富集培养是微生物学中的最强有力的技术手段之一、主要是利用不同微生物生命活动特点的不同,制定环境条件,使仅适应该条件的微生物旺盛生长,从而使其数量大大增加。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。请分析回答下列问题。
(1)①→④过程所用的培养基均属于_____ 培养基。
(2)若实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的异化作用类型是_____ ;振荡培养的另一个目的是_____ 。
(3)培养基灭菌后待平板凝固后,应倒置放在超净台上,目的是_____ 。设置⑥的目的是_____ 。
(4)⑤→⑥采用单细胞挑取法,将所选菌种接种到⑥的培养基中,在此操作过程中如何防止杂菌污染(至少写出两点)。_____ 。
(5)若以血细胞计数板计数法统计“目的菌”的数量,以一个大方格(体积为0.1 mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算,设五个中方格中总菌数为B,菌液稀释倍数为C,那么原菌液的菌群密度为_____ 个/mL。
(6)实验结束时,使用过的培养基应该进行灭菌处理后,才能倒掉,以免_____ 。
(1)①→④过程所用的培养基均属于
(2)若实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的异化作用类型是
(3)培养基灭菌后待平板凝固后,应倒置放在超净台上,目的是
(4)⑤→⑥采用单细胞挑取法,将所选菌种接种到⑥的培养基中,在此操作过程中如何防止杂菌污染(至少写出两点)。
(5)若以血细胞计数板计数法统计“目的菌”的数量,以一个大方格(体积为0.1 mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算,设五个中方格中总菌数为B,菌液稀释倍数为C,那么原菌液的菌群密度为
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更新时间:2023-05-24 08:49:43
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【推荐1】下图所示为分离某种以尿素为氮源的细菌实验过程,回答下列问题:
(1)取不同稀释倍数的土壤稀释液各0.1mL,分别涂布于全营养LB固体培养基、尿素固体培养基上,其中全营养LB固体培养基是__________ (填“实验组”或“对照组”),将实验组和对照组37℃恒温培养24~48h,平板放入培养箱中培养时__________ (填“需要”或“不需要”)倒置,原因是__________ 。
(2)常用的微生物接种方法有两种,但只有该实验用的__________ 法可用于微生物的计数,运用该方法计数的结果往往与实际有偏差,其原因是__________ 。
(3)鉴别培养基中是否存在尿素分解菌时,可在培养基中加入酚红指示剂;如果有尿素分解菌存在,则培养基中该菌落的周围会出现红色。现发现有些菌落周围的培养基没有变化,试分析这些菌落产生的可能原因:__________ (答出一点即可)。
(1)取不同稀释倍数的土壤稀释液各0.1mL,分别涂布于全营养LB固体培养基、尿素固体培养基上,其中全营养LB固体培养基是
(2)常用的微生物接种方法有两种,但只有该实验用的
(3)鉴别培养基中是否存在尿素分解菌时,可在培养基中加入酚红指示剂;如果有尿素分解菌存在,则培养基中该菌落的周围会出现红色。现发现有些菌落周围的培养基没有变化,试分析这些菌落产生的可能原因:
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【推荐2】医用外科口罩为一次性使用口罩,多次使用的口罩可能会受到致病菌金黄色葡萄球菌污染。科研人员用不同方式对使用过的医用口罩进行消毒,并检测效果,步骤如下:
第一步:对相同环境下使用过相同时间的口罩再用等量金黄色葡萄球菌污染处理;
第二步:采用不同的方式对污染后的口罩进行处理(见下表);
第三步:配置营养琼脂培养基(牛肉膏1g,酵母膏2g,蛋白胨5g,氯化钠5g,琼脂15g,加水定容至1000mL),并进行灭菌;
第四步:对每种方式处理后的口罩各称取10g,剪碎后分别加入200mL已灭菌的质量分数为0.9%的氯化钠溶液中,充分混匀后静置,取上清液作为检测液。取检测液1mL接种至培养皿,然后将等量冷却至45℃的营养琼脂培养基倒入培养皿内,使检测液和培养基混合均匀。
第五步:适宜环境中培养一定时间后统计平板上的菌落数,并求平均值。
消毒效果的检测结果如下表:
回答下列问题。
(1)营养琼脂培养基提供的主要营养有____________ ,属于_____________ (填“固体”或“液体”)培养基。
(2)第四步的操作需要在____________ 旁进行,该步骤中的接种方法类似于______________ 。若经过计算每克口罩菌数为20个,则统计平板上的平均菌落数约为_____________ 个(保留整数)。可以根据_____________ 初步鉴定平板上的某菌落是金黄色葡萄球菌。
(3)与灭菌相比,上述消毒方法的特点是_____________ 。若需要重复利用口罩,根据以上实验结果,可用的消毒方法有_____________ 。
第一步:对相同环境下使用过相同时间的口罩再用等量金黄色葡萄球菌污染处理;
第二步:采用不同的方式对污染后的口罩进行处理(见下表);
第三步:配置营养琼脂培养基(牛肉膏1g,酵母膏2g,蛋白胨5g,氯化钠5g,琼脂15g,加水定容至1000mL),并进行灭菌;
第四步:对每种方式处理后的口罩各称取10g,剪碎后分别加入200mL已灭菌的质量分数为0.9%的氯化钠溶液中,充分混匀后静置,取上清液作为检测液。取检测液1mL接种至培养皿,然后将等量冷却至45℃的营养琼脂培养基倒入培养皿内,使检测液和培养基混合均匀。
第五步:适宜环境中培养一定时间后统计平板上的菌落数,并求平均值。
消毒效果的检测结果如下表:
消毒方式 | 计算每克口罩菌数(个/g) | 金黄色葡萄球菌 |
紫外线照射双面各30min | <20 | 未检出 |
75%酒精浸泡30min | <20 | 未检出 |
家庭汽蒸(水沸后蒸10min) | <20 | 未检出 |
75%酒精均匀喷洒正反面 | <20 | 检出 |
56℃干热30min(电热鼓风干燥箱) | 20 | 检出 |
对照(不做处理) | 1008 | 检出 |
回答下列问题。
(1)营养琼脂培养基提供的主要营养有
(2)第四步的操作需要在
(3)与灭菌相比,上述消毒方法的特点是
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【推荐3】味精的主要成分是谷氨酸的钠盐,目前主要利用谷氨酸棒杆菌发酵生产谷氨酸。为了提高谷氨酸产量,科研人员不断优化培养条件,以获得最佳发酵工艺。回答下列问题:
(1)纯种菌株的获取:采集5cm深的土壤样品,与适量的无菌水充分混合形成______ ,采用______ 法将菌液接种到细菌选择性培养基平板上,通过观察菌落形态,从平板上挑取生长较好的谷氨酸棒杆菌的______ ,转入培养基临时保存。
(2)菌株的培养:将斜面培养基上保存的谷氨酸棒杆菌接种到______ 培养基中,32℃摇床培养,以达到______ 菌株的目的。每隔一段时间利用______ ,在显微镜下计算样品中谷氨酸棒杆菌的数量,了解菌株的生长周期,并通过初筛、复筛,确定谷氨酸棒杆菌菌株具有高产谷氨酸的能力。
(3)发酵条件的优化:在基础发酵培养基的基础上,科研人员利用不同碳源种类(葡萄糖、蔗糖)、无机氮源种类(尿素、硝酸钾)、初始pH(5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5)探究谷氨酸棒杆菌产生谷氨酸量的联合影响,实验结果如下图。
根据实验结果,选择______ 组合获得的谷氨酸产量最高,这可作为最优发酵条件。此外,温度对发酵的影响是多方面的,原因是______ (写出2点即可)。
(4)谷氨酸棒杆菌的发酵:为了满足工业大规模发酵的需要,往往在接种发酵之前,对菌种进行______ 。根据菌株的生长周期及发酵进程,需要及时向发酵罐内添加______ ,满足谷氨酸棒杆菌的生长需求,以提高谷氨酸产量。发酵90小时后,发酵罐内的谷氨酸浓度不再增加,可停止发酵。因此,合适的发酵周期是______ 小时。
(5)谷氨酸的获得:发酵结束后,需对发酵液的产物进行分离、______ ,获得的谷氨酸需要进行质量检查,进一步加工合格后才能成为产品。
(1)纯种菌株的获取:采集5cm深的土壤样品,与适量的无菌水充分混合形成
(2)菌株的培养:将斜面培养基上保存的谷氨酸棒杆菌接种到
(3)发酵条件的优化:在基础发酵培养基的基础上,科研人员利用不同碳源种类(葡萄糖、蔗糖)、无机氮源种类(尿素、硝酸钾)、初始pH(5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5)探究谷氨酸棒杆菌产生谷氨酸量的联合影响,实验结果如下图。
根据实验结果,选择
(4)谷氨酸棒杆菌的发酵:为了满足工业大规模发酵的需要,往往在接种发酵之前,对菌种进行
(5)谷氨酸的获得:发酵结束后,需对发酵液的产物进行分离、
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【推荐1】某研究小组进行了稻田固氮、解磷、解钾筛选及其复合菌剂对土壤培肥作用的系列实验。
(1)菌株筛选:从土壤中筛选出具有固氮、解磷和解钾能力的3种菌株, A、B、C,需选用的培养基分别为表中的______ 。这些培养基从功能上应属于______
(注:钾长石粉是一种富钾的铝硅酸盐矿物制成的粉末,其主要化学成分为、、、CaO等)
(2)菌株鉴定:将上述筛选出的菌株用______ 法分别接种到固氮、解磷和解钾培养基培养,观察菌落的______ 等特征,对菌株进行种属鉴定和计数。通过该计数方法获得的数据往往比实际菌体数少,原因是______ 。为保证鉴定结果准确无误,关键是要做到______ 。
(1)菌株筛选:从土壤中筛选出具有固氮、解磷和解钾能力的3种菌株, A、B、C,需选用的培养基分别为表中的
类型 | 组成 |
甲 | 甘露醇、、NaCl、、、,pH7.2 |
乙 | 蔗糖、、、、、钾长石粉,pH7.2 |
丙 | 葡萄糖、NaCl、KCl、、、,pH7.2 |
(注:钾长石粉是一种富钾的铝硅酸盐矿物制成的粉末,其主要化学成分为、、、CaO等)
(2)菌株鉴定:将上述筛选出的菌株用
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【推荐2】生物技术拥有巨大的发展空间,给人们的生活带来了深刻的变化。某兴趣小组翻阅资料发现橙皮精油和乳酸菌素都具有抑菌的效果,如图1为制备橙皮精油和乳酸菌素的流程及其抑菌实验结果,图2是与植物芳香油的提取相关的装置:
(1)筛选乳酸菌A时,所用培养基需经______ 法进行灭菌。将某种细菌接种到培养基上并均匀分布形成菌膜,最可能采用的接种方法是______ 。
(2)橙子的果肉可用于制备果酒和果醋。为监测发酵状况,可用显微镜直接计数法对发酵菌种进行计数,一段时间后统计结果分析可发现,培养液中的菌种种群数量变化趋势是______ 。
(3)橙皮精油的提取______ (填“可以”或“不可以”)使用图2所示装置,原因是____________ 。
(4)胡萝卜素是______ 色的结晶。从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是______ 法,加热时应该注意控制______ 。
(1)筛选乳酸菌A时,所用培养基需经
(2)橙子的果肉可用于制备果酒和果醋。为监测发酵状况,可用显微镜直接计数法对发酵菌种进行计数,一段时间后统计结果分析可发现,培养液中的菌种种群数量变化趋势是
(3)橙皮精油的提取
(4)胡萝卜素是
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【推荐3】我国饮用水卫生标准规定每毫升水样中细菌总数不得大于100个,大肠杆菌不得检出。某兴趣小组为测定本地自来水中的细菌总数和是否有大肠杆菌,进行了如下实验:
①分别配制营养琼脂培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCI、琼脂、H20)和伊红美蓝培养基(成分:蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红、美蓝、H2O),灭菌。
②取水样。
③先测定甲项指标:用灭菌吸管吸取ImL水样,涂布到营养琼脂培养基中;置于37 ℃培养24h后进行菌落计数。另设一个不加水样的空白对照组。
④用滤膜法测定乙项指标,装置和操作如下图。
回答下列问题:
(1)步骤②取水样前应先将自来水龙头用火焰灼烧3min,目的是_____ 。
(2)步骤③测定的指标甲是__ 。水样涂布前无需稀释,理由是____ 。
(3)步骤④测定乙项指标,主要观察滤膜上是否会出现___ 色菌落。配制伊红美蓝培养基时,先用蛋白胨、NaCl、琼脂配制基础培养基,在l00kPa、121℃条件下灭菌后,冷却至60。C左右,再加入经70kPa、115℃条件下灭菌的乳糖、伊红、美蓝水溶液,后者灭菌条件不同的原因是____ 。
(4)兴趣小组认为合格的自来水中细菌数量很少,担心检测不到,因而将取得的水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后,再稀释涂布平板计数。这样操作获得的数据___ (填“可信”或“不可信”).理由是____ 。
①分别配制营养琼脂培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCI、琼脂、H20)和伊红美蓝培养基(成分:蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红、美蓝、H2O),灭菌。
②取水样。
③先测定甲项指标:用灭菌吸管吸取ImL水样,涂布到营养琼脂培养基中;置于37 ℃培养24h后进行菌落计数。另设一个不加水样的空白对照组。
④用滤膜法测定乙项指标,装置和操作如下图。
回答下列问题:
(1)步骤②取水样前应先将自来水龙头用火焰灼烧3min,目的是
(2)步骤③测定的指标甲是
(3)步骤④测定乙项指标,主要观察滤膜上是否会出现
(4)兴趣小组认为合格的自来水中细菌数量很少,担心检测不到,因而将取得的水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后,再稀释涂布平板计数。这样操作获得的数据
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【推荐1】请回答下列有关生物技术实践方面的问题:
(1)培养基配制的步骤为:计算-称量-________ -________ -倒平板;为统计样品中活菌的数目,接种后,在37℃培养箱中培养适当时间后形成菌落,一般选择菌落数在______________ 个的平板进行计数。
(2)某同学采用血细胞计数板计数(规格为16×25,0.lmm3),统计4个中格中的细菌数,计算出每个小格所含细菌的平均数为2个,则每毫升样品中的细菌数是(稀释倍数为103)____________ 个。
(3)对于频繁使用的菌种可将试管放入______________ 保藏。
(1)培养基配制的步骤为:计算-称量-
(2)某同学采用血细胞计数板计数(规格为16×25,0.lmm3),统计4个中格中的细菌数,计算出每个小格所含细菌的平均数为2个,则每毫升样品中的细菌数是(稀释倍数为103)
(3)对于频繁使用的菌种可将试管放入
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【推荐2】回答有关微生物的问题.
Ⅰ、凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶,培育产高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向,图1为产高酶活力凝乳酶的枯草芽孢杆菌培育过程.
(1)枯草芽孢杆菌的芽孢是__________ 。A.休眠体 B.营养繁殖体 C.孢子 D.营养体
(2)图1所示的b过程的目的是为__________ ,接种用的平板培养基在制备时需注意的是__________ 。
A.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板B.倒好的培养基和培养皿要进行高压灭菌处理
C.等到平板培养基冷却凝固后才可以盖上培养皿的皿盖D.待平板冷却凝固约5﹣10min后将平板倒过来放置
Ⅱ、在35℃、40分钟内能凝固1mL10%奶粉所需的酶量为一个酶活力单位(U).图2表示图1中提取得到的各种凝乳酶活力检测结果。
(3)据图2所示,酶催化能力最强的是__________ 组,而各组酶催化能力存在差异的根本原因是_________ 的不定向性。
Ⅰ、凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶,培育产高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向,图1为产高酶活力凝乳酶的枯草芽孢杆菌培育过程.
(1)枯草芽孢杆菌的芽孢是
(2)图1所示的b过程的目的是为
A.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板B.倒好的培养基和培养皿要进行高压灭菌处理
C.等到平板培养基冷却凝固后才可以盖上培养皿的皿盖D.待平板冷却凝固约5﹣10min后将平板倒过来放置
Ⅱ、在35℃、40分钟内能凝固1mL10%奶粉所需的酶量为一个酶活力单位(U).图2表示图1中提取得到的各种凝乳酶活力检测结果。
(3)据图2所示,酶催化能力最强的是
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【推荐3】金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌,由于抗生素的滥用,出现了抗药性强的金黄色葡萄球菌,几乎能抵抗人类所有的药物,但是万古霉素可以对付它。请回答下列问题:
(1)有人认为,抗药性强的金黄色葡萄球菌的产生是滥用抗生素诱发了金黄色葡萄球菌基因突变所致。该观点______ (填“正确”或“不正确”),原因是______________________________ 。
(2)若想对某样品中的超级细菌进行计数,应对样品中的菌株进行纯化,一般采用______ 法进行接种。接种后的平板应______ 放入培养箱中培养一段时间后,统计平板上的菌落数目,这样放置的好处是___________________________ 。
(3)研究发现,不同浓度的万古霉素的效果不同,为探究万古霉素杀灭抗药性强的金黄色葡萄球菌的最佳浓度,实验的设计思路是________________________________________________ 。
(1)有人认为,抗药性强的金黄色葡萄球菌的产生是滥用抗生素诱发了金黄色葡萄球菌基因突变所致。该观点
(2)若想对某样品中的超级细菌进行计数,应对样品中的菌株进行纯化,一般采用
(3)研究发现,不同浓度的万古霉素的效果不同,为探究万古霉素杀灭抗药性强的金黄色葡萄球菌的最佳浓度,实验的设计思路是
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【推荐1】多氯联苯(PCB)是一种对人体有害的有机物,某科技小组欲从受PCB污染的土壤中分离出能分解PCB的细菌。请回答下列问题:
(1)要从受PCB污染的土壤中分离出能分解PCB的细菌,应配制以___________ 作为唯一的碳源的选择培养基;配制培养基时用到的玻璃器皿需用___________ 进行灭菌。
(2)分离前可通过选择培养增加土壤中PCB分解菌的浓度,选择培养时需要不断振荡锥形瓶的目的是___________ 。
(3)用稀释涂布平板法统计PCB分解菌的浓度时,常需同时培养空白培养基,其目的是___________ 。若实验中发现空白培养基上生长有3个菌落,为准确测定样液中PCB分解菌的浓度,则需要___________ 。
(4)在纯化土壤中的PCB分解菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是___________ ,应当怎样操作才可避免此种现象?______________________ 。
(1)要从受PCB污染的土壤中分离出能分解PCB的细菌,应配制以
(2)分离前可通过选择培养增加土壤中PCB分解菌的浓度,选择培养时需要不断振荡锥形瓶的目的是
(3)用稀释涂布平板法统计PCB分解菌的浓度时,常需同时培养空白培养基,其目的是
(4)在纯化土壤中的PCB分解菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是
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【推荐2】芳香黄杆菌是食品行业常见的弹性蛋白酶产生菌,弹性蛋白酶具有良好的嫩化作用,通过处理难以食用的韧带、筋腱等蛋白原料,丰富了食物资源,提高了农副产品的深加工。芳香黄杆菌初筛培养基的部分配方如下表:
(1)根据表中配方,根据物理性质分析,该培养基属于____________ 培养基,为芳香黄杆菌提供主要氮源的物质是___________ 。
(2)为了提高弹性蛋白酶生产菌株的产量,需借助一定的方法优化菌种,常见的弹性蛋白酶生产工艺如图所示:
①接种前,应用_____________ 法对初筛培养基进行灭菌处理,由图可知,将菌悬液接种到初筛培养基的方法是___________ 。
②高通量筛选是微生物菌种选育过程中常用的筛选技术,它以微孔板为载体,将诱变后培养得到的单菌落接种到含有发酵培养基的微孔板中培养,可以实现同一时间检测上万份产物产量的目标,据此分析弹性蛋白酶生产工艺中进行②③④的目的是_____________ 。发酵培养基选用液体培养基的主要目的是___________ 。
③单个细胞在平板上会形成菌落,研究人员常可以通过观察菌落的____________ (至少写出两个)等特征初步区分不同种的微生物。实验的最后一步是分离提取弹性蛋白酶,分离提取可以采用_________________ 法,该方法是根据蛋白质相对分子质量的大小来进行分离的。
弹性蛋白 | 酵母膏 | 葡萄糖 | KH2PO4 | K2HPO4 | MgSO4·7H2O | 琼脂 |
0.8g | 0.1g | 0.1g | 0.05g | 0.1g | 0.01g | 2g |
(1)根据表中配方,根据物理性质分析,该培养基属于
(2)为了提高弹性蛋白酶生产菌株的产量,需借助一定的方法优化菌种,常见的弹性蛋白酶生产工艺如图所示:
①接种前,应用
②高通量筛选是微生物菌种选育过程中常用的筛选技术,它以微孔板为载体,将诱变后培养得到的单菌落接种到含有发酵培养基的微孔板中培养,可以实现同一时间检测上万份产物产量的目标,据此分析弹性蛋白酶生产工艺中进行②③④的目的是
③单个细胞在平板上会形成菌落,研究人员常可以通过观察菌落的
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【推荐3】某生物兴趣小组欲对湖水中的光能自养型微生物进行分离和计数,按照如下配方配制了1L培养基。结合所学知识,回答下列问题:
(1)按照用途划分,该实验需配制的培养基属于_____ 培养基,在添加琼脂的过程中不断用玻璃棒搅拌的目的是_____ ,通常对培养基采用的灭菌方法是_____ 。
(2)配方中(NH4)2SO4 的主要作用是_____ ;倒平板后应使用_____ 法进行接种。
(3)根据所学知识,推测按照配方配制的培养基_____ (填“能”或“不能”)达到实验目的,原因是_____ 。欲达实验目的,接种好的平板在培养时还应置于_____ (环境)下培养。
成分 | 葡萄糖 | KH₂PO4 | K₂HPO4 | (NH4)2SO4 | MgSO4·7H2O | 琼脂 | NaCl |
质量/g | 5 | 0.5 | 0.5 | 2 | 0.2 | 20 | 1 |
(2)配方中(NH4)2SO4 的主要作用是
(3)根据所学知识,推测按照配方配制的培养基
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