【推荐2】动物的免疫系统受多种激素的影响，其中肾上腺分泌的糖皮质激素是能调节免疫反应的重要激素。科研人员对雌性小鼠进行了肾上腺假切除(即不切除肾上腺，只做相同伤口处理)和肾上腺切除两组实验，部分实验结果如图。回答下列相关问题：

(1)免疫系统除受内分泌系统的调节之外，还受_________分泌的乙酰胆碱等物质的调节。另外免疫系统产生的_________等物质也可以调节内分泌系统的生理活动。
(2)分析图1可知，切除肾上腺对胸腺的影响是_________。胸腺是辅助性T细胞分化、发育、成熟的场所，该细胞在体液免疫中的作用是_________。
(3)植物血凝素(可凝集红细胞)反应可以作为衡量动物免疫功能的指标(免疫功能越强，阳性反应越强烈，免疫功能低下者测试结果为阴性)。
①从图2中可以看出，肾上腺切除后24h内对植物血凝素反应的影响是_________。
②若要进一步验证肾上腺对免疫功能产生了影响，科研人员以家兔和病毒A作为材料设计了实验。简要写出实验思路：__________________。

【推荐2】最初从多管水母属中分离出的绿色荧光蛋白（GFP）基因，现已广泛地应用于基因工程中载体上的标记基因。烟草花叶病毒（TMV）是造成烟草产量损失的主要病毒。某科研团队设计了利用增强型绿色荧光蛋白（EGFP）快速筛选表达TMV外壳蛋白基因（CP）的转基因烟草品系（该品系能抑制病毒的复制，从而显著延缓病毒感染的发生），设计过程如下图。
   
回答下列问题：
(1)获取外源基因：
①为了获得TMV的外壳蛋白基因（CP），先要分离得到TMV的外壳蛋白，分析该蛋白质的氨基酸序列和相应的核苷酸序列，再利用_____________法获得该外源基因。
②野生型GFP是由238个氨基酸组成的单体蛋白，首先需要在基因数据库中检索获取GFP基因的编码序列，并采用____________中结合PCR的定点突变等技术，设计和改造GFP中第64、65号2个氨基酸后，成为EGFP使其荧光强度提高35倍。对于该基因的检测，通常需进一步通过____________鉴定，而不用PCR产物凝胶电泳的结果，原因是____________。③用一定的方法将CP基因和EGFP基因连接获得CP-EGFP融合基因。
(2)利用表达载体构建重组DNA分子：
用不同的限制性内切核酸酶对含CP-EGFP融合基因的DNA片段和表达载体Ti质粒进行处理，使它们的两端各自形成____________的黏性末端，从而避免基因片段和质粒的自身环化和反向连接。然后用DNA连接酶将CP-EGFP融合基因和Ti质粒连接形成重组Ti质粒，其中CP-EGFP融合基因插入质粒的____________中。
(3)重组DNA分子转化受体细胞（根癌农杆菌和烟草叶片细胞）：
①先将根癌农杆菌放于低温、低浓度的CaCl2溶液中，造成细胞膨胀，____________改变，成为感受态细胞。再在低温条件下将根癌农杆菌与重组Ti质粒混合培养在____________培养基中，最后进行短暂的热刺激处理，使CP-EGFP融合基因转入根癌农杆菌细胞。②用筛选、鉴定后的重组根癌农杆菌去侵染消毒后的离体烟草叶片时，____________的叶片会产生酚类化合物，诱导根癌农杆菌质粒上vir系列基因表达形成特异性内切酶和DNA聚合酶等，进而从质粒上____________出特定DNA片段并整合到烟草叶片细胞的染色体上。转化完成后需及时用____________的抗生素进行脱菌操作。
(4)检测目的基因及其表达产物：
将处理后的烟草叶片在相应的MS培养基上培养成试管苗，该培养基一般不添加葡萄糖而是添加蔗糖，其原因有：相同物质的量浓度下蔗糖比葡萄糖提供更多的能量，还有____________（写出1点）。为检验CP基因是否转入并成功表达，可直接检测组培苗烟草叶片细胞中是否具有____________的特征，省去了分子水平的检测步骤，大大降低了工作量。
(5)为什么转入CP基因（非抗性基因）的烟草植株具有对抗TMV的感染能力?科研团队的研究结果表明：CP基因转录的RNA以反义方式作用于病毒的____________，或同模板竞争复制酶而干扰病毒的复制，并且抗性过程需要外壳蛋白的直接参与。

【推荐1】人体细胞中的ICF45蛋白与细胞周期调控、肿瘤发生过程有关。为探究ICF45蛋白的相关作用机制，某研究人员进行了如下实验。回答下列问题。
(1)研究人员先通过基因工程技术构建了可表达ICF45蛋白的工程菌大肠杆菌，再通过培养大肠杆菌获得ICF45蛋白。在构建过程中，研究人员从子宫颈癌细胞系细胞中提取mRNA，然后以mRNA为模板，在________酶的作用下合成cDNA。再依据一段________的核苷酸序列设计引物，进行PCR扩增。PCR技术的一个循环包括的环节是________。将含有目的基因的表达载体导入大肠杆菌前，一般先用________处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
(2)研究人员将获得的ICF45蛋白注射到若干只健康小鼠体内，一段适宜时间后从小鼠的脾脏中提取出小鼠B淋巴细胞，将其与________细胞诱导融合。然后经特定的选择性培养基筛选，对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，最终选择出________细胞在体外条件下进行大规模培养，这样就可以从培养液中获得大量的ICF45单克隆抗体。
(3)该研究人员利用获得的ICF45单克隆抗体，通过免疫共沉淀技术进一步筛选出与ICF45蛋白相互作用的蛋白质，实验结果如表。已知免疫共沉淀技术是在体外进行的研究蛋白质相互作用的一种技术。其原理是抗体A可与蛋白质A特异性结合，因此使用抗体A可将蛋白质A“沉淀”。如果蛋白质B与蛋白质A相互结合形成复合体，那么抗体A在将蛋白质A“沉淀”的同时，也会把蛋白质B“沉淀”下来。

	各蛋白质提取结果	ICF45单克隆抗体免疫共沉淀结果
ICF45	是	＋
HSPA9	是	＋
Annexin—A2	是	＋
Myosin9	是	＋
COMT	是	－

注：“＋”表示出现“沉淀”条带“－”表示未出现“沉淀”条带。
实验过程中，研究人员对健康人体细胞蛋白提取物中5种蛋白质进行检测，目的是________。请结合实验原理及表中结果推测，________最可能是与ICF45蛋白相互作用的蛋白质。