基因递送是植物遗传改良的重要技术之一,我国多个实验室合作开发了一种新型基因递送系统(切—浸—生芽Cut-Dip-Budding,简称CDB法)。图1与图2分别是利用常规转化法和CDB法在某植物中递送基因的示意图。
(1)图1中,从外植体转变成愈伤组织的过程属于_____ ;从愈伤组织到幼苗的培养过程需要的激素有生长素和_____ ,该过程还需要光照,其作用是_____ 。
(2)图1中的愈伤组织,若不经过共培养环节,直接诱导培养得到的植株可以保持植株A的_____ 。图1中,含有外源基因的转化植株A若用于生产种子,其包装需标注_____ 。
(3)图1与图2中,农杆菌侵染植物细胞时,可将外源基因递送到植物细胞中的原因是_____ 。
(4)已知某酶(PDS)缺失会导致植株白化。某团队构建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体(含有绿色荧光蛋白标记基因),利用图2中的CDB法将该重组载体导入植株B,长出毛状根,成功获得转化植株B.据此分析,从毛状根中获得阳性毛状根段的方法是_____ ,图2中,鉴定导入幼苗中的基因编辑载体是否成功发挥作用的方法是_____ ,依据是_____ 。
(5)与常规转化法相比,采用CDB法进行基因递送的优点是_____ (答出2点即可)。
回答下列问题。
(1)图1中,从外植体转变成愈伤组织的过程属于
(2)图1中的愈伤组织,若不经过共培养环节,直接诱导培养得到的植株可以保持植株A的
(3)图1与图2中,农杆菌侵染植物细胞时,可将外源基因递送到植物细胞中的原因是
(4)已知某酶(PDS)缺失会导致植株白化。某团队构建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体(含有绿色荧光蛋白标记基因),利用图2中的CDB法将该重组载体导入植株B,长出毛状根,成功获得转化植株B.据此分析,从毛状根中获得阳性毛状根段的方法是
(5)与常规转化法相比,采用CDB法进行基因递送的优点是
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更新时间:2023-07-09 08:44:33
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【推荐1】近50年来,全球不断出现许多新的不同种类的冠状病毒,分别在人类及动物中引起了不同疾病,冠状病毒一般有4种结构蛋白:S蛋白(棘突蛋白,可与人体黏膜细胞表面的ACE2受体结合,它是病毒入侵易感细胞的关键蛋白)、M蛋白(膜蛋白,病毒体中含量最多的蛋白,可以保持病毒的完整形态,并与N蛋白相连接)、E蛋白(包膜蛋白,与病毒聚合及释放的功能相关)、N蛋白(核衣壳蛋白)。新冠病毒的遗传物质是单链RNA,下图1为新冠病毒侵染宿主细胞后合成子代病毒过程的示意图,图2表示科研人员研制新冠病毒疫苗的一条技术路线。根据以上信息回答下列有关问题:
(1)由图1可知,新冠病毒的遗传物质RNA__________ (填“具有”或“不具有”)直接翻译为蛋白质的功能;以负链RNA为模板合成的亚基因组RNA的功能是__________ 。S蛋白与核衣壳的组装场所是__________ 。
(2)图2中③过程需要用__________ 处理,选择大肠杆菌做受体细胞的主要原因是_____________ 。
(3)pVAX1是一种可以应用于人体的载体质粒,其化学本质是__________ ,疫苗I和疫苗Ⅱ同为通过基因工程获得的疫苗,它们在人体内引起的免疫效应的不同之处是__________ 。
(1)由图1可知,新冠病毒的遗传物质RNA
(2)图2中③过程需要用
(3)pVAX1是一种可以应用于人体的载体质粒,其化学本质是
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【推荐2】为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。回答下列问题:
(1)酶D基因和转运肽基因所含的三种限制酶(Cla Ⅰ、Sac Ⅰ、Xba Ⅰ)的切点如图甲所示,现为获得融合基因,研究人员采用PCR法扩增酶D基因,首先要依据基因的________ 设计引物,同时从拟南芥基因文库中获取转运肽基因,再用________ 和________ 酶处理两个基因后,即可得到________ 端与________ 端(填图中字母)相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的TDNA中,构建________ 并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含四环素的培养基上,其目的是________________________ ,再利用液体培养基振荡培养,可以得到用于转化的侵染液。
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是_______________________ ,进一步筛选后获得转基因油菜细胞,该细胞通过________________ 技术,可培育成转基因油菜植株。
(1)酶D基因和转运肽基因所含的三种限制酶(Cla Ⅰ、Sac Ⅰ、Xba Ⅰ)的切点如图甲所示,现为获得融合基因,研究人员采用PCR法扩增酶D基因,首先要依据基因的
(2)将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的TDNA中,构建
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(0.65)
【推荐3】含有人类疾病基因的转基因动物模型,常用于致病机理的研究及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。请据图分析并回答下列问题:
(1)卵母细胞可从雌鼠的______________ 中获取。
(2)图中的高血压相关基因作为______________ ,受体细胞是______________ 。
(3)子代大鼠如果______________ 和______________ ,即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已经成功表达,可将其作为高血压转基因动物模型。
(4)在上述转基因大鼠的培育过程中,涉及的胚胎工程技术有______________ 、早期胚胎培养和胚胎移植。
(1)卵母细胞可从雌鼠的
(2)图中的高血压相关基因作为
(3)子代大鼠如果
(4)在上述转基因大鼠的培育过程中,涉及的胚胎工程技术有
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名校
【推荐1】转基因抗病香蕉的培育过程如图所示,质粒上有Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四种限制酶切割位点。请回答:
(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶_____ 对含抗病基因的DNA和质粒进行切割,再用_____ 将二者“缝合”。
(2)将目的基因导入植物细胞常用方法有多种,除图中所示方法外还有_____ 法和_____ 法。
(3)能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是_____ (填字母序号)。
(4)利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。培养基中除了含有一定的营养物质外还必须含有_____ 等植物激素,它们会在_____ (填图中标号)阶段发挥作用。对植株进行抗病接种实验属于_____ 的鉴定。
(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶
(2)将目的基因导入植物细胞常用方法有多种,除图中所示方法外还有
(3)能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是
A.启动子 | B.终止子 | C.复制原点 | D.标记基因 |
(4)利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。培养基中除了含有一定的营养物质外还必须含有
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解题方法
【推荐2】下面为利用农杆菌转化法制备转基因植物的过程图,探究下列问题:
(1)重组Ti质粒的构建需要哪些酶的作用?_____ 。
(2)在用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中,一定要将目的基因插入到Ti质粒的TDNA上的原因是什么?_____ 。
(3)将基因表达载体导入农杆菌细胞时,应怎样处理农杆菌细胞?_____ 。
(4)用什么方法检测目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA上?_____ 。
(5)用什么方法检测目的基因是否发挥作用?_____ 。
(1)重组Ti质粒的构建需要哪些酶的作用?
(2)在用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中,一定要将目的基因插入到Ti质粒的TDNA上的原因是什么?
(3)将基因表达载体导入农杆菌细胞时,应怎样处理农杆菌细胞?
(4)用什么方法检测目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA上?
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名校
【推荐3】利用某高致病性病毒特异性的VP40抗原蛋白来制备单克隆抗体的流程图如下,请回答:
(1)过程①利用质粒构建表达载体,质粒的来源主要是___________ ,质粒能够在受体细胞中________ ,是其作为运载体的原因之一。
(2)过程②用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于___________ 。在培养基中加入四环素,能获得含有目的基因的受体菌,原因是___________ 。可以利用___________ 检测VP40基因是否进入大肠杆菌。
(3)用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞,杂交瘤细胞的特点是___________ ;对杂交瘤细胞还需进行___________ 培养和抗体检测,最终获得单克隆抗体。
(1)过程①利用质粒构建表达载体,质粒的来源主要是
(2)过程②用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于
(3)用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞,杂交瘤细胞的特点是
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(0.65)
【推荐1】利用基因工程技术,可以使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”。下图是科学家培育生产血清白蛋白奶牛的过程,回答下列问题:
(1)①→③过程使用的工具酶是______ ,②导入受体细胞前须构建_____ ,不能将血清白蛋白基因直接导入受体细胞的原因是____________ 。
(2)未受精的卵细胞必须培养至________ 期才能用于核移植,核移植时,实际并不是将体细胞核直接吸出再注入去核的卵细胞,而是将完整的供体细胞注入到_____ 与________ 的间隙中再经电激使两细胞融合,供体核才进入卵细胞。
(3)核移植后构建的重组细胞需用物理或化学方法激活,激活的目的是________ 。激活后的细胞须在无菌、无毒的环境中培养,除对培养液和所有培养用具进行无菌处理外,还必须采取的措施有__________ 。
(4)重组细胞需培育至图中④______ 才能用于胚胎移植,未用完的胚胎需_____ 保存,个体⑦中的血清白蛋白基因存在于____ (填“所有细胞”或“乳腺细胞”)中。
(1)①→③过程使用的工具酶是
(2)未受精的卵细胞必须培养至
(3)核移植后构建的重组细胞需用物理或化学方法激活,激活的目的是
(4)重组细胞需培育至图中④
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【推荐2】某农作物的A、a和B、b这两对等位基因分别位于两对同源染色体上,下图表示用AABB和aabb两个品种的某农作物培育出AAbb品种的过程。回答下列问题:
(1)由品种AABB、aabb经过①、②、③过程培育出了新品种,②过程后,应通过_______________ 的方式来逐代淘汰不符合生产要求的个体。
(2)过程⑤常采用________________ 方法得到Ab个体。
(3)比较①②③、①⑤⑥和⑦这三种育种方式,其中最不容易获得AAbb新品种的育种方式是________________ ,原因是________________________________ 。
(4)过程④的育种方式为________________ 。
(5)对aabb植株进行⑦过程的辐射处理后,发现1条染色体上的b基因移到了含有a基因的非同源染色体上,这种变异类型属于________________ 。在减数分裂过程中,该基因与另一个b基因________________ (不/一定/不一定)发生分离,形成的配子中含有基因b配子的基因组成是________________ 。
(1)由品种AABB、aabb经过①、②、③过程培育出了新品种,②过程后,应通过
(2)过程⑤常采用
(3)比较①②③、①⑤⑥和⑦这三种育种方式,其中最不容易获得AAbb新品种的育种方式是
(4)过程④的育种方式为
(5)对aabb植株进行⑦过程的辐射处理后,发现1条染色体上的b基因移到了含有a基因的非同源染色体上,这种变异类型属于
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适中
(0.65)
【推荐3】干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵袭后产生的一种糖蛋白,干扰素几乎能抵抗所有病毒引起的感染。科学家利用人干扰素基因运用动物乳腺生物反应器技术生产干扰素。回答下列问题。
(1)基因工程中获取目的基因的常用方法有___________ 、___________ 。
(2)将获得的人干扰素基因进行PCR扩增,目前在PCR体系中使用Taq酶而不使用哺乳动物体内的DNA聚合酶的主要原因是______________________ 。
(3)利用动物乳腺生物反应器技术生产干扰素,必须将人的干扰素基因与___________ 的启动子等调控组件重组在一起导入哺乳动物受精卵中,进而培育出转基因动物。
(4)利用动物乳腺生物反应器生产干扰素需对受精卵形成的早期胚胎进行性别鉴定,该过程需选择性染色体组成为___________ 的胚胎进行培养。为检测人干扰素基因是否被导入受精卵中,并在动物体内正常表达,可采用的分子检测方法有___________ 、___________ 。
(1)基因工程中获取目的基因的常用方法有
(2)将获得的人干扰素基因进行PCR扩增,目前在PCR体系中使用Taq酶而不使用哺乳动物体内的DNA聚合酶的主要原因是
(3)利用动物乳腺生物反应器技术生产干扰素,必须将人的干扰素基因与
(4)利用动物乳腺生物反应器生产干扰素需对受精卵形成的早期胚胎进行性别鉴定,该过程需选择性染色体组成为
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名校
【推荐1】2023年1月,两北农林科技大学某团队利用核移植技术培育了一批克隆高产长寿奶牛,现在“克隆”一词的含义范围较大,包括不同系统层次的“复制”,例如个体水平、细胞水平、分子水平的克隆。请回答下列问题:
(1)高产长寿奶牛个体的克隆成功,说明动物的_______ 具有全能性,核移植过程中,从牛的卵巢采集的卵母细胞需在体外培养到______ 期。为提高重构胚的利用率,可采用_____ 技术,该技术可以看作动物克隆的方法之一。
(2)个体水平的克隆广义上还包括植物组织培养技术和微生物的繁殖等,将外植体培养得到完整植株时,植物激素中______ 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素,它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向;分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是______ 。
(3)单克隆抗体是由单一细胞克隆产生大量的单一抗体。美西螈具有很强的再生能力,研究表明,美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制,科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体。在抗CD14单克隆抗体制备时,最先需给小鼠注射_____ ,其目的是______ 。单克隆抗体制备过程至少需要两次筛选,第2次筛选时,检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体,原因是______ 。
(4)分子水平的克隆如基因的克隆可采用PCR技术,PCR的产物常采用_____ 来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与_______ 等有关(至少答出两点)。
(1)高产长寿奶牛个体的克隆成功,说明动物的
(2)个体水平的克隆广义上还包括植物组织培养技术和微生物的繁殖等,将外植体培养得到完整植株时,植物激素中
(3)单克隆抗体是由单一细胞克隆产生大量的单一抗体。美西螈具有很强的再生能力,研究表明,美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制,科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体。在抗CD14单克隆抗体制备时,最先需给小鼠注射
(4)分子水平的克隆如基因的克隆可采用PCR技术,PCR的产物常采用
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【推荐2】工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低,价格高,基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路。科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产植株,通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。请分析并回答问题:
(1)提取了高产植株的全部DNA后,要想快速大量获得该突变基因可以采用____________ 技术。
(2)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生双链cDNA片段,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列____________ (填“相同”或“不同”)。
(3)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:
用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是____________ ,构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是____________ 识别结合位点。
(4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是____________ ,检测目的基因是否发挥功能的第一步,需要检测_____________ 。最后还需要通过____________ 技术培育出青蒿植株。
(1)提取了高产植株的全部DNA后,要想快速大量获得该突变基因可以采用
(2)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生双链cDNA片段,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列
(3)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:
用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是
(4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是
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【推荐3】竹芋科植物果实中含有一种甜蛋白,其甜度为蔗糖的三千倍,是理想的甜味剂。某研究小组试图把甜蛋白基因(目的基因)导入黄瓜中,以改良这种黄瓜的品质。获得转基因黄瓜植株的流程图如下图,请回答:
(1)通过步骤①和②可人工合成目的基因。在步骤②中先以RNA为模板在____ 酶的作用下合成DNA,然后通过一系列实验从中筛选出_____ 基因。还可以根据甜蛋白的氨基酸序列推测出___ 序列,再用化学方法合成。
(2)可以通过____ 技术获得大量目的基因,利用该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列。以便根据这一序列合成_____ 。
(3)导入了目的基因的叶片组织细胞经过步骤③____ 和④_____ 后形成了完整的植株,说明_____ 。
(4)可以通过_____ 技术检测黄瓜植株中是否含有甜蛋白。
(1)通过步骤①和②可人工合成目的基因。在步骤②中先以RNA为模板在
(2)可以通过
(3)导入了目的基因的叶片组织细胞经过步骤③
(4)可以通过
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