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题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:452 题号:16961101
某科研团队利用农杆菌转化法将抗除草剂基因导入甘蓝,过程如图所示,①~④为操作步骤,限制酶BamH I、Bgl II、EcoR I酶切位点唯一,BamH I和EcoR I之间的距离为20kb,BamH I和Bgl II之间距离为25kb,识别序列和切割位点如表所示。请回答:

限制酶

识别序列和切割位点

BamH I

—GGATCC—

Bgl II

—AGATCT—

EcoR I

—GAATTC—


(1)基因表达载体包括了启动子、终止子及抗生素抗性基因等,其中终止子的作用______。步骤②和③的目的是______,步骤④的培养基中添加______以便筛选出含目的基因的甘蓝植株。
(2)目的基因用BamH I和Bgl II剪切,质粒用BamH I剪切,剪切后的目的基因和质粒能连接在一起,原因是______。酶切后的目的基因存在正向与反向两种连接方式,可用______酶对两种重组质粒进行剪切,通过凝胶电泳分析产物大小进行区分,如图所示,图中______(填“样品1”或“样品2”)为所需基因表达载体。
(3)若要检测甘蓝是否具有抗除草剂的性状,还需要进行个体水平的检测。请以甘蓝的生长状况为检测指标,设计实验方案,简要写出实验思路:______

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(1)转基因过程用到的工具酶有_____;含目的基因的载体除包括目的基因外,还必须有_____及标记基因等;方法C是_____技术。
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(3)图中的A和B分别表示_____过程,A中的培养液除一些无机盐和有机盐外,还需添加维生素、激素、_____等营养成分,以及血清等物质。
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(1)过程①中不用限制酶NotI的原因是___________。GhMnaA2的序列中包含内含子等序列,可增大重组质粒的分子量,使导入效率降低,请提出一个解决此问题的方案:___________
(2)过程②中在培养基中添加___________可将含有重组质粒的农杆菌筛选出来。反义表达载体T-DNA区段的___________片段整合到棉花细胞的染色体中,并在翻译过程中起作用。
(3)过程③中目的基因导入棉花细胞后,可采用___________技术从分子水平上检测目的基因是否插入染色体;个体水平上的检测为___________
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2023-01-14更新 | 1197次组卷
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(1)图1方框中的三个碱基为NGG(N可为任何碱基),若该序列缺失,Cas9核酸酶将无法完成切割,该序列作用是_____________。结合图1分析,碱基序列中虚线代表_____________,从表达结果看,敲除基因会导致_____________。该基因敲除导致的变异类型属于_____________
(2)为探究ZmCCT9基因的表达模式,研究人员测定玉米发育过程中不同部位ZmCCT9表达量(图2),结果表明_____________。还测定在LD和SD下温带玉米和热带玉米的成熟叶片中ZmCCT9的昼夜表达量(图3),结果显示,在LD条件下,_____________

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①据此推测,TE元件的功能是_____________。为证明TE元件的功能,需利用相关载体和元件构建LUC基因(一种荧光素酶基因)表达载体,图4长方框中构建的相关元件的先后位置是_____________(用图中字母排序)。

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2024-03-21更新 | 544次组卷
共计 平均难度:一般