248f89b6484533bc63f5f97581e46b.png?resizew=307)
(1)该团队在培养金黄色葡萄球菌时配制的培养基中,基本成分包括__________ 、水和无机盐等,从功能上看7.5%NaCl(高盐)肉汤培养基属于__________ 培养基。
(2)在配制哥伦比亚血平板时,添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌_______ (填“之前”或“之后”),理由是_______________________________________ 。若鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,则哥伦比亚血平板上会出现__________________ 。
(3)图中哥伦比亚血平板上的接种方法是_____________ 。若用此方法接种时出现菌落聚集现象,可能的操作失误是________________________________________ 。
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(1)该团队在培养金黄色葡萄球菌时配制的培养基中,基本成分包括
(2)在配制哥伦比亚血平板时,添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌
(3)图中哥伦比亚血平板上的接种方法是
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【推荐2】土壤中含有大量的难溶性磷酸盐,为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株,以便将其添加到有机肥中,改善植物磷元素供应,科研人员进行如下实验:
实验原理:固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解,会在菌落周围形成透明圈(如图1),透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/6/27/1976479860916224/1987812920287232/STEM/d6d17787-a65a-4a82-8d8c-0bc30a480916.png)
实验步骤:
步骤1 取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释,取稀释液lmL接种到基础培养基A上,在适宜温度下培养72h。
步骤2 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3〜4d后观察菌落特征和透明圈的大小,初步筛选出三种优良解磷菌株(如表)。
请据以上资料,回答下列问题:
(1)从物理形态上看,培养基A属于_________ 培养基,为了筛选出优良解磷菌株,培养基中加入的磷源是_________ 。
(2)步骤1中的接种方法是_________ ,应该在_________ 旁完成操作。步骤2中对接种环采用的灭菌方法是_________ 灭菌。
(3)根据表中的实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是_________ 。
(4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力,研究人员将它们接种到基础培养基B中,并在37℃、200r·min-l摇床培养,定期取上清液,测定溶液中可溶性磷含量,得到如图2所示曲线。
①用摇床进行振荡培养的好处之一是增加培养液中的_________ 。
②图2所示曲线结果表明最优良的解磷菌株是_________ 。
实验原理:固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解,会在菌落周围形成透明圈(如图1),透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。
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实验步骤:
步骤1 取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释,取稀释液lmL接种到基础培养基A上,在适宜温度下培养72h。
步骤2 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3〜4d后观察菌落特征和透明圈的大小,初步筛选出三种优良解磷菌株(如表)。
菌株 | 透明圈直径(D) | 菌落直径(d) | D/d |
M-3-01 | 18.8 | 12.3 | 1.5 |
B3-5-6 | 20.7 | 8.0 | 2.6 |
T1-4-01 | 9. 1 | 6.5 | 1.4 |
请据以上资料,回答下列问题:
(1)从物理形态上看,培养基A属于
(2)步骤1中的接种方法是
(3)根据表中的实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是
(4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力,研究人员将它们接种到基础培养基B中,并在37℃、200r·min-l摇床培养,定期取上清液,测定溶液中可溶性磷含量,得到如图2所示曲线。
①用摇床进行振荡培养的好处之一是增加培养液中的
②图2所示曲线结果表明最优良的解磷菌株是
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【推荐3】生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如表所示,实验步骤如图所示。请分析回答问题:
(1)本实验所使用的培养基按功能来分应为_________ 培养基。原理是__________________ 。
(2)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有_________________________ 。
(3)实验是否需要振荡培养来提高溶氧量:______ (填“是”或“否”),原因是______________ 。转为固体培养时,常采用___________ 法接种,获得单菌落后继续筛选。
(4)若在稀释倍数为105的三个培养基中,菌落数分别是156、174、183,则每克内容物中尿素分解菌的数目为_______ 个。
(5)分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有__________ (填序号)。
①取样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照
(6)如果想要进一步鉴定筛选出来的细菌是尿素分解菌,还应该设置_______ 组对照实验,最后用_______ 指示剂对该微生物的菌落进行鉴定,看指示剂是否变_______________ 。
(7)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24-48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果见表,其中合理的稀释倍数为___________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/8/27/065d9831-7994-4400-8000-630db6cf840c.png?resizew=320)
KH2PO4 | 1.4g |
Na2HPO4 | 2.1g |
MgSO4·7H2O | 0.2g |
葡萄糖 | 10g |
尿素 | 1g |
琼脂 | 15g |
溶解后蒸馏水定容到1000mL |
(2)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有
(3)实验是否需要振荡培养来提高溶氧量:
(4)若在稀释倍数为105的三个培养基中,菌落数分别是156、174、183,则每克内容物中尿素分解菌的数目为
(5)分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有
①取样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照
(6)如果想要进一步鉴定筛选出来的细菌是尿素分解菌,还应该设置
(7)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24-48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果见表,其中合理的稀释倍数为
稀释倍数 | 103 | 104 | 105 | 106 | 107 |
菌落数 | >500 | 367 | 248 | 36 | 18 |
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【推荐1】化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S,S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此,某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响,结果见表。
回答下列问题。
(1)通常在实验室培养微生物时,需要对所用的玻璃器皿进行灭菌,灭菌的方法有____________ (答出2点即可)。
(2)由实验结果可知,菌株C生长的最适碳源是__________ ;用菌株C生产S的最适碳源是__________ 。
(3)由实验结果可知,碳源为淀粉时菌株C不能生长,其原因是__________ 。
(4)若以制糖废液作为碳源,为进一步确定生产S的最适碳源浓度,某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路:__________ 。
(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用,其意义是__________ (答出1点即可)。
碳源 | 菌株C细胞干重(g/L) | S产量(g/L) |
葡萄糖 | 3.12 | 0.15 |
淀粉 | 0.01 | 0.00 |
制糖废液 | 2.30 | 0.18 |
回答下列问题。
(1)通常在实验室培养微生物时,需要对所用的玻璃器皿进行灭菌,灭菌的方法有
(2)由实验结果可知,菌株C生长的最适碳源是
(3)由实验结果可知,碳源为淀粉时菌株C不能生长,其原因是
(4)若以制糖废液作为碳源,为进一步确定生产S的最适碳源浓度,某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路:
(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用,其意义是
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【推荐2】根据所学知识,完成下列题目:
(1)“闻着臭,吃着香”的臭豆腐驰名中外,其制作过程中所用的微生物主要是_____ ,臭豆腐表面往往有一层致密的皮,这层皮实际上是微生物的_____ ,它对人体是无害的,在多种微生物的_____ 作用下,豆腐就转变成了风味独特的腐乳。
(2)欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌,可在培养基中加入_____ 制成选择培养基进行分离;若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采用的接种方法是_____ 。
(3)Taq细菌1966年被发现于美国黄石国家公园,它的发现促成了PCR技术的自动化,这是因为它为PCR技术提供了_____ ,这说明在寻找目的菌时要根据它对生存环境的要求去寻找,实验室中微生物的筛选,也应用了同样的原理,即人为提供目的菌生长的条件,实验室培养微生物的培养基一般都含_____ (至少答出3种)等主要营养物质。
(4)微生物培养过程中,获得纯净培养物的关键是_____ ,其中对培养皿进行灭菌常用的方法是_____ 。
(1)“闻着臭,吃着香”的臭豆腐驰名中外,其制作过程中所用的微生物主要是
(2)欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌,可在培养基中加入
(3)Taq细菌1966年被发现于美国黄石国家公园,它的发现促成了PCR技术的自动化,这是因为它为PCR技术提供了
(4)微生物培养过程中,获得纯净培养物的关键是
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解题方法
【推荐3】孔雀石绿(简称 MG)是广泛使用的有机染料,在自然环境中极难降解,容易引起土壤污染,进而危害人体健康,因此从土壤中分离和筛选出高效的 MG 降解菌有非常重要的意义。已知MG 在水中溶解度低,含过量MG 的固体培养基不透明。图中Ⅰ ~Ⅲ是操作过程。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/2/12/face9795-34e7-4781-8685-0912fe1f4d7a.png?resizew=490)
(1)配制用于 MG 降解菌富集的培养基其成分特点是____ ,该培养基属于____ 培养基。过程Ⅰ ~Ⅲ中需要无菌操作的是____ ,在无菌操作中,为避免被杂菌污染,需要注意的事项有____ (答出2点即可)。
(2)MG 高效降解菌株的富集:如图所示,将1.0g土样接入含上述配制好的培养液的三角瓶中,将三角瓶置于30℃180r/min摇床中振荡培养1~2天,此操作的目的是____ 。
(3)MG 高效降解菌株的分离和纯化:过程Ⅲ所利用的接种方法可以用于____ 。在过程Ⅱ中重复次数为3次,在过程Ⅲ中三个培养基长出的菌落数量分别是145、163、154,则推测A中细菌的数量为____ 个/mL。
(4)MG 高效降解菌株的鉴定:将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基(其他营养成分等适宜)上,鉴定目的菌的方法及原因是____ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/2/12/face9795-34e7-4781-8685-0912fe1f4d7a.png?resizew=490)
(1)配制用于 MG 降解菌富集的培养基其成分特点是
(2)MG 高效降解菌株的富集:如图所示,将1.0g土样接入含上述配制好的培养液的三角瓶中,将三角瓶置于30℃180r/min摇床中振荡培养1~2天,此操作的目的是
(3)MG 高效降解菌株的分离和纯化:过程Ⅲ所利用的接种方法可以用于
(4)MG 高效降解菌株的鉴定:将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基(其他营养成分等适宜)上,鉴定目的菌的方法及原因是
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【推荐1】请回答有关微生物培养、应用和保存以及物质提取的问题:
(1)微生物培养过程中对培养皿进行灭菌时常用的方法是_________________ 。培养细菌时常用到的培养基是______________________ (填培养基名称)。
(2)从土壤中分离尿素分解菌的过程中,应向含有________ 的培养基中加入_______ 指示剂。
(3)对于需要临时保藏的菌种,首先要将菌种接种到试管的固体斜面培养基上,在合适的温度下培养,等菌落长成后,再将试管放入__________ 的冰箱中保藏。对于需要长期保存的菌种,可以采用___________ 的方法。
(4)从胡萝卜中提取胡萝卜素时常用的方法是_________________ 法。
(1)微生物培养过程中对培养皿进行灭菌时常用的方法是
(2)从土壤中分离尿素分解菌的过程中,应向含有
(3)对于需要临时保藏的菌种,首先要将菌种接种到试管的固体斜面培养基上,在合适的温度下培养,等菌落长成后,再将试管放入
(4)从胡萝卜中提取胡萝卜素时常用的方法是
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【推荐2】二氯喹啉酸(QNC)是一种高选择性、激素类、低毒性除草剂,主要用于防治稻田稗草,持效期长,易于在土壤中积累而影响后茬作物的生长发育。某科研小组欲分离筛选出一株可降解除草剂QNC的菌株,鉴定并明确其降解特性,分离、培养流程图所示,回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/5/20/2983561054461952/2985016533188608/STEM/5e0033292de6495aa1e40db9ec1c997c.png?resizew=480)
(1)在无机盐液体培养基中筛选降解菌株,需要以______________ 为唯一碳源。在培养中需要振荡处理,目的是______________ 。
(2)不同的微生物培养形成的菌落表现出不同的特征,可通过微生物的菌落特征来鉴定微生物,这些菌落特征包括______________ (答出两点即可)等。通过分离筛选得到一株能有效降解QNC的菌株15#,对培养的菌株15#进行计数时,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,其目的是______________ 。统计获得的菌落数比实际的活菌数少,原因是______________ 。
(3)为确定菌株15#的最适培养条件,科研人员探究接种量和不同氮源等因素对菌株15#降解QNC的影响,实验结果如图b、图c所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/5/20/2983561054461952/2985016533188608/STEM/527d59e769e54ceda8165feb32e86987.png?resizew=449)
①分析图b可以得出的结论有______________ (答出两点即可)。
②分析图c可知,菌株15#降解QNC效果最好的接种量为7%,当超过该接种量时,降解率呈下降趋势,原因可能是______________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/5/20/2983561054461952/2985016533188608/STEM/5e0033292de6495aa1e40db9ec1c997c.png?resizew=480)
(1)在无机盐液体培养基中筛选降解菌株,需要以
(2)不同的微生物培养形成的菌落表现出不同的特征,可通过微生物的菌落特征来鉴定微生物,这些菌落特征包括
(3)为确定菌株15#的最适培养条件,科研人员探究接种量和不同氮源等因素对菌株15#降解QNC的影响,实验结果如图b、图c所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/5/20/2983561054461952/2985016533188608/STEM/527d59e769e54ceda8165feb32e86987.png?resizew=449)
①分析图b可以得出的结论有
②分析图c可知,菌株15#降解QNC效果最好的接种量为7%,当超过该接种量时,降解率呈下降趋势,原因可能是
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【推荐3】酸牛奶由新鲜牛奶经乳酸菌发酵制成。经乳酸发酵后,牛奶中的乳糖可转化成葡萄糖和半乳糖,进而转变为乳酸等小分子化合物,易于消化。乳酸菌还能改变肠道环境,抑制有害菌繁殖,调整胃肠道菌群的平衡。低温酸奶一般在2-6℃可储藏21天,在室温下乳酸杆菌加快繁殖,会因过度生长发酵而提前死亡,并造成酸奶营养损失和酸度增加。保加利亚乳酸杆菌为酸奶发酵的常用菌种,最适生长温度为42-45℃。某研究小组欲验证室温长期保存会导致保加利亚乳酸杆菌死亡,从而造成酸奶品质下降。请完善下列实验方案。
(1)制备培养基:筛选保加利亚乳酸杆菌需使用_________ 培养基,其成分除了水、碳源、氮源和无机盐外,还应加入_______ 作为凝固剂。
(2)灭菌:对培养基进行灭菌的方法是_________ ,如需调节培养基的pH应在灭菌_______ (前/后)进行。
(3)接种培养:将2-6℃和室温保存10天的酸奶分别用缓冲液稀释104、105、106倍,再使用______________ 法将稀释液接种到灭菌后的培养基上,放入_______ (有氧/无氧)环境、42℃恒温箱中培养48小时,以利于其长出稳定菌落。此过程还需要设置________ 平板作为对照,目的是__________________ 。统计平板上呈现不规则圆形的灰白色菌落数。
(4)预期结果:________________________ 。
(1)制备培养基:筛选保加利亚乳酸杆菌需使用
(2)灭菌:对培养基进行灭菌的方法是
(3)接种培养:将2-6℃和室温保存10天的酸奶分别用缓冲液稀释104、105、106倍,再使用
(4)预期结果:
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【推荐1】随着人们生活质量的提高,餐饮含油脂废水的排放量大量增加,合理处置油脂废水也成为新的课题。已知芽孢杆菌中有多种分解油脂并产酸的菌种,科研人员欲采用下列流程筛选出能高效分解油脂的微生物。
菌种取样→分离培养→菌株的筛选→形态特征观察和生理生化反应鉴定,请回答下列问题:
(1)选取饭店附近排污渠的含油脂废水为样本,采样约0.2ml,立即装于试管内,此试管使用前需要经过________ 处理。
(2)样品分离培养前,一般需要将菌液进行________ 处理,然后吸取0.2ml菌液涂布到营养琼脂培养基平板上,置于37℃恒温培养箱内培养24h,记录菌落总数。将分离出的菌株按照菌落___________________ (至少答3点)等表观特征初步分类。
(3)上述步骤筛选的菌株分别接种到含“花生油”的琼脂培养基中,37℃恒温培养箱中培养24h,筛选出油脂降解菌,培养基中“花生油”主要为菌种繁殖提供___________ 。在该培养基还需加入中性红染料(中性红为脂溶性染料,遇酸为红色,遇碱为黄色),挑选菌株要挑选显_____________ 降解圈的菌株,并且选颜色较___________ (填“深”或“浅”)的为宜。
(4)实际操作中,由于油脂易聚集成液滴,常在培养基中加入2-3滴乳化剂使油脂分散均匀,鉴定效果更好,试分析原因_______________________ 。
菌种取样→分离培养→菌株的筛选→形态特征观察和生理生化反应鉴定,请回答下列问题:
(1)选取饭店附近排污渠的含油脂废水为样本,采样约0.2ml,立即装于试管内,此试管使用前需要经过
(2)样品分离培养前,一般需要将菌液进行
(3)上述步骤筛选的菌株分别接种到含“花生油”的琼脂培养基中,37℃恒温培养箱中培养24h,筛选出油脂降解菌,培养基中“花生油”主要为菌种繁殖提供
(4)实际操作中,由于油脂易聚集成液滴,常在培养基中加入2-3滴乳化剂使油脂分散均匀,鉴定效果更好,试分析原因
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解题方法
【推荐2】某中学杨老师自制大蒜提取液,希望这种简便、经济的提取液能够高效地杀灭餐具上的细菌,杨老师完成了下面的探究实验:
(1)制作提取液:杨老师将大蒜榨汁后制成提取液,具体做法如下表所示。请根据表中数据,在表中的括号内填出1#提取液应加入的冷开水量:
使用方法:将餐具浸泡在提取液中10 min后取出冲洗。
(2)样品抽取:将经过___ 处理的滤纸贴在餐具表面1 min,然后将滤纸放到50 mL无菌水中,充分振荡后制成原液。再取1 mL原液加入___ mL无菌水中摇匀制成10倍稀释液。
(3)分离及培养:用___ 法分离细菌。分别取1 mL原液和10倍稀释液,分别加到伊红-美蓝培养基中,用灭菌、消毒后的___ (用具),将原液和10倍稀释液均匀涂布到整个平板上。每个浓度各做三个培养皿,其目的是___ 。
本实验另设1 mL无菌水涂布在未接种的培养皿上为空白对照,原因是排除_______________________ 。
最后在37 ℃下培养48 h。
(4)观察记录:设计1#提取液实验组的观察记录表。
(5)结果分析:统计数据,得到消毒前后的菌落总数变化(单位:cfu/cm2,每平方厘米样品中含有的细菌群落总数)
根据消毒前后的数据可知:_________________________________________________________________ 。
2#提取液效果高于1#,分析可能的原因:______________________________________________________ 。
请你给杨老师提出需要进一步研究的问题:___________________________________________________ 。
(1)制作提取液:杨老师将大蒜榨汁后制成提取液,具体做法如下表所示。请根据表中数据,在表中的括号内填出1#提取液应加入的冷开水量:
大蒜提取液编号 | 1# | 2# |
大蒜(g) | 350 | 350 |
冷开水(mL) | () | 880 |
无色食醋(mL) | / | 20 |
制备量 | 1 000 mL | 1 000 mL |
(2)样品抽取:将经过
(3)分离及培养:用
本实验另设1 mL无菌水涂布在未接种的培养皿上为空白对照,原因是排除
最后在37 ℃下培养48 h。
(4)观察记录:设计1#提取液实验组的观察记录表。
(5)结果分析:统计数据,得到消毒前后的菌落总数变化(单位:cfu/cm2,每平方厘米样品中含有的细菌群落总数)
编号 | 条件 | 总份数 | <1 | 1~10 | 10~102 | 102~103 | 103~104 | >104 |
1#提 取液 | 消毒前 | 30 | 0 | 0 | 0 | 3 | 18 | 9 |
消毒后 | 30 | 14 | 12 | 4 | 0 | 0 | 0 | |
2#提 取液 | 消毒前 | 33 | 2 | 0 | 0 | 3 | 12 | 16 |
消毒后 | 33 | 19 | 10 | 4 | 0 | 0 | 0 |
2#提取液效果高于1#,分析可能的原因:
请你给杨老师提出需要进一步研究的问题:
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非选择题-解答题
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适中
(0.65)
名校
【推荐3】反硝化细菌广泛分布于土壤、厩肥和污水中。在无氧条件下,可以将硝态氮转化为氮气,该过程消耗氢离子,主要应用于污水处理,其中水产养殖污水处理应用最为广泛。科研人员利用了如图所示的流程从水产养殖污水中筛选分离出活性较高的反硝化细菌(目的菌),用于提高工业污水的脱氮效率(BTB培养基初始pH=6.8,BTB是酸碱指示剂,在酸性条件下为黄色,在中性条件下为绿色,在碱性条件下为蓝色)。回答下列问题。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/5/5/702b5299-4b9d-447a-b000-a12391d2eec9.png?resizew=620)
注:每次稀释时倍数均为10.
(1)图中①过程,锥形瓶内无菌稀释液的体积为__________ 。
(2)图中②过程,对所用BTB培养基常采用_________ 法进行灭菌;常用的接种方法有_________ ;接种后,平板应倒置于恒温、无氧的培养箱中进行培养,倒置的目的是_________ ;提供无氧环境的原因是_________ 。
(3)从BTB培养基上挑选目的菌时,应选择菌落周围为蓝色的单菌落在固体培养基上进行划线分离,以获得纯种目的菌,选择菌落周围为蓝色的单菌落的依据是__________ 。
(4)对目的菌进行临时保藏时,可将目的菌放在4 ℃的冰箱中保藏。这种保藏方式的缺点是_____ 。
(5)从图中第3支试管(从左向右数)中吸取稀释液,向每个牛肉膏蛋白胨固体平板上涂布0.1 mL稀释液,共制作4个平板,培养适宜时间后,平板上出现的菌落数依次为122、119、121、118,则每克污泥样品中微生物数量为__________ 个。
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注:每次稀释时倍数均为10.
(1)图中①过程,锥形瓶内无菌稀释液的体积为
(2)图中②过程,对所用BTB培养基常采用
(3)从BTB培养基上挑选目的菌时,应选择菌落周围为蓝色的单菌落在固体培养基上进行划线分离,以获得纯种目的菌,选择菌落周围为蓝色的单菌落的依据是
(4)对目的菌进行临时保藏时,可将目的菌放在4 ℃的冰箱中保藏。这种保藏方式的缺点是
(5)从图中第3支试管(从左向右数)中吸取稀释液,向每个牛肉膏蛋白胨固体平板上涂布0.1 mL稀释液,共制作4个平板,培养适宜时间后,平板上出现的菌落数依次为122、119、121、118,则每克污泥样品中微生物数量为
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