【推荐1】某研究小组从黄色短杆菌(能合成L-亮氨酸)中筛选L-亮氨酸缺陷型(不能合成L-亮氨酸)突变菌株，实验流程如图所示。回答下列问题：
   
(1)培养基灭菌常用的方法是________。
(2)过程①的接种方法是_________。过程②接种时，先将灭菌后的金丝绒与培养皿A中的菌落接触一次，然后像盖印章一样将菌种连续接种到培养皿B和C的培养基表面，这种接种方法便于将来比较B、C培养皿中菌落的差异，原因是______。
(3)培养皿A、B、C中的培养基都要使用固体培养基，原因是____。若培养皿B的培养基中含有L-亮氨酸，培养皿C的培养基中不含L-亮氨酸，培养一段时间后菌落生长情况如图所示，研究人员应该从培养皿_____(填“B”或“C”)中选取目的菌落，确定目的菌落位置的依据是________。

【推荐2】稻田生物固氮作用是稻田氮素循环的关键环节，某些蓝细菌是自生固氮菌（独立生活时能够利用空气中游离的氮分子作为氮源，并将氮分子转化为氨，氨转化为铵盐后是植物良好的氮素营养）。蓝细菌中B基因表达的B蛋白是一种有助于蓝细菌高效吸收的载体蛋白，科学家利用基因工程和细胞工程等技术，尝试将蓝细菌的B基因导入水稻细胞，以期获得吸收能力较强的转基因水稻，从而增加粮食产量。下图1、2分别是农杆菌的Ti质粒和蓝细菌B基因的结构模式图。回答下列有关问题：
   
(1)为获得可用于进一步研究的固氮蓝细菌的菌株，从培养基功能的角度分析，可以使用______培养基从自然菌群中筛选，该培养基所需的营养物质有无机碳源、______（写两种），但不需要添加______营养物质，并在有光条件下培养。
(2)利用PCR技术以图2中的DNA片段为模板扩增B基因时，需要的引物有______（填写图中引物代号），理由是________________________。
(3)在构建含B基因的表达载体时，需要用限制酶______切割Ti质粒和B基因，不选用其他限制酶的原因是________________________。
(4)为检测B基因在转基因水稻细胞中是否成功表达，可采用抗原—抗体杂交法在分子水平上检测，还可以在个体水平上检测，请写出个体水平检测的实验思路：________________________。

【推荐3】圆褐固氮菌能将大气中的氮气转化成氨，是异养需氧型微生物。某同学欲通过实验从土壤中分离获得圆褐固氮菌并对其进行计数。请回答下列问题：
(1)进行分离实验所用的培养基含有的营养成分应包括碳源、____________。从物理性质上看该培养基属于___________。接种时需在酒精灯火焰旁其目的是____________。
(2)培养圆褐固氮菌时______（能/不能）隔绝空气。理由是_______；______。（答出两点）
(3)该同学将10g土壤制成100ml悬液，采用___________法来统计样品中活菌的数目，若该同学从样品悬液中取出1ml，稀释100倍，在3个平板上分别涂布0．1ml稀释液，经适当培养后3个平板上的菌落数分别为256、258、260，则土壤中细菌的密度为____个/g。

【推荐1】研究人员将从种植烟草的土里分离得到的尼古丁（C₁₀H₁₄N₂）降解菌株SC接种到含尼古丁的培养基中，置于摇床恒温（30℃）培养并定时取样，测定并计算发酵液中的尼古丁浓度和菌体浓度，得到的结果如图所示。回答下列问题：

(1)发酵液中的尼古丁为菌株SC提供的营养物质有_____，此外培养基中还需要加入_____等物质。
(2)分离菌株SC时可用的接种方法是稀释涂布平板法或___。当培养最少___h时，菌株SC的数量即可达到该种群的环境容纳量。
(3)三位同学用稀释涂布平板法测定某一时间段内菌株SC的数量，在对应稀释倍数为10⁶的稀释液中各取0.1mL涂平板，得到以下统计结果:
甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；
乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是209、240和250，取平均值233；丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163。
在三位同学的统计中，___同学的统计是正确的。据此计算，每克土壤样品中含该细菌____个。稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是______。

【推荐2】人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的利用价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选出纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素的能力进行了研究；刚果红（CR溶液）可以与纤维素形成红色复合物，不与纤维素降解产物（纤维二糖和葡萄糖）发生这种反应。
(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即_____、_____和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成_____，第三种酶将其进一步分解为葡萄糖。
(2)在涂布平板筛选时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多（不超过0．1mL）的原因是_____。
(3)刚果红（CR溶液）可以与纤维素形成红色复合物，不与纤维素降解产物（纤维二糖和葡萄糖）发生这种反应，我们可以通过观察菌落是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，透明圈越大说明_____，此时用的培养基按物理性质划分属于_____。
(4)该小组采用稀释涂布平板法检测样品中纤维素分解菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_____；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为79、78和77．据此可得出每升样品中的活菌数为_____。

【推荐3】如图为微生物的实验室培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤，请回答下列问题。

   

(1)①是制备培养基时_________的操作，该操作需待培养基冷却至______℃左右进行。
(2)该实验中纯化醋酸菌的接种方法是________；完成步骤的操作，接种环共需要______次灼烧，最后一次灼烧的目的是___________。
(3)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？___________。
(4)啤酒生产过程中，大麦发芽的目的是破坏细胞结构释放出____________，糖化的目的是___________。在蒸煮阶段，不仅可以蒸发掉多余的水分，还起到____________作用。

【推荐1】研究人员发现柚皮精油和乳酸菌素(蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示：

回答下列问题：
(1)由于柚皮易焦糊，为了提高出油率，宜采用________提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过________除去其中的固体杂质。
(2)为了分离出优良的乳酸菌A，需要制备________培养基，采用____________或________法接种，培养基采用________法灭菌。
(3)乳酸菌A还可以用来生产泡菜，原理是______________________(用化学反应式表示)。制作泡菜过程中产生的亚硝酸盐在盐酸酸化的条件下，与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，再与N­1­萘基乙二胺盐酸盐结合形成________色染料。

【推荐2】柠檬油是植物芳香油中的一种，它是一种广谱性的杀虫剂，它可杀死蚊子、苍蝇、蟑螂和臭虫等传染疾病的害虫，以及危害粮食、蔬菜的常见害虫，包括幼虫、蛹等，被称为一种绿色杀虫剂。 
（1）提取柠檬油常见的原料是柠檬花与柠檬果皮，嫩的花朵在蒸馏过程中，精油易被水蒸气分子破坏，所以可采用____法。柠檬果皮精油的提取适宜采用____法，此种方法是通过________将柠檬油从混合物中分离出来，必经步骤为(如图)： 

据实验流程图回答下列问题。
①A是____，目的是________________________________________ 
②B过程一般加入相当于柠檬果皮质量0．25%的NaHCO₃和5%的Na₂SO₄，其目的是   ___________________
③C过程为____，目的是________________________________________________________。 
④实验过程中浸泡柠檬果皮后，需用清水洗涤，其目的是_______。 
（2）采用柠檬油作为杀虫剂，可以解决其他杀虫剂给人类带来的隐患，其突出的优点是 _______。

【推荐3】重庆市柑橘产量位居全国前列，且种类丰富。请就重庆各地柑橘产品回答下列问题：
（1）潼南柠檬富含维生素C、柠檬酸等对人体有益的成分，可采用___________法制备柠檬精油，制备过程中加入NaHCO₃和Na₂SO₄的目的是__________________________________________。
（2）长寿柚、梁平柚等均享有盛名，柚子皮用于提取柚皮精油或制备生物活性炭，柚肉用于生产果汁，加入的果胶酶包括______________________和多聚半乳糖醛酸酶，可使浑浊的果汁变得澄清。在工业生产中还可利用_________________法将果胶酶进行固定化处理，与一般酶制剂相比，固定化酶的突出优点是_________________________________________________________。
（3）奉节脐橙作为重庆柑橘的一张名片为大家熟知和喜爱。西南大学某科研小组设计实验寻找制作脐橙果酒的耐酸优良酵母菌种，实验步骤如下：
①土壤取样：三峡库区脐橙主产区果园土壤，去除表层浮土，取5~25cm处土样，立即装入无菌袋。
②增菌：取10g土样于90mL液体培养基A（添加0．3%~0．5%的醋酸）中，28℃，200转/分钟摇瓶培养48h。本步骤的目的是增加菌体浓度以及__________________________。
③纯化：菌液逐级稀释，选择10^-4、10^-5、10^-6三个梯度各0．1mL涂布于WL培养基上，不同酵母菌对WL培养基含有的溴甲酚绿吸收能力不同，因而菌落呈现出黄色至深绿色的不同颜色，以此能明显区分不同种酵母菌，则WL培养基是__________（填“选择”或“鉴别”）培养基。
④筛选：将纯化的各单菌落分别接入10mL橙汁中，比较各菌株产气速度和产气量，测定酒精度，筛选出发酵性能优良的酵母菌株。
⑤保藏：长期保存可使用甘油管藏法，其中甘油瓶和甘油需使用_______________法灭菌，再加入菌液进行保存。