【推荐1】筛选大肠杆菌抗链霉素突变株的实验过程如下：
①取一个已经灭菌的空培养皿，斜放（一边垫起）放置，在无菌条件下倒入10 mL不含药物的底层培养基（如图甲所示）；
②待培养基凝固后将培养皿放平，再倒入10 mL含有链霉素的上层培养基，迅速使其冷却，这样便得到链霉素浓度从一边到另一边逐渐升高的梯度平板（如图乙所示）；
③用移液管移取经诱变处理后的大肠杆菌细胞悬液0．1 mL接种到梯度平板上；
④将平板倒置于恒温培养箱中培养2天，观察梯度平板上大肠杆菌的生长情况；
⑤选择如图丙所示平板上1～2个生长在梯度平板中部的单个菌落，用无菌接种环接触单个菌落朝高药物浓度的方向划线；
⑥将平板倒置于恒温培养箱中培养2天，经二次（或多次）培养后，在链霉素浓度比较高的部位长出的菌落即为抗链霉素突变株。

（1）该培养基从物理形态上看属于_____培养基，对该培养基灭菌的常用方法是_____。
（2）第②步操作中需要迅速冷却的目的是_____，在固体培养基上接种后将平板进行倒置培养的目的是_____。
（3）用无菌接种环接触单个菌落朝高药物浓度方向划线，其目的是_____。抗链霉素最强的菌落位于_____区。
（4）大肠杆菌的抗链霉素突变是培养基中的链霉素引起的吗？_____（填“是”或“不是”），理由是_____。

【推荐2】某污水池中含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。现有研究人员欲探究污水净化处理的方案，进行了如图所示的实验，请据图回答下列问题：

（1）在进行初选时，将污泥样品接种于以____________为唯一碳源的固体培养基上；在利用锥形瓶进行培养时，需要振荡培养，因此可推测“目的菌”的细胞呼吸方式为____________。
（2）在接种前需要对培养基进行灭菌处理，常用的灭菌方法是____________________；而在接种时利用的无菌技术要求实验操作应在__________________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
（3）纯化菌种时，为了获得单菌落，常采用的接种方法有________________和________________；接种后应将培养基进行________（填“正放”或“倒置”）培养。
（4）培养若干天后，应将有机化合物A含量较________的培养液转移至新的培养液中进行连续培养；转移至新培养液中培养的目的是使“目的菌”的数量________；在实验结束时，将使用过的培养基进行________处理后才能倒掉。

【推荐3】生物柴油是以野生油料植物、废餐饮油等为原料，通过化学反应制成的可供内燃机使用的燃料，是一种绿色能源，其中微生物脂肪酶在催化生产生物柴油中起着重要作用。为筛选产脂肪酶的微生物，石河子大学的科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：
(1)产脂肪酶的微生物主要从油污土壤或水体中寻找，原因是_____________。
(2)为确保能够分离得到产脂肪酶的微生物，常将土壤或水体稀释液先进行选择培养，该培养基的碳源要求为____________，进行该步操作的优点是________________。
(3)分离、纯化培养时，可采用_________法接种，从而得到分布均匀的单菌落﹔从物理形态角度考虑，该培养基属于_________培养基。培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径_________的菌落进行纯化培养。为提高该步操作的可信度，设置了如下对照实验：

对照组	作用	应出现的现象
未接种的选择培养基	判断选择培养基是否被污染	①_________
接种的牛肉膏蛋白胨培养基	②_________	对照组培养基上的菌落数大于选择培养基上的菌落数

【推荐1】白色污染问题已引起全社会广泛关注，降解塑料的研究和开发是解决白色污染的理想途径之一。科研小组人员发现被PET塑料污染的土壤中有能降解塑料的菌株M，下图为科研人员分离、纯化菌株M的过程。请回答下列问题：
   
(1)实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用__________的方法进行灭菌。从功能上看，乙、丙培养基均属于__________培养基；相比丙培养基，制备乙培养基需要添加的物质是__________。
(2)若要测定土样中能降解塑料的细菌细胞数，常采用稀释涂布平板法，若在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上菌落数分别是61、62和66，则1g土壤中的活菌数约为__________个。该方法所得测量值一般比实际值偏低的原因是________________________，
(3)检测菌株M对抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释后的液体2滴，接种于固体培养基表面，使菌液均匀分布。在37℃培养箱中培养24小时后，将分别含有三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置，再培养一段时间后，结果如图所示（滤纸片周围的白色区域表示没有菌落分布）。据此实验结果推测，三种抗生素中对该菌抑制作用最强的是__________。
   

【推荐2】手机现在已经成为人们离不开的通讯和娱乐工具，但手机表面分布较多的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等微生物，可能导致人患肠胃炎等疾病。甲乙同学对正常使用的手机屏幕上的细菌进行初步培养和数量测定，部分操作过程见下图。回答下列相关问题：

   

(1)培养基中含有的主要营养物质有________。除此之外，培养基还需要满足微生物生长对________以及氧气的需求。为便于观察菌落，常在培养基中加入________，还需采用________法对培养基进行灭菌。
(2)甲、乙两位同学手机屏幕上的细菌进行初步培养和数量测定得到以下结果：
甲涂布了1个平板，统计的菌落数是230。
乙涂布了3个平板，统计的菌落数分别是28、214和256，取平均值166。
请你评价甲乙两位同学的实验结果是否合理，若不合理请分析原因并写出改进措施。
①甲同学________。
②乙同学________。
(3)为了减少手机上微生物的种类和数量，我们需对手机进行消毒，常用方法是______。

【推荐3】毕赤酵母能以工业废甲醇作为碳源，可以用来生产酵母蛋白作为饲料蛋白来源。研究人员为了探究培养基中葡萄糖和甲醇配比对甲醇转化率和酵母蛋白产量的影响，进行了以下实验。请回答相关问题：
①依据培养基中碳源总量一定的原则，按照下表中葡萄糖和甲醇的比例配制培养基，按照每瓶40mL的量分装到250mL的锥形瓶中，常规灭菌操作。

组别	对照组	A	B	C	D	E
葡萄糖/（g∙L-1）	10	8	6	4	2	0
甲醇/（mL∙L-1）	0	2.5	5.0	7.5	10	12.5

②将准备好的毕赤酵母种子培养液接种于培养基中，每组设置平行试验。
③将接种后的锥形瓶置于摇床上，在30℃、180r/min条件下培养48h。
④测定发酵液中的甲醇残余量，计算出甲醇转化率，结果如下：A组6.8%；B组13.0%；C组12.4%；D组15.2%；E组11.9%。
⑤测定每组酵母蛋白产量，结果如图。

（1）该研究配制培养基时，一般不用有机氮源，原因是______。按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的______，分装在锥形瓶中，用______塞住瓶口，包扎后置于高压灭菌锅中进行灭菌。
（2）毕赤酵母是好氧微生物，培养液中溶解氧浓度对菌体的生长和产物的生成影响很大。该实验中，提高培养液中溶解氧的措施有______和______。
（3）综合考虑甲醇转化率、酵母蛋白产量和社会经济效益，生产用培养基的葡萄糖和甲醇含量配比应该与______组实验相同。
（4）如果要进一步探究利用毕赤酵母生产酵母蛋白的最适温度，实验设计思路是______。

【推荐1】下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

成分	蛋白胨	乳糖	蔗糖	K2HPO4	指示剂	琼脂
含量（g）	10.0	5.0	5.0	2.0	0.2	12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1 000 mL

(1)若根据用途划分，该培养基属于_________（填选择或鉴别）培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌， 培养基的营养成分必需怎样更改？__________，并用__________作为指示剂。
(2)在制备固体培养基时需加入的凝固剂，常用的是_________。用该培养基培养大肠杆菌，常用的接种方法有_____________，经培养可以分离得到若干个由一个细胞繁殖而来的、肉眼可见的子细胞群体，称为________。
(3)在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行_____________；操作者的双手需要进行清洗和____________。
(4)图中图 1 和图 2 是培养某细菌的结果图，其中__________（填图一或图二）所用的接种方法可用来对活菌进行计数，计数结果比实际值往往偏_________。此外，测定微生物数目的另一种方法是________，计数结果比实际值往往偏__。
(5)图 2 为平板划线法接种后的示意图。在划线接种的整个操作过程中，对接种环至少需进行________次灼烧灭菌。接种后盖上皿盖，将平板_______放入恒温箱中培养，这样放置的目的是____________。

【推荐2】土壤中的解磷微生物可通过分泌解磷酶将土壤中难溶磷酸盐转化为植物易吸收的可溶性磷。下图是研究者从土壤中筛选具有较强解磷能力菌株过程中的一些操作。请回答下列问题：

(1)分离解磷菌株需配置合适的培养基，图①所示操作称为______，待平板冷却后应倒置，原因是______。
(2)研究者对筛选得到的3株细菌分别采用了固体平板解磷能力测定和液体培养基解磷能力测定，结果如表1和表2。
表1

菌株	菌落直径d/mm	透明圈直径D/mm
A	18	36
B	31	59
C	19	57

表2

菌株	原液体培养基含磷量/（mg·mL－1）	培养后含磷量/（mg·mL－1）
A	0.20	0.127
B	0.20	0.165
C	0.20	0.051

结合表1和表2分析得到，解磷能力最强的菌株是______，理由是______。
(3)科研者选取能力最强的解磷菌放入锥形瓶中继续扩大培养，一段时间后欲通过稀释涂布平板法观察菌落并计数，他们从中挑选了以下三个平板，其中说明操作比较成功，并能够用于菌落正确统计的平板是______（填字母）。 其它组不成功的原因是______。

【推荐3】乳链菌肽是由乳酸乳球菌分泌的一种由34个氨基酸组成的多肽，对引起食品腐败的细菌具有强烈的抑制作用，是一种高效无毒的天然食品防腐剂。研究人员从新鲜牛奶中获得多株产乳链菌肽的菌株，为了筛选出抑菌作用最强的菌株，进行了如下实验：将上述菌株在液体培养基中培养，离心后获取上清液。将革兰氏阳性菌涂布于平板上，将灭菌的大小相同的滤纸片均匀地摆放在培养基表面，在其上分别滴加等量备选菌株培养液的上清液，培养后对比观察，选取抑制作用最强的菌株。将相应的菌株按照下图所示的流程进行纯化培养。请回答：

（1）滤纸片周围透明的抑菌圈______，相应菌株产生的乳链菌肽抑菌作用越强。
（2）在菌株纯化培养过程中，A过程中除了加入特定的营养物质以外，还要加入一定量的氯化钠，以维持______。B过程常用的方法是______。D过程与C过程相比，培养基中增加的物质是______。E过程需将纯化的菌株接种于______培养基中4℃保存。
（3）为了了解乳链菌肽对革兰氏阳性菌的作用方式是抑制细菌生长、溶菌性杀死细菌（细胞破裂）还是非溶菌性杀死细菌，科研人员将乳链菌肽加入革兰氏阳性菌菌液中，随着发酵时间的延长，检测革兰氏阳性菌的活菌数、经离心除去菌体的上清液中核酸含量，实验结果如图所示。曲线1是对照组的活菌数；曲线2是对照组和实验组上清液中的核酸含量；曲线3是实验组的活菌数。对革兰氏阳性菌活菌的计数方法为______。以上实验表明乳链菌肽对革兰氏阳性菌的作用方式为______，理由是______；______。

（4）研究表明乳酸乳球菌不仅有合成乳链菌肽的编码基因，还有相关的免疫基因以确保分泌的乳链菌肽对自身细胞不会产生伤害，其中可以用作基因工程中标记基因的是______。
（5）乳链菌肽作为天然防腐剂，但不会改变人体肠道中的正常菌群，也不会进入人体内环境，这是因为______。

【推荐1】扩展青霉常见于腐烂苹果中，其分泌的扩展青霉素（Pat）是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，进行了如图所示实验：

其中“病健交界处”为病斑与正常部位的交界处，依据与病斑的距离不同将苹果划分为①~⑤号部位，其中②③④已明显腐烂，⑤为剩余部分。测定病斑直径为1、2、3cm的苹果中①~⑤号部位的Pat含量，结果如图所示。回答下列问题：

(1)该实验中将扩展青霉菌种接种到苹果上，这里的苹果相当于接种培养的__________。
(2)在曲线图中，2cm病斑和3cm病斑的①部位的Pat含量与②③部位的Pat含量__________（“成”或“不成”）正比关系。由此可以得出的结论是________________________________。
(3)由实验结果可知，苹果去除腐烂部位后也不可以食用，原因是________________。
(4)实验结束后，需要对实验所用器材进行________处理，目的是________________。

【推荐2】某研究小组欲研究生理溶液中K⁺浓度升高对蛙坐骨神经纤维静息电位的影响和Na⁺浓度升高对其动作电位的影响。请完善以下实验思路，预测实验结果，并进行分析与讨论。（要求与说明：已知蛙坐骨神经纤维的静息电位为-70mV，兴奋时动作电位从去极化到反极化达+30mV。测量的是膜内外的电位变化。K⁺、Na⁺浓度在一定范围内提高。实验条件适宜）回答下列问题：
(1)完善实验思路：
组1：将神经纤维置于适宜的生理溶液a中，测定其静息电位和刺激后的动作电位，并记录。
组2：将神经纤维分别置于K⁺浓度依次提高的生理溶液b，c中，测定其静息电位，并记录。
组3：___________。
对上述所得的实验数据进行分析与处理。
(2)预期的实验结果：
①相对于组1，组2实验中神经纤维的静息电位绝对值会_____________，因为______________。
②组3实验中神经纤维的动作电位峰值会_____________，因为_____________。
(3)若用抑制酶活性的药物处理神经细胞，会使Na⁺外流量_______________。
(4)刺激脊蛙的坐骨神经，除了在反射中枢测量到动作电位外，还观察到腓肠肌收缩，说明坐骨神经中含有_____________神经。