苏云金芽孢杆菌的CryIAC基因编码一种蛋白质,该蛋白可杀死鳞翅目昆虫。研究者将CryIAC基因转入玉米中,并对玉米抗性进行鉴定和遗传分析。
(1)下图为苏云金芽孢杆菌内CryIAC基因所在DNA复制及控制多肽合成的过程,在玉米细胞内,核基因控制的该过程发生在同一场所的是_____ (填序号)。过程①需要_____ 催化,完成③时,一般在一条mRNA上会结合多个核糖体,其意义是_____ 。
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(2)将从苏云金芽孢杆菌细胞内获取的CryIAC基因与质粒结合构建_____ ,然后用_____ 法导入普通玉米中,获得T0代植株。
(3)对不同株系植株进行PCR检测,结果如下图。1号为_____ 检测结果。将_____ 接种(施放)于不同株系植株,以_____ 占叶片总面积的百分率作为抗虫能力参数,筛选抗虫的阳性植株。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/10/21/3bd7c1bd-fdcd-47ba-ad4c-8495ea98ac3d.png?resizew=407)
(4)T0代4号植株表现为非抗虫,但PCR检测结果为_____ ,可能的原因是_____ (选填选项前的符号)。
a、CryIAC基因突变 b、CryIAC基因所在染色体片段缺失
c、CryIAC基因表达效率太低 d、CryIAC基因未导入
(5)将T0代2号植株与普通玉米杂交获得T1代,对T1代进行抗虫鉴定,结果发现抗虫玉米与非抗虫玉米的比值约为3:1.推测导入的CryIAC基因位于_____ 上,其遗传遵循_____ 定律。T0代2号玉米自交,子代的性状分离比为_____ 。
(1)下图为苏云金芽孢杆菌内CryIAC基因所在DNA复制及控制多肽合成的过程,在玉米细胞内,核基因控制的该过程发生在同一场所的是
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(2)将从苏云金芽孢杆菌细胞内获取的CryIAC基因与质粒结合构建
(3)对不同株系植株进行PCR检测,结果如下图。1号为
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(4)T0代4号植株表现为非抗虫,但PCR检测结果为
a、CryIAC基因突变 b、CryIAC基因所在染色体片段缺失
c、CryIAC基因表达效率太低 d、CryIAC基因未导入
(5)将T0代2号植株与普通玉米杂交获得T1代,对T1代进行抗虫鉴定,结果发现抗虫玉米与非抗虫玉米的比值约为3:1.推测导入的CryIAC基因位于
更新时间:2022-10-21 22:35:05
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【推荐1】【选修3现代生物科技专题】
随着生物科技的不断发展,人们可以获得很多非常需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2012/2/9/1578140800581632/1578140801359872/STEM/b0f9eb9b0e3e47b096e9eab207b00f6d.png?resizew=493)
(1)在培育转生长激素基因牛过程中,②过程常用的方法是_____ ,早期的基因工程都用原核细胞作为受体细胞的原因是_____ 。
(2)转生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,在基因表达载体中,人生长激素基因的首端必须含有_____ ,其作用是能够被_____ 识别并结合从而启动转录。
(3)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅱ最可能是_____ 细胞,Ⅲ代表的细胞具有_____ 的特点。
(4)在抗虫棉培育过程中,④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞,与采用叶肉细胞相比较,其优点是_____ ,⑤过程培养基中需要加入_____ 激素。
随着生物科技的不断发展,人们可以获得很多非常需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题:
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(1)在培育转生长激素基因牛过程中,②过程常用的方法是
(2)转生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,在基因表达载体中,人生长激素基因的首端必须含有
(3)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅱ最可能是
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(0.65)
【推荐2】1型糖尿病是因免疫系统将自身胰岛素作为抗原识别而引起的自身免疫病。小肠黏膜长期少量吸收胰岛素抗原,能诱导免疫系统识别该抗原后应答减弱,从而缓解症状。科研人员利用1型糖尿病模型小鼠进行动物实验,使乳酸菌在小鼠肠道内持续产生人胰岛素抗原,为此构建重组表达载体,技术路线如下。据图回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/2/2/3166257739497472/3166841390768128/STEM/866756ff027c4f6dbab49362720790d7.png?resizew=470)
(1)为使人胰岛素在乳酸菌中高效表达,需改造其编码序列。下图是改造前后人胰岛素B链编码序列的起始30个核苷酸序列。据图分析,转录形成的mRNA中,该段序列所对应的片段内存在碱基替换的密码子数有_____ 个。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/2/2/3166257739497472/3166841390768128/STEM/da8ace329fd945b9a8dd3d04071bb5d5.png?resizew=376)
(2)在人胰岛素A、B肽链编码序列间引入一段短肽编码序列,确保等比例表达A、B肽链。下列有关分析正确的是_____(多选)。
(3)在重组表达载体中,SacⅠ和XbaⅠ限制酶仅有图示的酶切位点。用这两种酶充分酶切重组表达载体,可形成_____ 种DNA片段。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/2/2/3166257739497472/3166841390768128/STEM/866756ff027c4f6dbab49362720790d7.png?resizew=470)
(1)为使人胰岛素在乳酸菌中高效表达,需改造其编码序列。下图是改造前后人胰岛素B链编码序列的起始30个核苷酸序列。据图分析,转录形成的mRNA中,该段序列所对应的片段内存在碱基替换的密码子数有
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(2)在人胰岛素A、B肽链编码序列间引入一段短肽编码序列,确保等比例表达A、B肽链。下列有关分析正确的是_____(多选)。
A.引入短肽编码序列不能含终止子序列 |
B.引入短肽编码序列不能含终止密码子编码序列 |
C.引入短肽不能改变A链氨基酸序列 |
D.引入短肽不能改变原人胰岛素抗原性 |
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【推荐3】科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的实线箭头表示相关限制酶的酶切位点,虚线箭头表示转录的方向。请分析回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/4/1/2690210685984768/2692476484714496/STEM/ccc21cee-080c-419f-9d79-e55f7f31b175.png)
(1)在该过程中,研究人员首先获取了抗盐基因(目的基因),并采用______________ 技术对目的基因进行扩增,该技术需要的条件是______________ 、Taq酶、原料、模板。
(2)用图中的质粒和目的基因构建重组质粒时,不能使用SmaⅠ酶切割,原因是________ 。图中农杆菌的Ti质粒上的T-DNA具有_____________________ 的特点。
(3)⑤和⑥过程往往需要调控培养基中_____________________ (填激素名称)的比例,该过程的原理是__________________ 。
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,可用放射性同位素标记的__________________ 作探针进行分子杂交检测,还需要在个体水平上鉴定,后者具体过程是______________ 。
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(1)在该过程中,研究人员首先获取了抗盐基因(目的基因),并采用
(2)用图中的质粒和目的基因构建重组质粒时,不能使用SmaⅠ酶切割,原因是
(3)⑤和⑥过程往往需要调控培养基中
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,可用放射性同位素标记的
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名校
【推荐1】以下是有关现代生物科技的两个问题,请回答:
I.下面是与动物细胞工程有关的问题,请分析回答:
(1)在进行动物细胞培养时,首先要将动物组织剪碎,然后用_____ 处理,以使其分散成_____ ,制成细胞悬液。
(2)气体环境中 CO2 的作用是_____ 。
(3)应用于核移植的供体细胞一般选用传代 10 代以内的细胞,原因是 10 代以后细胞可能发生_________ 。
(4)单克隆抗体与常规抗体相比,具有_____ 的特点。单克隆抗体的制备过程需要经过选择性培养获得杂交瘤细胞,还需进行_________ 和_____ ,经过多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
II 转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示,图中 PstI、SmaI、EcoRI,ApaI 等在质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切点。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/4/30/2193684259733504/2198045164445696/STEM/b7d74b8c2f1444ee9e91d2e75ce9a013.png?resizew=536)
(1)若要获得抗病基因,能否用限制酶 SmaI 对图中对应的位点进行切割?_________ 。要获得含抗病基因的重组质粒能否用 PstI、ApaI 限制酶切割质粒?_____ 。
(2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断重组质粒中应含有_____ 基因,作为标记基因。
(3)②、③阶段是否可使用同种培养基?___________ 。
I.下面是与动物细胞工程有关的问题,请分析回答:
(1)在进行动物细胞培养时,首先要将动物组织剪碎,然后用
(2)气体环境中 CO2 的作用是
(3)应用于核移植的供体细胞一般选用传代 10 代以内的细胞,原因是 10 代以后细胞可能发生
(4)单克隆抗体与常规抗体相比,具有
II 转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示,图中 PstI、SmaI、EcoRI,ApaI 等在质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切点。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/4/30/2193684259733504/2198045164445696/STEM/b7d74b8c2f1444ee9e91d2e75ce9a013.png?resizew=536)
限制酶 | PstI | SmaI | EcoRI | ApaI |
识别序列 及酶切位点 | —CTGCA↓G— —G↑ACGTC— | —CCC↓GGG— —GGG↑CCC— | —G↓AATTC— —CTTAA↑G— | —GGGCC↓C— —C↑CCGGG— |
(1)若要获得抗病基因,能否用限制酶 SmaI 对图中对应的位点进行切割?
(2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断重组质粒中应含有
(3)②、③阶段是否可使用同种培养基?
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【推荐2】白叶枯病是造成我国重要粮食作物——水稻严重减产的重要原因之一。某科研团队将白叶枯病抗性基因Xa21与质粒重组(图1),利用人工破损处理的水稻幼苗细胞借助根癌农杆菌转化法获得抗白叶枯病的水稻品种,其中根癌农杆菌侵染植物细胞过程如图2所示,已知不同种限制酶识别序列不同。请回答:_____ 端分别添加了_____ 两种限制酶的识别序列,在构建图1基因表达载体时,这两种限制酶能确保Xa21基因定点插入到Ti质粒的_____ 。
(2)Ti质粒中除图中包含的构件外还应必备的构件有_____ 。可利用_____ 检测Xa2l基因基因是否导入成功。
(3)由图2可知,水稻幼苗细胞受损后会产生某些信号分子,用于吸引农杆菌移向受损水稻,这些信号分子可能是_____ (A、秋水仙素; B、酚类化合物;C、乙酰胆碱),信号传导到根癌农杆菌细胞内激活了Ti质粒上的Vir区中的多个基因表达,其表达的蛋白质的功能有_____ (至少写出两点)。农杆菌细胞内形成的成熟T复合体借助细胞膜上的通道复合体定向进入水稻幼苗细胞,最终目标是_____ 。
(4)将含白叶枯病抗性基因Xa21的水稻幼苗细胞经过_____ 技术可发育成幼苗。经检测,科研人员发现部分获得Xa21基因的水稻幼苗不具有抗白叶枯病的能力,原因可能是_____ 。
(2)Ti质粒中除图中包含的构件外还应必备的构件有
(3)由图2可知,水稻幼苗细胞受损后会产生某些信号分子,用于吸引农杆菌移向受损水稻,这些信号分子可能是
(4)将含白叶枯病抗性基因Xa21的水稻幼苗细胞经过
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【推荐3】中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)能够高效表达外源基因。科学研究中常使用重组CHO细胞(导入了重组载体的CHO细胞)大量生产外源蛋白,一般步骤为:Ⅰ.长期传代培养,获得大量重组细胞;Ⅱ.批式培养,获得大量外源蛋白。
(1)体外培养动物细胞的基本培养液(BM)中除抗生素和一般营养物质外,还应含有____ 。在培养过程中还需要一定的气体环境,其中CO2的主要作用是____ 。
(2)为了获得能生产抗体A的重组CHO细胞,需要将含有抗体A基因的重组载体通过____ 法导入CHO细胞,经筛选获得重组CHO细胞。
(3)研究发现,酵母抽提物(YE)在动物细胞培养和促进蛋白质表达中具有重要作用。为确定YE在不同培养阶段的使用策略,研究人员进行了下列实验。
①图1所示实验探究了在长期传代培养阶段____ 对重组CHO细胞增殖以及抗体A表达量的影响。通过细胞计数和计算得出实验结果如图2所示,结果说明____ 。此处理对后续批式培养中的细胞增殖及单个细胞的抗体产量基本无影响。____ 和____ 进行培养。结果表明,抗体A的总产量随着 YE 浓度的提高而增加。
③综上所述,为提高抗体A的总产量,整个培养过程中对YE的使用策略是____ 。
(1)体外培养动物细胞的基本培养液(BM)中除抗生素和一般营养物质外,还应含有
(2)为了获得能生产抗体A的重组CHO细胞,需要将含有抗体A基因的重组载体通过
(3)研究发现,酵母抽提物(YE)在动物细胞培养和促进蛋白质表达中具有重要作用。为确定YE在不同培养阶段的使用策略,研究人员进行了下列实验。
①图1所示实验探究了在长期传代培养阶段
③综上所述,为提高抗体A的总产量,整个培养过程中对YE的使用策略是
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【推荐1】黑曲霉是一种丝状真菌,其代谢产物广泛应用于食品加工等领域。回答下列问题:
(1)黑曲霉的PDA液体产酶培养基组成为:麸皮、豆粉饼、(NH4)2SO4、MgSO4·7H2O、KH2PO4,培养时需要通气振荡,由此可知黑曲霉的代谢类型为___________ ;豆粉饼可提供黑曲霉生长所需的___________ ;若要分离黑曲霉菌落,上述培养基中还需要添加___________ ,在培养基灭菌前需将pH调至___________ (填“酸性”“中性”或“碱性”)。
(2)计数黑曲霉菌液孢子浓度的方法为:用多层纱布过滤黑曲霉培养液得到孢子悬浮液,取1mL悬浮液用无菌水逐级稀释104倍,再取稀释液滴加至血细胞计数板(规格为1mm×1mm×0.1mm,由400个小格组成)进行计数,统计得到计数的小格中平均孢子数为2个,则黑曲霉培养液中孢子浓度为___________ 个·mL-1。
(3)以大豆为主要原料,利用黑曲霉产生的蛋白酶可将原料中的蛋白质水解成___________ ,然后经淋洗、调制可得到酱油。
(4)黑曲霉发酵产生的柠檬酸是一种使用广泛的食品酸度调节剂。研究表明,几丁质酶基因chsC沉默与黑曲霉的菌丝形态和柠檬酸的产量有一定的相关性。利用基因工程技术构建干扰chsC基因表达的载体并导入黑曲霉菌体内,上述操作的步骤为:①首先从黑曲霉中提取DNA作为模板,利用___________ 技术扩增出chsC基因;构建chsC基因表达的干扰载体时需要用到的工具有___________ ;需要将chsC基因___________ (填“正向”或“反向”)插入到启动子和终止子之间,以保证转录出的RNA和chsC基因正常转录的mRNA互补成双链,从而干扰几丁质酶的合成。
②最终可通过___________ 法鉴定转基因黑曲霉菌体培育是否成功。
(1)黑曲霉的PDA液体产酶培养基组成为:麸皮、豆粉饼、(NH4)2SO4、MgSO4·7H2O、KH2PO4,培养时需要通气振荡,由此可知黑曲霉的代谢类型为
(2)计数黑曲霉菌液孢子浓度的方法为:用多层纱布过滤黑曲霉培养液得到孢子悬浮液,取1mL悬浮液用无菌水逐级稀释104倍,再取稀释液滴加至血细胞计数板(规格为1mm×1mm×0.1mm,由400个小格组成)进行计数,统计得到计数的小格中平均孢子数为2个,则黑曲霉培养液中孢子浓度为
(3)以大豆为主要原料,利用黑曲霉产生的蛋白酶可将原料中的蛋白质水解成
(4)黑曲霉发酵产生的柠檬酸是一种使用广泛的食品酸度调节剂。研究表明,几丁质酶基因chsC沉默与黑曲霉的菌丝形态和柠檬酸的产量有一定的相关性。利用基因工程技术构建干扰chsC基因表达的载体并导入黑曲霉菌体内,上述操作的步骤为:①首先从黑曲霉中提取DNA作为模板,利用
②最终可通过
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【推荐2】我国有近一亿公顷的盐碱地,大部分植物无法在此生存,而耐盐植物藜麦却能生长。通过研究藜麦叶片结构后发现,其表皮有许多盐泡细胞,该细胞体积是普通表皮细胞的100倍以上,里面没有叶绿体,Na+和Cl-在盐泡细胞的转运如下图所示。请回答问题。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/8/17/3046519793057792/3046696565350400/STEM/1ce5415830f34ada8e79452b87eced31.png?resizew=543)
(1)据图推测,藜麦的耐盐作用机制是通过_________ 的方式,将Na+和Cl-运送到表皮盐泡细胞的________ (细胞器)中储存起来,从而避免高盐对其他细胞的影响。
(2)下表为藜麦盐泡细胞和其他几种普通植物的叶肉细胞膜中部分蛋白的相对表达量。其中______ (填下列选项字母)更可能是藜麦,理由是_____________ 。
(3)藜麦根系从土壤中吸收盐分是主动运输还是被动运输?有同学设计实验进行了探究。
①实验步骤:
a.取甲、乙两组生长发育基本相同的藜麦幼苗植株,放入适宜浓度的含有Na+、Cl-的溶液中。
b.甲组给予正常的细胞呼吸条件,乙组加入______________ 。
c.一段时间后测定两组植株根系对Na+、Cl-的吸收速率。
②预测实验结果及结论:若乙组__________________ ,说明藜麦从土壤中吸收盐分的方式是主动运输。
(4)研究人员尝试将藜麦中的耐盐基因转移到其他植物体内,从而培育新型耐盐植物。若要从分子水平上检测耐盐基因是否成功转入受体细胞,请写出常用的检测方法____________________________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/8/17/3046519793057792/3046696565350400/STEM/1ce5415830f34ada8e79452b87eced31.png?resizew=543)
(1)据图推测,藜麦的耐盐作用机制是通过
(2)下表为藜麦盐泡细胞和其他几种普通植物的叶肉细胞膜中部分蛋白的相对表达量。其中
A | B | C | D | |
Na+载体蛋白 | 8 | 12 | 5 | 11 |
Cl-载体蛋白 | 2 | 6 | 4 | 6 |
葡萄糖转运蛋白 | 38 | 28 | 66 | 68 |
(3)藜麦根系从土壤中吸收盐分是主动运输还是被动运输?有同学设计实验进行了探究。
①实验步骤:
a.取甲、乙两组生长发育基本相同的藜麦幼苗植株,放入适宜浓度的含有Na+、Cl-的溶液中。
b.甲组给予正常的细胞呼吸条件,乙组加入
c.一段时间后测定两组植株根系对Na+、Cl-的吸收速率。
②预测实验结果及结论:若乙组
(4)研究人员尝试将藜麦中的耐盐基因转移到其他植物体内,从而培育新型耐盐植物。若要从分子水平上检测耐盐基因是否成功转入受体细胞,请写出常用的检测方法
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【推荐3】研究表明,服用α-干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。人参是一种名贵药材,具有较好的滋补作用。限制酶的发现为DNA的切割和功能基因的获得创造了条件。限制酶Sau3A、EcoRⅠ、BamHⅠ的识别序列及切割位点分别为↓GATC、G↓AATTC、G ↓GATCC。含干扰素基因的DNA片段如图1所示,图2为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程图,①~④表示相关的操作。请回答下列问题:
(1)结合上图,在构建基因表达载体时,为克服目的基因和农杆菌Ti质粒的自身环化以及目的基因与质粒的任意连接等,应选择用限制酶__________ 处理含某目的基因的DNA和质粒。
(2)DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是__________ 。
(3)图2操作①常利用PCR技术获取和扩增干扰素基因,除含有干扰素基因的DNA片段之外,该过程需要提供__________ 以及与干扰素基因两端两条模板链结合的两种引物。设计引物时,为了保证目的基因与质粒顺利连接,防止出现自身环化连接,需要在两种引物的一端分别加上EcoRI和BamHI的识别序列__________ 。
(4)图2步骤②除EcoRI、BamHI两种酶外,还需要用__________ 酶。构建的基因表达载体除含有目的基因片段以外,还必须有__________ ,以保证干扰素基因能在人参愈伤组织细胞中稳定存在和表达。同时,还应含有标记基因以便于__________ 。
(5)图2操作④常用__________ 技术检测干扰素基因是否成功表达出干扰素。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/6/6/28973efd-8616-43b3-87f5-ea94f9774e99.png?resizew=291)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/6/6/1dff95ec-bee9-4785-8b0d-b76f7bbbde12.png?resizew=648)
(1)结合上图,在构建基因表达载体时,为克服目的基因和农杆菌Ti质粒的自身环化以及目的基因与质粒的任意连接等,应选择用限制酶
(2)DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是
(3)图2操作①常利用PCR技术获取和扩增干扰素基因,除含有干扰素基因的DNA片段之外,该过程需要提供
(4)图2步骤②除EcoRI、BamHI两种酶外,还需要用
(5)图2操作④常用
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