植物基因工程中常用到植物组织培养技术。为了获得纯合的转K基因植株,实验小组设计了一个实验流程,其主要内容如图所示。回答下列问题:
(1)用农杆菌转化法导入基因时,一般将目的基因嵌入到Ti质粒的_____________ 上。图中A代表的是_____________ 。
(2)由单核花粉粒培育出愈伤组织的过程称为_____________ ,其实质是_____________ 。
(3)B过程可用_____________ 处理愈伤组织的细胞,从而使染色体数目加倍。由含K基因的愈伤组织细胞(2n)培育出幼苗的过程中,_____________ (填“需要”或“不需要”)光照处理,原因是_____________ 。
(4)经过培养、筛选最终得到的二倍体植株即为纯合的转K基因植株。K基因纯合的原因是_____________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/8/12/c1a680ae-7d2e-4934-8c7b-5d37147d5089.png?resizew=492)
(1)用农杆菌转化法导入基因时,一般将目的基因嵌入到Ti质粒的
(2)由单核花粉粒培育出愈伤组织的过程称为
(3)B过程可用
(4)经过培养、筛选最终得到的二倍体植株即为纯合的转K基因植株。K基因纯合的原因是
更新时间:2023-08-09 20:59:26
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【推荐1】如图①②③代表通过植物组织培养技术培育新植株的三条途径,请回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/9/12/2548213965979648/2548258273697793/STEM/0e9dab6a-7337-402a-9d3f-3829a36115f1.png?resizew=747)
(1)外植体a、b、c来自同一植株的不同部位,它们的全能性表达程度_______________ (填“一般相同”或“一般不同”)。
(2)外植体a经脱分化产生的A1是_______________ ,由外植体经A1、A2后发育成植株A的过程体现了 _______________ 。
(3)将含B1的试管放在摇床上,在一定的条件下,通过_______________ (选填“固体”或“液体”培养可以分散成单细胞,这种单细胞再分化成的B3称为 _______________ 。
(4)不同来源的C1可通过_______________ 将它们的遗传物质重新组合,再通过对重组细胞进行培养,获得具有特定性状的新植株。
(5)植物细胞在培养过程中往往会发生_______________ ,在培养基中加入 _______________ 可诱发和筛选抗盐突变体。
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(1)外植体a、b、c来自同一植株的不同部位,它们的全能性表达程度
(2)外植体a经脱分化产生的A1是
(3)将含B1的试管放在摇床上,在一定的条件下,通过
(4)不同来源的C1可通过
(5)植物细胞在培养过程中往往会发生
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【推荐2】某植物有A、B两品种。科研人员在设计品种A组织培养实验时,参照品种B的最佳激素配比(如表)进行预实验。
据表回答:
(1)Ⅰ阶段时通常选择茎尖、幼叶等作为外植体,原因是_____ 。
(2)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中发生基因选择性表达的是_____ 阶段。
(3)为确定品种A的Ⅰ阶段的最适细胞分裂素浓度,参照品种B的激素配比(m1>2.0),以0.5μmol/L 为梯度,设计5个浓度水平的实验,细胞分裂素最高浓度应设为_____ μmol/L。
(4)在_____ 阶段用秋水仙素对材料进行处理,最易获得由单个细胞形成的多倍体。
品种B组织培养阶段 | 细胞分裂素浓度(μmol/L) | 生长素浓度(μmol/L) |
Ⅰ诱导形成愈伤组织 | m1 | n1 |
Ⅱ诱导形成幼芽 | m2 | n2 |
Ⅲ诱导生根 | m3 | n3 |
据表回答:
(1)Ⅰ阶段时通常选择茎尖、幼叶等作为外植体,原因是
(2)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中发生基因选择性表达的是
(3)为确定品种A的Ⅰ阶段的最适细胞分裂素浓度,参照品种B的激素配比(m1>2.0),以0.5μmol/L 为梯度,设计5个浓度水平的实验,细胞分裂素最高浓度应设为
(4)在
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解题方法
【推荐3】不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质,与未经射线照射的受体细胞融合,所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了融合,培育能产生紫杉醇的柴胡,过程如下图。请回答下列问题:_____ 冲洗,随后再用_____ 溶液处理30min,再次冲洗后将外植体接种于MS培养基上诱导_____ 过程,形成愈伤组织。
(2)已知X射线处理能随机破坏染色体结构,使其发生断裂、易位、染色体消除等,使细胞不再持续分裂;碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活,抑制细胞分裂。对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B 处理分别为_____ 。
(3)过程③经化学试剂诱导融合后,只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团,原因是杂种细胞由于融合后在_____ 和_____ (填细胞结构)的功能上实现了互补,使细胞恢复正常。融合完成的标志是_____ 。
(4)过程④中,所用培养基需含有激素类物质X和Y,当X与Y的浓度比例大于1时,诱导未分化细胞群分化出芽,则X属于_____ 类似物。
(5)观察再生植株细胞中的染色体,发现数目_____ (从“小于等于”“等于”“小于”中选填)36条,说明初步获得了不对称杂种植株。
(6)研究人员以红豆杉幼苗茎形成层为外植体进行相关研究,得到如图2所示实验结果。下列相关叙述正确的有( ) 。
(2)已知X射线处理能随机破坏染色体结构,使其发生断裂、易位、染色体消除等,使细胞不再持续分裂;碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活,抑制细胞分裂。对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B 处理分别为
(3)过程③经化学试剂诱导融合后,只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团,原因是杂种细胞由于融合后在
(4)过程④中,所用培养基需含有激素类物质X和Y,当X与Y的浓度比例大于1时,诱导未分化细胞群分化出芽,则X属于
(5)观察再生植株细胞中的染色体,发现数目
(6)研究人员以红豆杉幼苗茎形成层为外植体进行相关研究,得到如图2所示实验结果。下列相关叙述正确的有( ) 。
A.愈伤组织细胞和胚状体细胞都已经出现了脱分化 |
B.暗处理时间对脱分化率的影响小于对再分化率的影响 |
C.暗处理时间的延长不利于红豆杉胚状体的形成 |
D.红豆杉幼苗茎形成层诱导形成胚状体的最适暗处理时间是1周 |
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【推荐1】青蒿素是最有效的抗疟疾药物成分,但野生黄花蒿青蒿素产量低。为缓解青蒿素供应不足的状况,科学家将tms基因和tmr基因导入黄花蒿的愈伤组织从而获得了黄花蒿的冠瘿组织,改造过程用到的部分结构如图。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/2/27/2408156348891136/2409390047608833/STEM/27103b6f-5ee6-4c12-b7a1-92ac946ab7b6.png)
(1)科学家利用农杆菌转化黄花蒿愈伤组织细胞的过程中,需添加酚类化合物,其目的是______________________ 。
(2)图中结构P、T是基因成功转录的保证,其中结构P的作用是____________________________ ;从基因表达载体的组成上分析图中还缺少标记基因,标记基因的作用是____________________ 。
(3)在获得转基因的冠瘿组织过程中,构建基因表达载体时常使用两种能产生不同黏性末端的限制酶对目的基因的两端和载体分别进行切割,这样做的好处是_______________________ 。
(4)与愈伤组织相比,冠瘿组织的生长速度更快,原因可能是_____________________ 。
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(1)科学家利用农杆菌转化黄花蒿愈伤组织细胞的过程中,需添加酚类化合物,其目的是
(2)图中结构P、T是基因成功转录的保证,其中结构P的作用是
(3)在获得转基因的冠瘿组织过程中,构建基因表达载体时常使用两种能产生不同黏性末端的限制酶对目的基因的两端和载体分别进行切割,这样做的好处是
(4)与愈伤组织相比,冠瘿组织的生长速度更快,原因可能是
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【推荐2】基因工程是新品种花卉培育中的一种重要技术手段。研究发现普通矮牵牛花因缺乏蓝色色素合成所需的转座酶而不能开蓝色花,研究人员尝试将从蔷薇花瓣细胞中分离提取的转座酶F35H基因转入普通矮牵牛中,以期获得蓝色矮牵牛新品种,该过程所用质粒与含转座酶F35H基因的DNA片段上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制酶BamHI、Sau3AI、HindIII识别的碱基序列和酶切位点分别为
、
、
。请回答下列问题:_______ ,启动子的功能是_____ 。
(2)若用只用Hind III切割含目的基因的DNA片段,有可能会带来的不良影响是____________ 。在用图1和图2中质粒和转座酶F35H基因构建基因表达载体时,最好选用______________ 限制酶来切割质粒和含目的基因的DNA片段。
(3)检测转座酶F35H基因是否在普通矮牵牛细胞中成功表达,常采用分子水平上的检测技术是___________ 。
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(2)若用只用Hind III切割含目的基因的DNA片段,有可能会带来的不良影响是
(3)检测转座酶F35H基因是否在普通矮牵牛细胞中成功表达,常采用分子水平上的检测技术是
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【推荐3】应用生物工程技术能获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2015/7/6/1578683846475776/1578683847114752/STEM/675664cca3f8447b8b4c1b956f851c10.png?resizew=551)
(1)②过程常用的方法是_____________ 。要检测目的基因是否翻译成了人生长激素,利用的技术是______________________ 。
(2)转基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,则说明基因工程能够突破自然界生物的__________ 。基因表达载体中,人生长激素基因的前端必须有____________________ ,使人生长激素基因在乳腺细胞中特异性高效表达。
(3)在抗虫棉培育过程中, ④过程常用的方法是农杆菌转化法,是利用农杆菌会被棉花植株伤口处细胞分泌的______________________________ 吸引并移向这些细胞,而且Ti质粒有______________________________ 的特点。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2015/7/6/1578683846475776/1578683847114752/STEM/675664cca3f8447b8b4c1b956f851c10.png?resizew=551)
(1)②过程常用的方法是
(2)转基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,则说明基因工程能够突破自然界生物的
(3)在抗虫棉培育过程中, ④过程常用的方法是农杆菌转化法,是利用农杆菌会被棉花植株伤口处细胞分泌的
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【推荐1】纤维素酶特异性降解纤维素产生生物燃料,是未来生物能源发展的重要方向之一。但是野生型纤维素酶通常存在热稳定性低、终端产物抑制、酶解效率低、生产成本高等问题,通过蛋白质工程对纤维素酶分子进行改造,是开发高效纤维素酶的重要手段。请回答下列问题:
(1)对纤维素酶分子的改造,首先是依据______ 设计纤维素酶的空间结构,推测可能的______ ,进而获得对应的基因。将该基因导入受体细胞并表达,就有可能获得符合要求的纤维素酶。
(2)科研人员计划利用大肠杆菌生产高效纤维素酶,其操作步骤如下图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/10/27/3354942397153280/3358126697758720/STEM/c1618b132fef471b9b4851e40bb64ca6.png?resizew=526)
第一步通过PCR技术扩增目的基因时,缓冲溶液中需要添加______ 种引物。第二步为______ ,需依据下图1和图2的限制酶酶切图谱,选择限制酶______ 对质粒和目的基因进行处理。第三步需要用______ 处理大肠杆菌细胞。第四步可用含有______ 的培养基筛选目的菌株,这种培养基称为______ 培养基。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/10/27/3354942397153280/3358126697758720/STEM/961f6876a9ce4646ab6c8d4feb53ab81.png?resizew=475)
(图中NdeⅠ、XbaⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ为限制酶,“→”所指位置表示切割位点)
(1)对纤维素酶分子的改造,首先是依据
(2)科研人员计划利用大肠杆菌生产高效纤维素酶,其操作步骤如下图所示。
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第一步通过PCR技术扩增目的基因时,缓冲溶液中需要添加
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(图中NdeⅠ、XbaⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ为限制酶,“→”所指位置表示切割位点)
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【推荐2】口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种动物传染病,目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗。请回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/7/1/2237240656887808/2238429558292480/STEM/70d6d0bb54054f1a9f0c5ce199650518.png?resizew=360)
(1)如图是VP1基因、农杆菌Ti质粒结构示意图,若用以构建具有VP1基因的基因表达载体,还需要在质粒中插入______ ,该结构的作用是______ 。
(2)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA,则获得可重组到质粒的VP1基因必须用到______ 酶。要获得大量VP1基因,可利用PCR技术进行扩增,扩增时需要设计______ 种引物。PCR技术中所用的DNA聚合酶与生物体内的DNA聚合酶有何区别______ 。
(3)通常用BamHⅠ、HindⅢ两种限制酶切割VP1基因和Ti质粒的目的是______ ;要筛选出含有该目的基因表达载体的农杆菌,首先需要在含______ 的培养基上进行。
(4)VP1基因应插入到农杆菌Ti质粒的T-DNA上,通过转化作用进入番茄细胞并插入到______ ,使VP1基因能够稳定存在并发挥作用。
(5)获得表达VP1蛋白的番茄植株以后,要进行免疫效力的测定,具体方法是:将从转基因番茄叶片中提取的VP1蛋白注射到一定数量的豚鼠体内,每半个月注射一次,三次注射后检测豚鼠血液中产生的______ 数量,为了使结果可信,应设置空白对照组,注射______ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/7/1/2237240656887808/2238429558292480/STEM/70d6d0bb54054f1a9f0c5ce199650518.png?resizew=360)
(1)如图是VP1基因、农杆菌Ti质粒结构示意图,若用以构建具有VP1基因的基因表达载体,还需要在质粒中插入
(2)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA,则获得可重组到质粒的VP1基因必须用到
(3)通常用BamHⅠ、HindⅢ两种限制酶切割VP1基因和Ti质粒的目的是
(4)VP1基因应插入到农杆菌Ti质粒的T-DNA上,通过转化作用进入番茄细胞并插入到
(5)获得表达VP1蛋白的番茄植株以后,要进行免疫效力的测定,具体方法是:将从转基因番茄叶片中提取的VP1蛋白注射到一定数量的豚鼠体内,每半个月注射一次,三次注射后检测豚鼠血液中产生的
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【推荐3】科研人员克隆了猪白细胞抗原基因(SLA-2基因),构建了该基因的真核表达载体,进行了猪肾上皮细胞表达研究。实验的主要流程如下,SLA-2基因长度为1100bp,质粒B的总长度为4445bp,其限制酶切点后的数字表示距复制原点的距离。可能用到的限制酶识别序列和切割位点如下表所示。
(1)过程①中,PCR扩增SLA-2的原理是____ ,下列4种引物中应选择的是____ 。
引物a:5’-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC-3’
引物b:5’-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC-3’
引物c:5’-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC-3’
引物d:5’-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC-3’
(2)过程②将重组质粒导入大肠杆菌的目的是____ ,该过程需要用____ 处理大肠杆菌,使其成为感受态细胞。然后将大肠杆菌涂布在含有____ (抗生素)的培养基上培养。
(3)若用限制酶Sau3AI和XbaI完全切割质粒B和质粒C后电泳,请在图中画出预测的电泳结果____ 。
(4)科研中常用嘌呤霉素对真核细胞进行筛选,嘌呤霉素对细胞的毒性实验结果如图,根据实验结果最佳的嘌霉素筛选浓度为____ ,原因是____ 。
(5)筛选产SLA-2抗原肽的猪肾上皮细胞的方法是____ 。
限制酶 | BclI | NotI | XbaI | Sau3AI |
识别序列及切割位点 | T↓GATCA | GC↓GGCCGC | T↓CTAGA | ↓GATC |
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/6/13/298807e0-437b-4efb-ab35-8b7cf34177f7.png?resizew=367)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/6/13/e9cb8763-7dc0-40ce-94fd-ee8a27a9a783.png?resizew=228)
(1)过程①中,PCR扩增SLA-2的原理是
引物a:5’-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC-3’
引物b:5’-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC-3’
引物c:5’-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC-3’
引物d:5’-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC-3’
(2)过程②将重组质粒导入大肠杆菌的目的是
(3)若用限制酶Sau3AI和XbaI完全切割质粒B和质粒C后电泳,请在图中画出预测的电泳结果
(4)科研中常用嘌呤霉素对真核细胞进行筛选,嘌呤霉素对细胞的毒性实验结果如图,根据实验结果最佳的嘌霉素筛选浓度为
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/6/13/8c76a60d-6874-43f4-b5ce-5182c4809e58.png?resizew=302)
(5)筛选产SLA-2抗原肽的猪肾上皮细胞的方法是
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【推荐1】中国是世界上最大的茄子生产国。为培育优良品种,育种工作者应用了多种育种方法。请回答下列相关问题:
(1)茄子晚开花(A)对早开花(a)为显性,果实颜色有深紫色(BB)、淡紫色(Bb)与白色(bb)之分,两对基因自由组合。为培育早开花深紫色果实的茄子,选择基因型为AABB 与aabb的植株为亲本杂交,F1自交得到的F2中有___ 种表现型,其中早开花深紫色果实的植株所占比例为________________ 。
(2)青枯病是茄子的主要病害,抗青枯病(T)对易感青枯病(t)为显性,基因T、t与控制开花期的基因A、a自由组合。若采用二倍体早开花易感青枯病茄子(aatt)与四倍体晚开花抗青枯病茄子(AAAATTTT)为育种材料,运用杂交和花药离体培养的方法,培育纯合的二倍体早开花、抗青桔病茄子,则主要步骤为:
①第一步:__________________ 。
②第二步:以基因型为_________ 的茄子作亲本进行杂交,得到F1(AaTt)。
③第三步:用遗传图解简要描述。__________________
(1)茄子晚开花(A)对早开花(a)为显性,果实颜色有深紫色(BB)、淡紫色(Bb)与白色(bb)之分,两对基因自由组合。为培育早开花深紫色果实的茄子,选择基因型为AABB 与aabb的植株为亲本杂交,F1自交得到的F2中有
(2)青枯病是茄子的主要病害,抗青枯病(T)对易感青枯病(t)为显性,基因T、t与控制开花期的基因A、a自由组合。若采用二倍体早开花易感青枯病茄子(aatt)与四倍体晚开花抗青枯病茄子(AAAATTTT)为育种材料,运用杂交和花药离体培养的方法,培育纯合的二倍体早开花、抗青桔病茄子,则主要步骤为:
①第一步:
②第二步:以基因型为
③第三步:用遗传图解简要描述。
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【推荐2】已知西瓜的染色体数目2N=22,请根据下面的西瓜育种流程回答有关问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/8/26/3052672121683968/3053560601550848/STEM/d36773f5e18744e6aa1c9c156d429c9a.png?resizew=375)
(1)图中所用的试剂①是_____ 。
(2)培育无子西瓜A的育种方法称为_____ ,其原理是_____ 。
(3)③过程中形成单倍体植株所采用的方法是_____ 。该过程利用了植物细胞的_____ 性。用试剂①处理图中的单倍体植株后获得的个体是_____ 。(填“纯合子”或“杂合子”)
(4)通过实验检验过程①是否诱导成功时,实验材料需放入_____ 中浸泡0.5~1h,以固定细胞的形态,然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次,再制作装片。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/8/26/3052672121683968/3053560601550848/STEM/d36773f5e18744e6aa1c9c156d429c9a.png?resizew=375)
(1)图中所用的试剂①是
(2)培育无子西瓜A的育种方法称为
(3)③过程中形成单倍体植株所采用的方法是
(4)通过实验检验过程①是否诱导成功时,实验材料需放入
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【推荐3】油菜物种I(2n=20)与Ⅱ(2n=18)杂交产生的幼苗经秋水仙素处理后,得到一个油菜新品系(注:I的染色体和Ⅱ的染色体在减数分裂中不会相互配对)。
(1)秋水仙素通过抑制分裂细胞中____________ 的形成,导致染色体加倍;获得的植株进行自交,子代___________ (会/不会)出现性状分离。
(2)观察油菜新品系根尖细胞有丝分裂,应观察____________ 区的细胞,处于分裂后期的细胞中含有____________ 条染色体。
(3)该油菜新品系经多代种植后出现不同颜色的种子,已知种子颜色由一对基因A/a控制,并受另一对基因R/r影响。用产黑色种子植株(甲)、产黄色种子植株(乙和丙)进行以下实验:
①由实验一得出,种子颜色性状中黄色对黑色为___________ 性。
②分析以上实验可知,当____________ 基因存在时会抑制A基因的表达。实验二中丙的基因型为__________ ,F2产黄色种子植株中纯合子的比例为____________ 。
③有人重复实验二,发现某一F1植株,其体细胞中含R/r基因的同源染色体有三条(其中两条含R基因),请解释该变异产生的一种具体原因:___________ 。让该植株自交,理论上后代中产能稳定遗传的黑色种子的植株所占比例为___________ 。
(1)秋水仙素通过抑制分裂细胞中
(2)观察油菜新品系根尖细胞有丝分裂,应观察
(3)该油菜新品系经多代种植后出现不同颜色的种子,已知种子颜色由一对基因A/a控制,并受另一对基因R/r影响。用产黑色种子植株(甲)、产黄色种子植株(乙和丙)进行以下实验:
组别 | 亲代 | F1表现型 | F1自交所得F2的表现型及比例 |
实验一 | 甲×乙 | 全为产黑色种子植株 | 产黑色种子植株:产黄色种子植株=3:1 |
实验二 | 乙×丙 | 全为产黄色种子植株 | 产黑色种子植株:产黄色种子植株=3:13 |
②分析以上实验可知,当
③有人重复实验二,发现某一F1植株,其体细胞中含R/r基因的同源染色体有三条(其中两条含R基因),请解释该变异产生的一种具体原因:
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