【推荐1】反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸盐转化为氮气（2NO₃^-+10e^-+12H⁺→…N₂O→N₂），在处理工业污水、治理水体富营养化中具有重要作用。科研人员想从一污水处理厂的活性污泥中筛选分离出耐高温（42℃）的反硝化细菌（目的菌），用于提升温度较高的工业污水的脱氮效率，具体流程如图所示（BTB培养基初始pH=6.8，BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色）：

(1)BTB培养基灭菌后待平板凝固后，应倒置放在超净台上，目的是___________。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，目的是___________。
(2)将污泥样品梯度稀释后，使用__________（填工具）将样液均匀涂布在BTB培养基上，放在__________环境中培养2~3天后，挑选周围显__________色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。
(3)将纯菌株接种在液体培养基上培养一段时间，若在培养瓶顶部检测到N₂O，即可鉴定为目的菌。不能依据培养液中硝酸盐的浓度变低来鉴定目的菌，原因是__________。
(4)为保持纯化后的微生物菌种的纯净，需要对菌种进行保藏。临时保藏的方法具有___________等缺点，它比较适合那些使用频率高的菌种的保藏。
(5)C/N（碳氮含量比）对反硝化效率有一定的影响。科研人员测得不同C/N条件下目的菌对硝酸盐的去除率，结果如图所示：

科研人员提出，在利用目的菌株处理工业污水时，需要适当向污水中投放少量淀粉，据图分析这样做的主要目的是__________。

【推荐2】回答下列（一）、（二）小题：
（一）请回答下列有关微生物应用的问题：
(1)果胶酶在食品加工中用途较广，某食品公司通常从腐烂水果上分离产果胶酶的微生物，其原因是_______________。取水果相应部分，用_______________制成微生物悬液，并进行梯度稀释，然后用移液器将其转移到以果胶为唯一碳源的培养基上培养，分离得到A、B两种产果胶酶的微生物。
(2)为了鉴定的A、B两种微生物降解果胶的能力，将等量的两种微生物接种于等量相同浓度的经_______________的果胶溶液中进行降解果胶处理。一段时间后，将处理后的果胶溶液离心取上清液，除去残余果胶，用显色剂显色，并在特定_______________的光下测定OD值。若经A组微生物处理后的溶液所测得的OD值较_______________，则说明该种微生物降解果胶的能力较强。
(3)通过鉴定筛选出高产果胶酶菌种后，可对其进行固定化处理形成固定化菌株，这样处理的优点是 ；在建立和优化固定化菌种处理工艺时，除考虑温度、pH、作用时间等因素外，还需考虑的主要因素有 （至少写出2点）。固定化菌株保存一段时间后，发现降解果胶的能力明显下降，原因可能是_______________（至少写出2点）等。
（二）发根农杆菌的Ri质粒是一种植物遗传转化系统，其有3个功能区：①T﹣DNA区是Ri质粒上唯一整合到植物基因组上的DNA片段；②Vir毒性蛋白区是发根农杆菌实现高效侵染所必需的区域；③Ori区即复制起始区与功能代谢区。常用的质粒载体pCAMBIA1301在大肠杆菌和发根农杆菌中都能生存和克隆，并且自身携带潮霉素抗性基因以及可以替换T﹣DNA的DNA片段，经处理后质粒pCAMBIA1301也可具备T﹣DNA．部分转化过程如图所示。

请回答下列问题：
(4)限制性核酸内切酶能识别图中LB和RB的酶切位点，并能使1个pCAMBIA1301质粒的_____________个磷酸二酯键断开。
(5)应用过程中，将目的片段插入到pCAMBIA1301质粒的_______________中，再将构建好的重组质粒转入发根农杆菌细胞中。要确定重组质粒是否被成功导入发根农杆菌，可在培养发根农杆菌一段时间后，利用pCAMBIA1301上自身携带的_______进行鉴定，也可利用基因探针通过_______________技术进行检测。
(6)可分别用70％乙醇和___________溶液浸泡处理植物组织，并使其脱分化形成愈伤组织，再用重组发根农杆菌对其进行侵染，之后进行脱菌培养，然后以适当配比的___________诱导，最终可获得转基因植株。
(7)图中Ri质粒上的T﹣DNA片段有缺损，因此无法被转化至植物细胞内，但Ri质粒上的___________仍可对侵染过程起到辅助激活作用。

【推荐3】Ag/TiO₂作为一种常见的半导体光催化剂，在可见光照射下不仅可杀灭饮用水中的细菌等微生物，降解水中的有机化合物，还能循环利用，因此被广泛使用。某研究小组制备了Ag/TiO₂空心微球，现欲探究不同载银量的Ag/TiO₂空心微球的杀菌性能。
（1）培养大肠杆菌：制作本实验所用的无菌平板时，需要加入________________、水、无机盐等大肠杆菌所必需的营养成分，配制好后将培养基等置于___________________中灭菌20min；在无菌环境中倒平板，待平板冷凝后，将平板倒置，是为了________________________________________________和防止培养基水分过度蒸发。将大肠杆菌制备成菌悬液，分离纯化。
（2）杀菌性能检测：挑取菌落制成菌悬液，用涂布器接种于无菌平板表面，使其均匀生长，布满平板；用浸透了不同载银量的Ag/TiO₂空心微球悬浊液的小滤纸片（实验组）和浸透了__________的小滤纸片(空白对照），分别放在涂好菌的平板的不同位置；将平板置于恒温箱中培养一段时间，观察记录滤纸片周围的滤纸片周围抑菌圈（透明圈）大小（直径）。
（3）测定饮用水所含的大肠杆菌数目，还有一种特别的方法：将已知体积的饮用水过滤后，将滤膜放在加入____________的培养基上（大肠杆菌菌落呈黑色)，根据黑色菌落的数目，可计算出水样中大肠杆菌的数量。

【推荐1】某化工厂生产的一种加酶洗衣粉，其包装袋上印有如下说明：
成分：含碱性蛋白酶等。
用法：洗涤前先将衣物浸于洗衣粉溶液内一段时间，使用温水效果更佳。
注意：切勿用于丝质及羊毛衣料。
某研究性学习小组为探究该洗衣粉中酶催化作用的最适温度，设计了如下装置进行实验，并将结果用下列曲线图A、B表示。

请回答以下问题：
（1）由图可知，使用该加酶洗衣粉的最适宜温度为___________________。
（2）在0℃和75℃时，酶的催化效率基本都为零，但当温度再度回到45℃时，后者酶的催化能力已不能恢复，这是因为_________________。
（3）在实验过程中可通过直接测定___________________（指标）来表示该洗衣粉中酶的催化效率。
（4）目前使用的加酶洗衣粉都是一次性的。某洗涤公司为降低生产成本研制出了一种能多次重复使用加酶洗衣粉的设备，他们将酶固定在不溶于水的尼龙载体上，洗涤完衣物后，经过简单处理，这些酶还可以多次重复利用，利用这种方法制成的酶叫___________________。

【推荐2】葡萄糖异构酶经固定化后，可用于工业化生产高果糖浆。请回答下列问题。
（1）戊二醛是一种交联剂，能与葡萄糖异构酶通过化学键交联。将酶液、 戊二醛溶液先后加入到海藻酸钠溶液中搅拌均匀， 用注射器将混合液注入到_______溶液中可得到凝胶珠粒，此过程所用的固化酶方法为 ______________________________________。
（2）海藻酸钠的浓度影响会到凝胶珠粒的形状，若珠粒呈“蝌蚪”状，有明显的拖尾现象，说明_________，此珠粒中固化酶活力较低，原因是 ______________。
（3）1个葡萄糖异构酶活力单位常定义为每分钟产生 1μmol_________所需的酶量。下图是温度对葡萄糖异构酶的固化酶和游离酶活力的影响曲线，该曲线表明______________。

（4） 在用葡萄糖异构酶凝胶反应柱生产高果糖浆时，若糖液在1次流经反应柱后果糖的浓度低于产品标准，对此你提出的改进方案是____________（答出2点）。

【推荐1】《舌尖上的中国》是中央电视台播放的美食纪录片，在本片中中国美食更多的将以轻松快捷的叙述节奏和精巧细腻的画面，向观众，尤其是海外观众展示中国的日常饮食流变，中国人在饮食中积累的丰富经验，千差万别的饮食习惯和独特的味觉审美，以及上升到生存智慧层面的东方生活价值观。根据所学知识回答有关生物技术实践的问题
(1)苹果醋是一种非常受欢迎的饮料，它的制作是利用醋酸菌在有氧条件下将糖分解成醋酸，其发酵温度为___________；若缺少糖源时也可_____________________。
(2)腐乳在美食中具有极其独特的风味，它的制作利用了毛霉等微生物能产生______________________催化相应的物质分解的原理，在制作过程中为调节香味加入了香辛料，其作用还有_____________。
(3)为了统计泡菜坛内乳酸菌活菌的数目，可采用_____________法，当人体摄入的亚硝酸盐过多时会引起中毒，所以在泡菜制作过程中往往需检测亚硝酸盐的含量，检测的原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与___________后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，再用比色法进行测定。
(4)美食诱人，不过有时不小心会污染到衣物，这些污物往往很难用普通洗衣粉清洗干净，此时我们可以选用加酶洗衣粉，从环境角度和洗涤效果上分析加酶洗衣粉比普通洗衣粉更具优势的原因：________________。酶已应用于很多领域，为了使酶能够反复利用和不影响产品质量，可以利用_______________技术将酶固定在不溶于水的载体上。

【推荐2】请完成与传统发酵技术有关的问题：
（1）为什么制作泡菜的时候，要在泡菜坛盖边沿的水槽中注满水？因为坛内进行发酵的主要微生物是_________________，其发酵需要________________环境，在这种条件下，它们能将______________分解成__________________。
（2）测定泡菜中的亚硝酸盐含量的原理是，在____________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成________________________色染料，将显色样品与__________________________比较，找出________________________________________，估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
（3）当氧气、糖源都_______________时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将__________________转变成____________________，最后再转变成醋酸。