苯酚是重要的化工原料,被广泛应用于酚醛树脂、炼油、焦碳、染料等的生产中,并成为这些工业废水中的主要污染物。水溶液中的苯酚可被皮肤吸收而引起中毒,含酚废水可使水中生物大量死亡。活性污泥中的微生物作为废水处理的主体,是 有毒物质分解转化的主要执行者。回答下列问题:
(1)欲选出高效分解苯酚的菌株,应从_______ 中取样,接着在_______ (填固体或液体)培养基中选择培养,目的是_______ 。对培养基进行灭菌处理时,应采 用_______ 法。
(2)某同学采用稀释涂布平板法对高效分解苯酚的菌株进行计数,其原理是_______ 。
(3)在3个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为103的稀释液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的菌落数分别为:108、114和120,因此可得出1mL初始菌液中的活菌数为_______ 个。使用血细胞计数板计数时,为了区分活菌和死菌可采用台盼蓝染色,对活菌计数时应选择 视野中_______ 的细胞进行计数。
(4)分解苯酚的关键酶是苯酚羟化酶。苯酚羟化酶经分离纯化,可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定,该方法可使电泳迁移率完全取决于_______ 。生产上常常把苯酚羟化酶固定化后使用,研究发现不能用同一种技术来固定化苯酚羟化酶和其它所有酶,可能的原因是_______ (答出两点即可)。
(1)欲选出高效分解苯酚的菌株,应从
(2)某同学采用稀释涂布平板法对高效分解苯酚的菌株进行计数,其原理是
(3)在3个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为103的稀释液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的菌落数分别为:108、114和120,因此可得出1mL初始菌液中的活菌数为
(4)分解苯酚的关键酶是苯酚羟化酶。苯酚羟化酶经分离纯化,可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定,该方法可使电泳迁移率完全取决于
更新时间:2022-11-12 21:06:09
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【推荐1】醪糟是以糯米为主要原料,利用微生物发酵制作的民间传统食品。在醪糟发酵过程中起主要作用的是甜酒曲中的好氧霉菌、酵母菌和乳酸菌。醪糟的生产流程如下:糯米的选择→淘洗→浸泡→蒸饭→冷却→拌甜酒曲→发酵→煮沸→保存。回答下列问题:
(1)霉菌产生的______ 能将糯米中的淀粉分解为葡萄糖等,使醪糟具有甜味;酵母菌使醪糟产生酒味的化学反应式是_____________________ ;乳酸菌是______ (填“真核”或“原核”)生物,其发酵产物是醪糟酸味的主要来源。
(2)拌入甜酒曲之前,需将蒸熟的糯米进行冷却,目的是___________________ 。发酵前期应保证氧气的供应,使______ 大量繁殖;后期应减少空气进入或隔绝空气,有利于______ 。
(3)发酵好的醪糟煮沸后,可转移到灭菌玻璃瓶中密封保存,密封之前应对瓶口进行______ 灭菌,防止瓶口被污染。
(1)霉菌产生的
(2)拌入甜酒曲之前,需将蒸熟的糯米进行冷却,目的是
(3)发酵好的醪糟煮沸后,可转移到灭菌玻璃瓶中密封保存,密封之前应对瓶口进行
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名校
【推荐2】测定水样是否符合饮用水卫生标准,常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示,滤膜法的大致流程:用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基(EMB培养基)上培养→统计菌落数目。据图回答问题:
(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶,其中需要进行灭菌处理的是________ 。与过滤有关的操作都要在________________ 进行。
(2)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上,这属于微生物培养中的________ 操作,从物理状态角度分析,EMB培养基属于________ 培养基。
(3)某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定,无菌操作下将10ml待测水样加入到90ml无菌水中,稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124,黑色菌落数平均为31,则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为________ 个。
(4)该同学进一步思考,利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样,一份待测水样来自变酸的果酒,从中检测到两种微生物,它们在结构上的主要区别是________ ,另一份来自昌源河,若要通过测量蓝藻的数目来研究水华,应更换上述过滤装置中的滤膜,为了减少细菌的干扰,应选择孔径________ (填“更小”或“不变”或“更大”)的滤膜。
(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶,其中需要进行灭菌处理的是
(2)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上,这属于微生物培养中的
(3)某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定,无菌操作下将10ml待测水样加入到90ml无菌水中,稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124,黑色菌落数平均为31,则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为
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【推荐3】为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:
(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干__________ 后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是_____________ ;然后,将 1mL 水样稀释 1000 倍,在 3 个平板上用涂布法分别接入 0.1mL 稀释液;经适当培养后,3 个平板上的菌落数分别为 39、38 和 37。据此可得出每升水样中的活菌数为_____________ 。
(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过______ 灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是________________ 。
(3)示意图 A 和 B 中,________ 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
(4)另一小组同学为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
注:“+”表示有,“-”表示无。
据表判断,培养基甲_________ (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌;培养基乙_________ (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌。
(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干
(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过
(3)示意图 A 和 B 中,
(4)另一小组同学为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
酵母膏 | 无机盐 | 淀粉 | 纤维素粉 | 琼脂 | 刚果红 | 水 | |
培养基甲 | + | + | + | + | - | + | + |
培养基乙 | + | + | + | - | + | + | + |
注:“+”表示有,“-”表示无。
据表判断,培养基甲
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【推荐1】某研究小组对酸奶中乳酸菌数量进行了测定,取6支灭菌试管,分别加入9mL灭菌水,标号为A1、A2、A3、A4、A5、A6,吸取1mL酸奶样液加入试管A1中,混合均匀;然后从A1中吸取1mL溶液,加入A2中,混合均匀;重复上述操作,最后从试管A6中取0.1mL样液进行涂布计数。涂布三个平板,其菌落数分别为251、265、276个。请回答下列问题:
(1)该小组在取样涂布前,随机取若干灭菌后未接种平板先行培养一段时间,这样做的目的是________ 。
(2)在制备乳酸菌培养基过程中,倒平板时培养基温度不能太低,原因是___________ ;待平板冷凝后,要将平板倒置,其目的是___________ 。
(3)根据三个平板中菌落数,可推测原酸奶中乳酸菌浓度为___________ 个/mL,该方法测定的乳酸菌含和实际值相比偏小的原因是______________________ 。
(4)该小组在探究橘皮精油对乳酸菌抑制作用时,提取橘皮精油采用___________ 法而不用蒸馏法,原因是______________________ 。抑菌实验时,在长满乳酸菌平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈,可通过___________ 来判断抑菌效果。
(1)该小组在取样涂布前,随机取若干灭菌后未接种平板先行培养一段时间,这样做的目的是
(2)在制备乳酸菌培养基过程中,倒平板时培养基温度不能太低,原因是
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(4)该小组在探究橘皮精油对乳酸菌抑制作用时,提取橘皮精油采用
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【推荐2】某种物质S(一种含有C、H、N有机物)难以降解,会对环境造成污染,只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基,甲的组分为无机盐、水和S,乙的组分为无机盐、水、S和Y。
回答下列问题:
(1)实验时,盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________ 的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______ 。甲、乙培养基均属于_________ 培养基。
(2)在步骤⑤的筛选过程中,发现当培养基中的S超过某一浓度时,某菌株对S的降解量反而下降,其原因可能是___________________________ (答出1点即可)。
(3)上述实验中,甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同,但都能为细菌的生长提供4类营养物质,即___________________ 。
(4)若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数,请写出主要实验步骤____________ 。
回答下列问题:
(1)实验时,盛有水或培养基的摇瓶通常采用
(2)在步骤⑤的筛选过程中,发现当培养基中的S超过某一浓度时,某菌株对S的降解量反而下降,其原因可能是
(3)上述实验中,甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同,但都能为细菌的生长提供4类营养物质,即
(4)若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数,请写出主要实验步骤
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【推荐3】厨余废水中脂肪含量高,为了筛选出能快速分解脂肪的微生物。研究人员进行了“厨余废水取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养”系列操作。请回答:
(1)选择培养的目的是_______ ,需制备以_______ 为唯一碳源的液体培养基,使用液体培养基的优点是_______ 。
(2)采用稀释倍数适宜的培养液进行_______ 方法接种,目的是在固体培养基上形成_______ 菌落。培养时需将培养皿倒过来放置,防止_______ ,以免造成污染。
(3)在鉴别培养过程中,向培养基内加入中性红溶液,中性红溶液是一种脂肪水解指示剂,在弱酸性下呈红色,弱碱性下呈黄色。选取_______ 的菌落,即为目标菌,判断的理由是_______ 。
(1)选择培养的目的是
(2)采用稀释倍数适宜的培养液进行
(3)在鉴别培养过程中,向培养基内加入中性红溶液,中性红溶液是一种脂肪水解指示剂,在弱酸性下呈红色,弱碱性下呈黄色。选取
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【推荐1】琼脂是制备固体培养基必需的材料,避免污染环境,实验室使用过的废弃固体培养基必须经细菌分解才能丢弃。糖蜜发酵废液的黑褐色色素是造成河、湖色泽污染的原因之一,为了脱除这种黑褐色色素,某实验小组从琼脂生产厂附近的土壤中筛选到多株具有脱色能力的琼脂分解菌,其能产生脱色酶,并通过氧化方式进行脱色作用。回答下列问题:
(1)为了筛选可分解琼脂的细菌,在配制培养基时,应选择以_______ 为唯一碳源的固体培养基进行培养。配制好的培养基需通过_______ 法进行灭菌。
(2)实验小组可采用_______ 法分离土壤浸出液中的琼脂分解菌。鉴定琼脂分解菌时,可在培养基中加入_______ ,适宜条件下培养一段时间,发现培养基上形成圆形凹穴,其形成的原因是_______ ;应选择_______ 的菌落进行扩大培养。
(3)进行污染物脱色时,需将琼脂分解菌扩大培养以加速脱色,通过不断增加营养物质的比例能否提高该菌的种群密度,并分析说明原因______________
(4)进行污染物脱色时,可提取琼脂分解菌中的脱色酶固定化后用于脱色,固定化酶的优点有______________ (至少答出两点)。
(1)为了筛选可分解琼脂的细菌,在配制培养基时,应选择以
(2)实验小组可采用
(3)进行污染物脱色时,需将琼脂分解菌扩大培养以加速脱色,通过不断增加营养物质的比例能否提高该菌的种群密度,并分析说明原因
(4)进行污染物脱色时,可提取琼脂分解菌中的脱色酶固定化后用于脱色,固定化酶的优点有
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名校
【推荐2】乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖在工业生产中具有重要价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下图。回答下列问题:
(1)筛选产乳糖酶的微生物L时,培养基中的唯一碳源应该是____________ ,在实验室培养微生物L时,一方面需要为L提供合适的营养和环境条件,另一方面需要__________ ,以获得纯净的培养物。
(2)将微生物L研磨破碎得到提取液后,可采用________________ 法分离纯化其中的乳糖酶,分离过程中,比乳糖酶相对分子质量小的蛋白质,在凝胶中的移动速度比乳糖酶_____________ (填“快”或“慢”),原因是________________________________ 。
(3)工业生产中,若要将乳糖酶固定化,一般_______ (填“适宜”或“不适宜”)采用包埋法原因是______ ,与使用游离酶相比,工业生产中使用固定化酶的优点是_____________________________________ 。
(1)筛选产乳糖酶的微生物L时,培养基中的唯一碳源应该是
(2)将微生物L研磨破碎得到提取液后,可采用
(3)工业生产中,若要将乳糖酶固定化,一般
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名校
【推荐3】新冠肺炎疫情警示人们要养成良好的生活习惯,提高公共卫生安全意识,戴口罩可以减少病原微生物通过飞沫在人与人之间的传播。为加快废弃口罩的处理,避免污染环境,某科研团队准备从土壤中筛选出能高效降解一次性口罩(熔喷布)的细菌(不分解琼脂),请回答下列问题。
(1)培养基的配置和灭菌:根据目标微生物的特性,配置相应的培养基,熔喷布主要成分为聚丙烯纤维(PP,组成仅含有C、H两种元素),用于筛选的固体培养基除需加入经过处理的聚丙烯粉末作为______________ 外,还应加入水、氮源、无机盐和琼脂等。配置好后,进行高压蒸汽灭菌,影响高压蒸汽灭菌效果的因素有____________________________ 等(答出2点即可)。
(2)目的菌的获取、选择、扩大培养:目的细菌大多分布在距地表约5cm~10cm的潮湿土壤层, 因此土壤取样时,一般______________ 。在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂,目的菌的作用可使目的菌落周围出现透明圈,应当选择______________ 的菌落作为目的菌群,接种于液体培养基中再进行扩大培养。
(3)若要测定土壤中能降解一次性口罩(熔喷布)的细菌细胞数,请写出主要实验步骤_________________________________________________ 。
(4)工业化使用:已知目的菌分解PP需要多种酶的共同参与,目的菌比酶分子大得多,工厂化降解PP时,通常采用______________ 法来固定目的菌。影响目的菌降解熔喷布效果的因素有温度、pH以及______________ 等(答出两点即可)。
(1)培养基的配置和灭菌:根据目标微生物的特性,配置相应的培养基,熔喷布主要成分为聚丙烯纤维(PP,组成仅含有C、H两种元素),用于筛选的固体培养基除需加入经过处理的聚丙烯粉末作为
(2)目的菌的获取、选择、扩大培养:目的细菌大多分布在距地表约5cm~10cm的潮湿土壤层, 因此土壤取样时,一般
(3)若要测定土壤中能降解一次性口罩(熔喷布)的细菌细胞数,请写出主要实验步骤
(4)工业化使用:已知目的菌分解PP需要多种酶的共同参与,目的菌比酶分子大得多,工厂化降解PP时,通常采用
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【推荐1】血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中O2或CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。
(1)洗涤红细胞的目的是__________ ,洗涤干净的标志是______________ 。
(2)图中A过程是_________ ,在此过程中起作用的是____________ 。操作时,应将烧杯置于_______ 充分搅拌,加速红细胞的破裂。
(3)透析的作用是_________ ,透析时用PH为7,物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液的作用是___________ 。
(4)凝胶色谱法是根据_______________ 而分离蛋白质的方法。装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存在,原因是____________________ 。
(1)洗涤红细胞的目的是
(2)图中A过程是
(3)透析的作用是
(4)凝胶色谱法是根据
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【推荐2】在食品化工等领域,酶的使用已经非常普遍,回答下列相关问题:
(1)用凝胶色谱法将纤维素酶与其它杂蛋白分离时,先洗脱下来的是相对分子质量较________ .(填“大”或“小”)的蛋白质。对生产的纤维素酶进行初步检测,常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,其中SDS的作用是________
(2)与一般酶制剂相比,固定化酶的突出优点是________ 若将纤维素酶进行固定,一般不采用包埋法,原因是________
(3)根据衣物上常见污垢的种类,目前常用的加酶洗衣粉中添加的酶制剂有四类,其中最明显的是________ 和________ ,前者能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成________ ,使污渍容易从衣物上脱落。
(4)高果糖浆可以作为蔗糖的替代品。高果糖浆是指富含________ 的糖浆,这种糖可以由葡萄糖在________ 酶的催化下转化而来。
(5)若要“探究从自然界收集的酵母菌菌株能否利用木糖进行酒精发酵”,请写出实验思路:________ 若有酒精产生,说明这些酵母菌含有________ 的酶。
(1)用凝胶色谱法将纤维素酶与其它杂蛋白分离时,先洗脱下来的是相对分子质量较
(2)与一般酶制剂相比,固定化酶的突出优点是
(3)根据衣物上常见污垢的种类,目前常用的加酶洗衣粉中添加的酶制剂有四类,其中最明显的是
(4)高果糖浆可以作为蔗糖的替代品。高果糖浆是指富含
(5)若要“探究从自然界收集的酵母菌菌株能否利用木糖进行酒精发酵”,请写出实验思路:
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【推荐3】蛋白质提取、分离在分子生物学研究中具有重要意义
(1)蛋白质提取和分离的步骤一般分为____________________________ 。
(2)实验前采取新鲜的猪血,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,目的是_____________ 。若要从红细胞中提取血红蛋白,则要对获得的红细胞进行___________ 、___________ 和分离血红蛋白溶液、透析,才能获得含杂质较少的血红蛋白溶液。
(3)通过____________ 法将样品进一步纯化,经___________ 方法进行纯度鉴定。
(4)在凝胶色谱法制作过程中,装填凝胶柱时,不得有气泡存在,原因是________________ 。
(1)蛋白质提取和分离的步骤一般分为
(2)实验前采取新鲜的猪血,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,目的是
(3)通过
(4)在凝胶色谱法制作过程中,装填凝胶柱时,不得有气泡存在,原因是
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