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题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:268 题号:17974450
异养反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸盐转化为氮(2NO3-+10e-+12H+→…→N2O→N2),该细菌在处理工业污水、治理水体富营养化中具有重要作用。为了筛选出耐高温(42℃)的反硝化细菌菌株,用于提升较高温度的工业污水的脱氮效率,研究人员按照下图的中实验流程进行菌种的筛选研究。回答下列问题:

注:BTB培养基初始pH=6.8;BTB是酸碱指示剂,酸性条件下为黄色,中性条件下为绿色,碱性条件下为蓝色
(1)梯度稀释的目的是________。在试管中加入________对样品进行梯度稀释。
(2)制备BTB培养基时,以________为唯一氨源。稀释后的污泥样品可用________(填方法)接种到BTB培养基上,放在________环境中培养2~3天后,挑选显________色的单菌落在固体培养基上划线分离,获得纯菌株。
(3)将纯菌株接种在液体培养基上培养一段时间,若在培养瓶顶空检测到N2O,即可鉴定为目的菌,而不能依据培养液中硝酸盐的浓度降低来鉴定目的菌,理由是_____________________

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【推荐1】儿茶素(C)是从茶叶中提取的一种天然多酚类化合物,有一定的抗菌作用,但作用较弱。研究人员用稀土离子Yb3+对儿茶素(C)进行化学修饰,形成配合物Yb3+-C,并探究其抗菌效果和机理。
(1)细菌的细胞膜以_________为基本支架,C与细胞膜的亲和力强,可以穿过细胞膜。稀土离子Yb3+可与细菌内的某些酶发生竞争性结合而降低酶的活性,也可水解磷酸二酯键进而损伤细菌的遗传物质__________。但稀土离子与细胞的亲和力较弱,难以到达作用靶点,影响了其抗菌活性。
(2)为确定配合物中Yb3+:C的最佳摩尔比,研究人员利用__________方法将金黄色葡萄球菌接种到培养基上,培养基的成分应包括_________、水、无机盐等。待培养基布满菌落后,用不同摩尔比的Yb3+-C配合物处理滤纸片(1-5)见下表,将其置于培养基中(见下图)一段时间后,可以确定Yb3+:C的最佳摩尔比为_________,理由是__________

编号

Yb3+:C的摩尔比

1

1:1

2

1:2

3

1:3

4

1:4

5

1:5

(3)将金黄色葡萄球菌制成菌悬液,分别加入等量的C、Yb3+和最佳摩尔比的Yb3+-C,测定24h内金黄色葡萄球菌存活数量变化(A600值越大,细菌数量越多),结果见下表。

时间

A600

组别

0h

2h

4h

8h

16h

24h

对照组

0.40

0.40

0.38

0.35

0.35

0.35

C处理

0.40

0.12

0.13

0.07

0.02

0.01

Yb3+处理

0.40

0.14

0.11

0.04

0.02

0.01

Yb3+-C处理

0.40

0.02

0.01

0.01

0.01

0.01

由此得出的结论是__________________
(4)为探究配合物Yb3+-C的抗菌机理,研究人利用透射电镜观察了各组金黄色葡萄球菌细胞内的超微结构,结果如下图。

结果显示:
(a)未加抗菌剂:细菌菌体较小,其细胞质分布均匀;
(b)C处理:细胞壁和细胞膜等结构不光滑,略显粗糙;
(c)Yb3+处理:细胞质出现较明显的固缩及空泡化现象;
(d)Yb3+-C处理:细胞壁及细胞膜等结构发生破裂,细胞质出现了严重的固缩及空泡化现象。
由此可见,儿茶素(C)和Yb3+作用的主要位点分别是__________________,推测Yb³⁺-C具有更强抗菌作用的机理是_________
2024-05-06更新 | 34次组卷
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【推荐2】聚乙烯醇(PVA)为致癌物,是一种有机化合物,化学式为[C2H4O]n,难以降解,存在于化工污水中。请回答下列问题:
(1)科研人员希望筛选出能高效分解PVA的细菌,他们配制的培养基所需的营养物质主要有水、无机盐、__________四类,该培养基以PVA为唯一碳源,原因是________。从功能上分类,该培养基属于__________培养基。
(2)若要对分离得到的PVA分解菌进行计数,应采用____________法进行接种。
(3)科研人员查阅资料发现:PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA,PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物,当PVA被分解时蓝绿色复合物消失,形成白色透明斑。为了进一步鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌,于是他们在培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还加入_________。若培养基上出现____________,则说明该菌可能为PVA分解菌。
(4)科研人员研究过程中在培养基中发现了两种不同的PVA酶,为分离这两种酶他们用到了凝胶色谱法,该方法先洗脱出来的是相对分子质量较大还是较小的酶,原因是什么?______________
2022-01-13更新 | 340次组卷
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【推荐3】回答下列有关生物技术实践的问题。
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(3)某同学尝试微生物接种的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图所示.该同学的接种方法是______;推测该同学接种时可能的操作失误是______
2017-08-14更新 | 71次组卷
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