【推荐1】常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精。取从自然界中采集的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养。图乙是经过图甲步骤A纯化培养的结果，图丙是步骤C操作培养过程中，得到的一个菌落分布平板。请回答下列问题：

(1)步骤A和C所用的培养基中的凝固剂是_______，培养基灭菌的方法是_______，灭菌后的培养基要进行倒平板操作，该操作过程应该在_______旁进行，待平板冷凝后，要将平板倒置，其原因之一是_______。
(2)图乙结果显示，在培养基上接种时划线的顺序依次是_______（用编号表示），步骤B操作中需用_______挑取单个菌落进行接种。
(3)步骤C的接种方法是_______，根据图丙结果判断，接种时可能的操作失误是_______。
(4)将培养基上的酵母菌菌株转接到仅以_______为碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。
(5)将经上述流程培育获得的酿酒酵母进行酒精发酵能力测试，能用于生产的酵母菌除了能分解木糖外，还需要具备的条件有_______和_______。

【推荐3】中国家电研究院的洗衣机专家指出，洗衣机内部的环境非常潮湿，洗衣机使用时间越长，内部滋生微生物的机会就越大。看似干净的洗衣机，其内部隐藏着一个健康的隐性杀手。某生物兴趣小组的同学，利用内桶背面的污垢进行了相关实验室实验。
（1）培养洗衣机内部微生物的培养基中一般含有_______________。
（2）该实验要制备固体培养基，在倒平板操作后，将平板倒置。这样做的目的是______。
（3）以下各项中，需要灭菌的是__________。
①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻璃棒、试管、烧瓶和吸管；③实验操作者的双手。
（4）为了检测污垢中含有微生物的情况，要将污垢制成水样稀释，然后将稀释水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，这种方法称为______。下图所示的四种菌落分布情况中，不可能由该方法得到的是__________。该方法统计菌落数时是否需要对照组？__________。为什么？__________________________________________________。

（5）判断污垢中微生物的种类可以依据菌落的形状、大小等菌落特征进行初步的鉴定。实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，此目的是__________。

【推荐1】自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N₂的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。请回答：

(1)步骤③将土壤悬浮液稀释了____________倍，步骤④所用的接种工具是____________。
(2)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的____________培养基，并加入琼脂后进行高压蒸汽灭菌、倒平板。纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是_______。
Ashby培养基：甘露醇（C₆H₁₄O₆）10g，KH₂PO₄0．2g，MgSO4·7H₂O0．2g，NaCl0．2g，K₂SO₄0．3g，CaCO₃5g，蒸馏水1000mL。
LB培养基：蛋白胨1g，酵母提取物5g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，pH7．0-7．2
(3)将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩大培养48小时，经离心后收集下层细胞并转移至特定培养基中进行固氮能力的测定，筛选出固氮能力最强的菌种CM12为进一步鉴定其固氮，科研人员选用发芽一致的玉米种子进行3组盆栽实验，30d后测定土壤微生物有机氮含量，结果如下图。

CK：对照处理组
N：尿素处理组（每盆土壤中50mL有全营养液：成份为在1000mL无氮植物营养液中加入0．12g尿素）
CM12：自生固氮菌CM12处理组（每盆土壤浇50mL接种自身固氮菌的无氮植物营养液）
①对照组（CK）的处理为____________。
②实验结果表明：____________
③自生固氮菌较共生固氮菌（如根瘤菌）的应用范围更广，原因是____________。

【推荐2】随着新冠疫情的持续，人类消耗了大量的一次性口罩，这些口罩不及时处理会对环境造成一定的污染。某科研人员欲筛选出能高效降解一次性口罩（主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维）的细菌，设计了如图所示的流程。回答下列问题：
   
(1)筛选目的菌的培养基应以______为唯一碳源。
(2)图中“甲”指的是_______________，目的是____________ 。
(3)已知目的菌分解聚丙烯纤维需要多种酶的共同参与，如果用凝胶色谱法分离其中的酶，相对分子质量小的酶移动速度______。目的菌比酶分子大得多，工厂化降解聚丙烯纤维时，通常采用______法来固定目的菌。影响目的菌降解聚丙烯纤维效果的因素有温度、pH以及_________________等（答出两点即可）。
(4)若在3个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为10⁵的土壤样品0.1mL，培养一段时间，平板上菌落数分别为35个、33个、34个，则可推测每克土壤样品中的细菌数为______个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是_______________。

【推荐3】研究人员按照如图1所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S（一种含氮有机物）的细菌菌株。Ⅰ的组分为无机盐、水和S,Ⅱ的组分为无机盐、水、S和Y。

回答下列问题：
(1)实验中，培养基灭菌通常采用______________法。Y物质是______________。Ⅰ、Ⅱ培养基均属于______________（填选择或鉴别）培养基。
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×10⁸个/mL,若要在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释____倍。
(3)淤泥中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即__________________________________________。
(4)物质S在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。从淤泥中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图2所示）。如果要得到目标菌，应该选择_________菌落进一步纯化，选择的依据是__________________________________。

【推荐1】解磷菌是一种能将土壤中植物不能利用的磷转化为植物可以利用磷的功能微生物(主要为细菌)，在提高土壤中有效磷含量、促进磷循环方面发挥着重要作用。解磷菌能分解含磷化合物使得菌落周围出现透明圈。下图为从某植物根际土壤中筛选出高效解磷菌的部分流程示意图，步骤Ⅰ表示将1 g土壤加入100 mL灭过菌的PVK培养基培养。36 h后，取10 mL培养液接种于100 mL PVK培养基继续富集培养；连续富集培养3次后进行实验步骤ⅡⅣ(B、C中培养基的营养成分与A相同)。请据图回答：

(1)用于培养解磷菌的培养基在接种前需要通过_________法进行灭菌。从成分上看，与A相比，B中多了____________(填物质名称)。
(2)在操作Ⅱ、Ⅲ中，采用的接种方法分别是___________、____________。
(3)为了尽快观察到解磷菌培养的实验结果，应将接种了样品的平板倒置于___________中培养，并同时在另一平板上接种无菌水作为对照进行实验。
(4)在固体培养基中分离培养出解磷菌后，需通过测量___________________直径，比较它们的比值以确定其解磷能力从而筛选出目标菌株。
(5)分离出的解磷菌，需通过分子鉴定以确定种属关系。常用的方法是对细菌的核糖体RNA(16S rRNA)所对应的16S rDNA进行序列分析(基因公司测序)，在测序前一般采用菌落PCR的方法进行扩增。

①在PCR实验的具体操作时，按照事先设计好的配方用_______________向微量离心管中依次加入各组分，按照上图的设计设置好PCR程序，其中a表示________________。
②在进行菌落PCR时，首先根据____________两端的脱氧核苷酸序列来设计引物。已知相关的上游引物序列为5'-GCAATGCGTAGCCTCT—3'，则下游引物的序列最合适的是_______。
a． 5'—ACAATATGTATAATCT—3' b． 5'—TCATGAGCGCATAGTT—3'
c． 5'—GCAATGCGTGCATTGC—3' d． 5'—AGAGGCTACGCATTGC—3'
③PCR 扩增时，除加入16S rDNA作为模板、引物外还需要加入________________等，如果将其复制20次，需要引物________对。

【推荐2】金黄色葡萄球菌在自然界广泛存在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到，因此食品受其污染的机会很多。金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌，可引起许多严重感染。其在含适量血液的血平板上生长时，会破坏菌落周围的红细胞，使血平板褪色。通过该方法可检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌，操作流程如图所示。请回答下列问题：

(1)肉汤培养基中的NaCl可为微生物的生长提供__________（营养），此外该培养基中还需含有的营养物质有__________，图中振荡培养的目的是__________。
(2)制备血平板时需在肉汤培养基的基础上加入__________成分。根据图示，将菌液接种到血平板的方法是__________。
(3)实验过程中，需要同时培养接种无菌水的血平板，目的是__________。
(4)结合（3），能够说明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌的实验结果是__________。

【推荐3】某研究团队从原油提炼、加工厂附近采集植物根际土壤样品，从中筛选出能高效降解石油（由不同的碳氢化合物混合组成）的菌株，以便利用根际微生物进行石油污染生物修复。筛选的主要步骤如下图。

回答下列问题：
(1)图中甲、乙都应以______为唯一碳源制备的选择培养基，选择培养基的制备原理是____________。
(2)获得纯净培养物的关键是______。筛选过程中防止其他微生物污染的措施有____________。（答出2点）。
(3)目前，已知有200多种微生物（如嗜冷杆菌等）能降解石油，但多数微生物的降解速率都很低，且一种菌往往只能降解一种特定类型的化合物，这就要求在实际选择降解石油的菌株时应该注意____________（答出2点）。步骤⑤的分离、筛选过程中，比较不同菌株降解石油能力大小的方法是__________________。
(4)可以采用___________技术固定高效降解石油的菌种来处理含石油的海水，相对于固定化酶技术而言，该技术的主要优点有______________________________。

【推荐2】安莎霉素是由稀有放线菌产生的次级代谢产物，具有较高的抗菌活性和药用价值。科研人员通常从深海采集淤泥样本，再分离、纯化并筛选出产安莎霉素的放线菌。稀有放线菌的分离培养流程如下图所示。回答下列问题：

(1)过程①的接种方法是________________，从物理性质分析，待测培养基属于________。
(2)统计菌落种类和数量时，要每隔24 h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致________。一般选择菌落数在________的平板进行计数。若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个每平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。
(3)研究人员发现产安莎霉素的放线菌具有一个普遍的共性——氨基酸缺陷，从培养基成分分析，基本培养基与完全培养基存在差异的成分是________。
(4)纯化筛选出的产安莎霉素的放线菌在-20℃条件下长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。

【推荐3】随着垃圾分类实行，餐厨垃圾高效处理迫在眉睫。餐厨废液中含有淀粉、蛋白质等有机物能够被微生物分解并利用。回答下列问题。
（1）传统餐厨垃圾主要以填埋、焚烧等方式进行处理，此种方式不可取的原因是____________。
（2）为探究处理餐厨垃圾的适宜方式，研究者进行了如下实验。
①以某食堂提供的午餐、晚餐残余混合物为材料，制成4种不同浓度的发酵液。
②将取自某污水处理厂的菌种加入发酵罐中，间隔不同时间分别加入等量不同浓度的发酵液，在厌氧条件下进行发酵。
③35℃下发酵并测定甲烷的产率，结果如下图。据图分析，你认为对餐厨垃圾较为适宜的处理及依据是_________________。

（3）为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比，来制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：
①将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：

编号	R0	R1	R2	R3
圆褐固氮菌：巨大芽孢杆菌	1:0	0:1	1:1	2:1

将上表菌液外别接种于100mL某餐厨垃圾废液中进行振荡培养，振荡处理的目的是________________。本实验还需设置对照组为______________。
②培养3天后测定活菌数，取一定量菌液进行______________稀释，然后分别取0.1ml的菌液采用______________法接种于基本培养基中培养。进行计数时，可依据______________对两种菌进行区分，并选取菌落数在______________内的平板。实验结果表明，两菌种接种量比例为1:1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。