Ⅰ、尿素是一种高浓度氮肥用长期施用没有不良影响,但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后,才能被植物吸收利用,分解尿素的细菌都能合成脲酶,脲酶能催化尿素水解。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下:
Ⅱ、下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。请据图回答下列问题:
(1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌______ (能/不能),原因是______ 。
(2)用稀释涂布平板法计数活菌菌落时,统计的菌落数往往比活菌实际数目少,这是因为______ 。
(3)接种前要对培养基进行______ (填无菌操作的具体方法)。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行。
(4)一同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,应当怎样操作才可避免此种现象?_________ 。
(5)过程①至②所获取的抗体1称为______ ,其中过程①是指细胞工程中的______ 技术。
(6)④过程需要______ 酶,⑤过程则需要的工具酶为______ 。
(7)②处需要筛选,其培养基称为______ (液体培养基/选择培养基/鉴别培养基)。
(8)如果想用棉花产生该种抗体,则⑥过程的受体细胞通常选用______ 菌,经过筛选后再侵染棉花体细胞,转化成功后通过______ 技术获得能产抗体的转基因棉花植株。
KH2PO4 | Na2HPO4 | MgSO4·7H2O | 蛋白胨 | 葡萄糖 | 尿素 | 琼脂 |
1.4g | 2.1g | 0.2g | 1.0g | 10.0g | 1.0g | 15.0g |
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/10/22/c695c525-5a01-49b2-9e25-17173f390f3f.jpg?resizew=563)
(1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌
(2)用稀释涂布平板法计数活菌菌落时,统计的菌落数往往比活菌实际数目少,这是因为
(3)接种前要对培养基进行
(4)一同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,应当怎样操作才可避免此种现象?
(5)过程①至②所获取的抗体1称为
(6)④过程需要
(7)②处需要筛选,其培养基称为
(8)如果想用棉花产生该种抗体,则⑥过程的受体细胞通常选用
更新时间:2023-10-20 19:35:52
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解题方法
【推荐1】野生型菌株X能在基本培养基上生长,亮氨酸缺陷型突变株无法合成亮氨酸,只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法(一种类似“盖章”的接种方法,使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落)纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程图。回答下列问题:_______ 等营养成分,培养基灭菌常用的方法是_____ ,基本培养基与完全培养基相比,成分不同的是_______ 。
(2)进行过程②操作时,必须先将丝绒布转印至______ (填“基本培养基”或“完全培养基”)上,从______ 培养基上可获得亮氨酸缺陷型突变菌株。
(3)利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同,所以应挑取_______ (填“菌落A”或“菌落B”)获得亮氨酸缺陷型突变菌株。将该菌种在培养液中扩大培养时,需将菌液充分振荡,目的是_______ 。
(2)进行过程②操作时,必须先将丝绒布转印至
(3)利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同,所以应挑取
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【推荐2】牛奶富含多种营养物质,坚持饮用牛奶有利于增强体质。但牛奶也是多种病原体的传播载体,比如牛奶中可能存在金黄色葡萄球菌,该菌是一种高度耐盐的兼性厌氧微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。如图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题:
(1)生鲜牛奶饮用前一般采用消毒方法是______ ,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是______ 。
(2)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括水、______ 。某同学将配制好的肉汤培养基采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌时,压力达到设定温度,而锅内温度并没有达到相应温度,最可能原因是______ 。
(3)在培养过程中,可通过菌落的______ 特征来观察菌落(至少写出两点)。经多次规范操作、重复实验,血平板上的菌落周围出现______ ,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌。
(4)培养基中用7.5%NaCl进行选择培养的主要目的是______ 。振荡培养是在一定转速下的摇床上进行培养,振荡的目的是______ (答两点),有利于微生物的生长繁殖及代谢废物的排出。
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(1)生鲜牛奶饮用前一般采用消毒方法是
(2)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括水、
(3)在培养过程中,可通过菌落的
(4)培养基中用7.5%NaCl进行选择培养的主要目的是
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【推荐3】常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌,操作如下:
(1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后,要将平板倒置,其主要原因是__________________________ 。
(2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是________ 。在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是____________________ 。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是________________ 。
(3)将自然界中采集到的葡萄带回实验室,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以__________ 为唯一碳源的固体培养基上,在适宜的条件下培养一段时间,获得多个所需的酵母菌菌落。实验中所用的培养基按功能属于________ 培养基。
(4)若要检测土样中的酵母菌含量,应采用____________ 法。将1 mL土壤溶液分别稀释10倍和100倍,每种稀释度各在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液,经适当培养后,6个平板上的菌落数分别为548、472、450、48、47和58。据此可得出每升土壤溶液中的活菌数约为________ 个。
(1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后,要将平板倒置,其主要原因是
(2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是
(3)将自然界中采集到的葡萄带回实验室,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以
(4)若要检测土样中的酵母菌含量,应采用
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【推荐1】解磷微生物能分解有机磷,可降低水体富营养化程度。下图是从湖泊污泥中筛选解磷微生物的过程示意图,下表是分离纯化的结果。请回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2015/3/26/1567047379763200/1567047382474752/STEM/e4a1830e47b94c5cb1f8f48f859c1477.png?resizew=366)
记录项目:透明圈直径/菌落直径
(1)培养基的成分主要有牛肉膏、蛋白胨、NaCl及无菌卵黄液,其中__________ 主要提供有机磷。从土壤中富集解磷微生物时,应选用___________ (固体、液体)培养基。
(2)在倒平板前,应对玻璃器皿和培养基灭菌,灭菌方法是________________ 。配制成l0-1浓度稀释液时,用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL,移入盛有__________ mL无菌水的试管中,并依次配制10-2~10-10的梯度稀释液。
(3)过程②、③为菌种分离纯化的过程,接种方法分为____________ 、_____________ 。
(4)分析菌种的分离纯化结果,应选择为_____ 号菌落进行扩大生产,原因是_______________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2015/3/26/1567047379763200/1567047382474752/STEM/e4a1830e47b94c5cb1f8f48f859c1477.png?resizew=366)
记录项目:透明圈直径/菌落直径
菌落编号 | 1 | 2 | 3 |
48小时 | 1.6 | 2.8 | 3.0 |
72小时 | 2.2 | 1.2 | 5.0 |
96小时 | 2.3 | 1.2 | 4.2 |
(2)在倒平板前,应对玻璃器皿和培养基灭菌,灭菌方法是
(3)过程②、③为菌种分离纯化的过程,接种方法分为
(4)分析菌种的分离纯化结果,应选择为
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【推荐2】回答下列(一)、(二)小题:
(一)为了探究微生物在不同条件下的繁殖速度,微生物的计数是发酵工程中不可或缺的环节。回答下列问题:
(1)测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的有稀释涂布平板法和显微镜计数法,前者往往无法进行动物细胞数量的测定,原因是____________________________________ ;显微镜计数法计数结果一般比稀释涂布平板法大,可能的原因是____________________________________ 。
(2)在用显微镜进行酵母菌细胞计数时,必须将菌液____________ ,然后应________________ (①盖专用盖玻片;②滴加酵母菌悬液;按操作的先后顺序填写序号),已知血细胞计数板规格为1mm
1mm
0.1mm,在培养后期对培养液稀释100倍后,用显微镜观察到其中某方格中酵母菌的分布情况如图,若最终几个样方中平均数与其相同,则培养液中酵母菌的密度为________ 个/毫升。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/1/10/9013a24b-1395-43b8-8d60-2915d0b69118.png?resizew=237)
(3)稀释涂布平板时,若平板中菌落数过少,随机误差增大。要解决这个问题可以从两方面入手:一是保证能准确计数的前提下降低稀释度;二是将相同稀释度下的多组数值取平均值后再进行计算。除用于计数,稀释涂布平板还能实现对目标微生物的____________ 。
(二)将外源多酚氧化酶基因(POT33)的同源片段与载体结合,构建反义表达载体,通过基因工程技术导入马铃薯,产生的反义RNA可有效降低马铃薯内源多酚氧化酶基因的表达水平,从而改善薯块的损伤褐化现象,提高马铃薯的食用和加工品质。回答下列相关问题:
(4)获取马铃薯POT33基因的同源片段:根据马铃薯POT33基因的____________________ 设计一对特异性引物,在引物的5'端加入限制性内切核酸酶的____________ 以满足目的基因连接到载体的需要,再通过PCR获取马铃薯POT33基因的同源片段。
(5)构建重组载体:用限制性内切核酸酶分别处理____________________________________ ,处理过程中用两种限制酶,可以防止目的基因以及载体的________________ ,保证 POT33基因同源片段与载体的反向连接,形成反义表达载体。
(6)马铃薯转化、选择及再生:以马铃薯无菌苗的叶片为外植体,一般可借助________________ 实现马铃薯的遗传转化,再将被转化的叶片放在含抗生素的培养基上培养,加入的抗生素具有筛选转化细胞和的双重作用;之后对脱分化形成的愈伤组织每隔适当时间进行________ 培养,后可通过调控培养基中________________________ 以获得符合要求的再生植株。
(一)为了探究微生物在不同条件下的繁殖速度,微生物的计数是发酵工程中不可或缺的环节。回答下列问题:
(1)测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的有稀释涂布平板法和显微镜计数法,前者往往无法进行动物细胞数量的测定,原因是
(2)在用显微镜进行酵母菌细胞计数时,必须将菌液
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(3)稀释涂布平板时,若平板中菌落数过少,随机误差增大。要解决这个问题可以从两方面入手:一是保证能准确计数的前提下降低稀释度;二是将相同稀释度下的多组数值取平均值后再进行计算。除用于计数,稀释涂布平板还能实现对目标微生物的
(二)将外源多酚氧化酶基因(POT33)的同源片段与载体结合,构建反义表达载体,通过基因工程技术导入马铃薯,产生的反义RNA可有效降低马铃薯内源多酚氧化酶基因的表达水平,从而改善薯块的损伤褐化现象,提高马铃薯的食用和加工品质。回答下列相关问题:
(4)获取马铃薯POT33基因的同源片段:根据马铃薯POT33基因的
(5)构建重组载体:用限制性内切核酸酶分别处理
(6)马铃薯转化、选择及再生:以马铃薯无菌苗的叶片为外植体,一般可借助
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【推荐3】伊红美蓝培养基可用于检测水中大肠杆菌的含量。该培养基由基础培养基(含蛋白胨、NaCl、琼脂)灭菌后,冷却至60℃加入乳糖溶液、伊红水溶液和美蓝水溶液构成。回答下列问题:
(1)伊红美蓝培养基从功能上分属于________ (选填“选择培养基”或“鉴定培养基”),该培养基中的蛋白胨能为大肠杆菌生长提供________ 。基础培养基的灭菌方法是________________________ 。
(2)在检验大肠杆菌含量时,有时需要对水样进行一系列的梯度稀释,然后采用________ (填方法名称),将水样接种到培养基上。若分别取0.1mL已稀释103倍的水样接种到三个培养基上,记录到的菌落数分别是55、56、57,则每升原水样中大肠杆菌数为________ 个。
(3)统计的菌落数往往比接种水样中活菌的实际数目要少,原因是________________________________ 。
(1)伊红美蓝培养基从功能上分属于
(2)在检验大肠杆菌含量时,有时需要对水样进行一系列的梯度稀释,然后采用
(3)统计的菌落数往往比接种水样中活菌的实际数目要少,原因是
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(0.65)
【推荐1】某些细菌可将尿素分解成C02和NH3。欲从土壤中分离能分解尿素的细菌,某研究小组利用成分为KH2P04、Na2HP04、葡萄糖、琼脂、尿素的培养基进行了相关实验。请回答:
(1)在土壤微生物的培养过程中,培养基中的KH2P04与Na2HP04作为无机营养被细菌利用外,它们还具有的功能为_________ ;葡萄糖的作用是____ 。
(2)该培养基对土壤中的微生物具有选择作用,理由是_______ 。微生物能分解尿素的原因是这些微生物能合成_____ 。
(3)为能获得目的菌的单菌落,常对土壤样液做_______ 处理。为便于确认目的菌,可在培养基中加入_____ 指示剂,接种并培养后,可根据菌落周围_________ 来判断该菌能分解尿素。
(1)在土壤微生物的培养过程中,培养基中的KH2P04与Na2HP04作为无机营养被细菌利用外,它们还具有的功能为
(2)该培养基对土壤中的微生物具有选择作用,理由是
(3)为能获得目的菌的单菌落,常对土壤样液做
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【推荐2】脲酶是催化尿素分解的特异性水解酶。该酶主要从刀豆等豆科植物中提取,现被广泛应用于尿素废水的净化过程。请分析回答以下问题:
(1)为了提高脲酶的利用效率,可以采用固定化酶技术将其固定。酶的固定化方法有:吸附法、共价偶联法、包埋法和______________________ 。
(2)实验室中可以采用吸附法将该酶制成固定化酶柱,让尿素废水过柱前,先用10倍体积的蒸馏水洗涤酶柱,目的是_________________ 。
(3)脲酶除了从植物获取外,还可以来源于土壤中的微生物。为了从土壤中分离以尿素为氮源的微生物,采用的分离方法操作最简便的是__________________ 。下列有关该分离方法的操作,叙述错误的是_____________ 。
A.必须使用固体培养基
B.必须在酒精灯火焰旁接种
C.必须将接种后的培养皿倒置培养
D.必须将接种前的培养皿、培养基、土壤悬浮液等进行灭菌处理
(1)为了提高脲酶的利用效率,可以采用固定化酶技术将其固定。酶的固定化方法有:吸附法、共价偶联法、包埋法和
(2)实验室中可以采用吸附法将该酶制成固定化酶柱,让尿素废水过柱前,先用10倍体积的蒸馏水洗涤酶柱,目的是
(3)脲酶除了从植物获取外,还可以来源于土壤中的微生物。为了从土壤中分离以尿素为氮源的微生物,采用的分离方法操作最简便的是
A.必须使用固体培养基
B.必须在酒精灯火焰旁接种
C.必须将接种后的培养皿倒置培养
D.必须将接种前的培养皿、培养基、土壤悬浮液等进行灭菌处理
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【推荐3】【生物——选修1:生物技术实践】
科研人员以秸秆为原料进行酒精的制备,大致流程如图所示。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2017/6/1/1699630585921536/1699650034475008/STEM/4db72885c0da4ae191b4bc2b07da8990.png?resizew=390)
(1)对采集的土样进行稀释的目的是____________ 。有时需要在梯度稀释前进行选择培养,其目的是_________________ 。
(2)用分离得到的纤维素分解菌培养液进行数量测定,在稀释倍数105对应的培养基中测定平板上菌落数的平均值为26,则每毫升样品中的纤维素分解菌约有___________ 个(接种液的体积为0.2 mL)。
(3)经过③的培养,可以得到多种纤维素分解菌,应该在含有刚果红的鉴别培养基上选取_________________ 的菌落进行_______________ ,从中提取的纤维素酶活性高。
(4)经⑤、⑥步骤后得到的糖液中的糖是________________ ,⑦过程常用的微生物是_________________ ,⑦过程的气体条件是_________________ 。
科研人员以秸秆为原料进行酒精的制备,大致流程如图所示。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2017/6/1/1699630585921536/1699650034475008/STEM/4db72885c0da4ae191b4bc2b07da8990.png?resizew=390)
(1)对采集的土样进行稀释的目的是
(2)用分离得到的纤维素分解菌培养液进行数量测定,在稀释倍数105对应的培养基中测定平板上菌落数的平均值为26,则每毫升样品中的纤维素分解菌约有
(3)经过③的培养,可以得到多种纤维素分解菌,应该在含有刚果红的鉴别培养基上选取
(4)经⑤、⑥步骤后得到的糖液中的糖是
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【推荐1】用抗人绒毛膜促性腺激素(HCG)单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”具有诊断早、准确率高等优点。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程的示意图。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/13/94736cb3-0c61-4e94-885a-b28d7c8e0a19.png?resizew=438)
(1)制备单克隆抗体的过程中需要用到_____________ 技术。
(2)在制备单克隆抗体的过程中,首先要将纯化的HCG多次注入小鼠体内,其目的是从小鼠的脾中获得______________ 。图中的促融剂可以是灭活的病毒,灭活是指使病毒失去______________ ,但不破坏_____________ 结构。
(3)在图中的HAT培养基上,_____________ 细胞不能生长,在该培养基上生长的细胞还必须经过克隆化培养和抗体筛选,其原因是_____________ 。培养该细胞时还需要适宜的营养、温度、pH、渗透压、气体环境以及___________________________ 。
(4)最后筛选得到的杂交瘤细胞的特点是_______________ 。单克隆抗体被广泛用作诊断试剂的原因是______________ ,可与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/13/94736cb3-0c61-4e94-885a-b28d7c8e0a19.png?resizew=438)
(1)制备单克隆抗体的过程中需要用到
(2)在制备单克隆抗体的过程中,首先要将纯化的HCG多次注入小鼠体内,其目的是从小鼠的脾中获得
(3)在图中的HAT培养基上,
(4)最后筛选得到的杂交瘤细胞的特点是
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(0.65)
【推荐2】“精准医学”是指根据每个病人的特征制定个性化治疗方案,是以个性化医疗为基础、联合基 因检测技术等发展而来,目前主要侧重于癌症的预防、诊断和治疗。癌症治疗中最完美的 “武器”当属抗体,为了研制抗宫颈癌的单克隆抗体,科学家设计了以下实验流程:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/25/2965719141187584/2968414750859264/STEM/605c27e8acb14cd6afc257b142bf009d.png?resizew=591)
回答下列问题:
(1)精准医学的发展离不开对人类基因的测序和深入研究,人类基因组测序应测定_______ 条染色体。用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞获得融合细胞的常用方法是_____________________ 。
(2)细胞1的特点是__________________________________________ 。细胞2是__________________________ 细胞。
(3)与植物细胞相比,细胞2在有丝分裂末期是如何变成两个细胞的?____________________ 。
(4)获得细胞2后可在体外大量培养,培养液中要加入适量血清,原因是_________________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/25/2965719141187584/2968414750859264/STEM/605c27e8acb14cd6afc257b142bf009d.png?resizew=591)
回答下列问题:
(1)精准医学的发展离不开对人类基因的测序和深入研究,人类基因组测序应测定
(2)细胞1的特点是
(3)与植物细胞相比,细胞2在有丝分裂末期是如何变成两个细胞的?
(4)获得细胞2后可在体外大量培养,培养液中要加入适量血清,原因是
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