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题型:非选择题-实验题 难度:0.65 引用次数:480 题号:19138669
“蓝白斑筛选”是一种基于质粒载体的DNA重组技术,它可通过改变质粒载体中的DNA序列,实现对菌落颜色的调控,如图所示。回答下列问题:
   
(1)将外源DNA片段与质粒连接成重组质粒时,所用的酶催化形成的化学键是____________。该重组质粒除具有外源DNA、标记基因外,还具有的结构有复制原点、____________、终止子等。
(2)将重组质粒转入大肠杆菌前,需在低温﹑低浓度的_____________溶液中处理大肠杆菌,目的是____________。在转化过程中,实际转化效率介于50%~85.7%,推测原因可能与____________(答两点)有关。
(3)在筛选导入重组质粒的大肠杆菌时,培养基中应加入____________。培养一段时间的平板上,含有重组质粒的大肠杆菌菌落呈白色的原因是____________

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非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐1】某单子叶作物甲不具有抗锈病的性状,科学家将某种生物的抗锈病基因分离出来,并将该基因导入作物甲体内,成功培育了抗锈病的新品种。下图中EoRI、BamHI为两种限制酶,箭头所指为限制酶的酶切位点。已知作物甲细胞对四环素敏感,抗锈病基因可以通过EeoRI或BamHI获得。回答下列问题:

(1)应使用___________酶和限制酶___________(填“EcoRI”或“BamHI”)构建重组质粒,不使用另一种限制酶的理由是___________
(2)在获得抗锈病基因后,采用___________技术在体外进行大量扩增,该技术的前提是需要有一段已知抗锈病基因的核苷酸序列,以便根据该序列合成___________
(3)将抗锈病基因导入作物甲的细胞中一般不适合采用农杆菌转化法,其原因最可能是___________
(4)为了初步检测作物甲的细胞中是否导入了抗锈病基因,可以在培养基中添加___________,若在该培养基上作物甲细胞能增殖或不死亡,则说明作物甲细胞中___________(填“一定”“可能”或“一定没有”)导入了抗锈病基因。
2022-07-05更新 | 67次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
名校
【推荐2】科研人员拟用同源重组的方法敲除金黄色葡萄球菌的SigB基因。回答下列问题:
(1)同源重组的原理如图1所示。图中剪刀代表的是一种核酸内切酶。当DNA被切开后,细胞中具有修复功能的酶可将这些切开DNA片段进行重新连接,这样SigB基因就能被其它碱基序列替换,实现SigB基因的敲除。结合图1的信息,为实现基因的敲除,供体DNA片段的碱基序列应为____________

   

(2)科研人员设计了供体DNA片段,作为目的片段构建重组质粒,导入金黄色葡萄球菌中,敲除金黄色葡萄球菌的SigB基因。
①实验中可替换SigB基因的片段是卡那霉素抗性基因,卡那霉素抗性基因的作用是_______
②科研人员需将SigB基因上游、卡那霉素抗性基因、SigB基因下游利用____________扩增技术实现供体DNA片段的构建。构建过程如图2所示。

   

由图2可知,SigB基因上游和卡那霉素抗性基因变性后再复性,SiB基因上游和卡那霉素抗性基因单链能够通过____________原则形成局部双链结构,然后在____________催化作用下形成SigB基因上游和卡那霉素抗性基因融合片段。按照此操作,可将SigB基因上游和卡那霉素抗性基因融合片段与SigB基因下游融合构建出供体DNA片段。
③通过设计引物可以使卡那霉素抗性基因扩增后,两侧应含有与SigB基因上、下游相同的碱基序列。从图3的p1~p4中选取的引物组合是____________,该引物组合要如何改造才能使其两侧含有与SigB基因上、下游相同的碱基序列____________

   

(3)有人提出:“可以用这个方法,将人受精卵中新冠病毒受体基因进行敲除,使得不受病毒感染。”你是否同意这种观点,从安全和伦理的角度分别写出理由_____(分别答出一点即可)。
2023-09-19更新 | 241次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐3】牛雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原,可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体,筛选胚胎进行移植,以利用乳腺生物反应器进行生物制药。请回答下列问题:
(1)为了大量制备H-Y抗体,可以将H-Y抗原基因导入到大肠杆菌或酵母菌进行表达。与大肠杆菌相比,选择酵母菌获取H-Y的优势是____________
(2)下图的三个DNA片段上依次表示出了EcoR I、BamH I和Sau3A I三种限制酶的识别序列与切割位点。经BamH I酶切后得到的目的基因可以与载体(不含BamH I识别序列)被________酶切后的产物连接,理由是_________________

(3)可选择_____期的胚胎,切下少量______细胞进行性别鉴定。待检验的细胞通常需要扩大化培养,当培养液中细胞数量不再增加时,若要使细胞继续增殖,可采用的方法是进行________
(4)利用H-Y抗体检测性别的原理是__________________。还可用SRY-PCR的方法鉴定性别,在PCR过程中若1个DNA分子扩增了4次,则消耗引物_____个。
2019-12-17更新 | 253次组卷
共计 平均难度:一般