研究发现,黄粉虫可以塑料(主要成分为聚苯乙烯,简称PS)为食,研究人员从其肠道内分离出了能够降解PS的细菌,为解决全球白色污染提供了解决方案。某研究小组尝试在实验室分离纯化能高效降解PS的细菌(目的菌),并提取检测相关降解酶的活力,其过程如图所示。回答下列问题:
Ⅰ号培养基:水、无机盐、氮源、物质X
Ⅱ号培养基;水、无机盐、氮源、物质X、物质Y
(1)物质X和物质Y分别是______ 和______ 。
(2)除了图中所示方法外,还可以通过______ 法在Ⅱ号培养基上纯化降解PS塑料的微生物菌群,可根据菌落的______ (填出两点)特征挑选出特定的再进行发酵培养。
(3)为测定PS降解酶降解塑料的能力,需要先将该酶分离出来,常用凝胶色谱法,凝胶色谱法分离PS降解酶的基本过程:样品加入后进行洗脱,而后收集PS降解酶。最后收集到的蛋白质样品与刚洗脱时收集到的蛋白质相比,分子质量较______ (填大或小),原因是_______ 。
(4)研究人员还进一步探究了PS降解酶固定化后的热稳定性变化。将固定化酶和游离酶置于60℃水浴中,每20min测定其活力一次。结果如图所示。
据图分析,PS降解酶固定后热稳定性提高,依据是________ 。
Ⅰ号培养基:水、无机盐、氮源、物质X
Ⅱ号培养基;水、无机盐、氮源、物质X、物质Y
(1)物质X和物质Y分别是
(2)除了图中所示方法外,还可以通过
(3)为测定PS降解酶降解塑料的能力,需要先将该酶分离出来,常用凝胶色谱法,凝胶色谱法分离PS降解酶的基本过程:样品加入后进行洗脱,而后收集PS降解酶。最后收集到的蛋白质样品与刚洗脱时收集到的蛋白质相比,分子质量较
(4)研究人员还进一步探究了PS降解酶固定化后的热稳定性变化。将固定化酶和游离酶置于60℃水浴中,每20min测定其活力一次。结果如图所示。
据图分析,PS降解酶固定后热稳定性提高,依据是
更新时间:2024-01-03 15:36:31
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【推荐1】水稻细菌性条斑病是由稻黄单胞菌引起的,病原细菌通过水稻叶片的气孔或者伤口入侵水稻,定殖于水稻叶片的薄壁组织细胞间并扩展形成条状病斑,可导致水稻叶片枯死,给粮食安全带来严重的威胁。实验小组通过平板实验研究了4株生防菌株的抑菌活性,实验过程中用的培养基及其成分如下所示。回答下列问题:
NA培养基:蛋白胨10g,牛肉粉3g,氯化钠5g,琼脂15g,蒸馏水1000mL,pH=7.0
KB 培养基:蛋白胨20g,K2HPO41.5 g,MgSO4•H2O 1.5 g,甘油10ml,pH=7.0,蒸馏水1000mL
(1)实验室制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤为计算、称量、______________ 、______________ 和倒平板。培养基中的蛋白胨能为微生物的繁殖提供碳源、_______________ 和_______________ 等营养物质,对培养基灭菌的常用方法为______________ 。
(2)实验小组为了制备含病原菌的平板,应先将水稻细菌性条斑病菌接种到_______________ (填“NA”或“KB”)培养基中,再振荡培养48h,其最终目的是______________ ;再将病菌悬浮液和_______________ (填“NA”或“KB”)培养基混合均匀后制成含病原菌的平板。
(3)为了研究生防菌株的抑菌活性,实验小组在含有水稻细菌性条斑病菌的琼脂培养基上放上无底的小杯(常称牛津杯,如图所示),再向杯内灌入_______________ ,置于恒温培养箱中培养,一段时间后在杯子周围形成抑菌圈,通过______________ 可比较其抑菌活性。
NA培养基:蛋白胨10g,牛肉粉3g,氯化钠5g,琼脂15g,蒸馏水1000mL,pH=7.0
KB 培养基:蛋白胨20g,K2HPO41.5 g,MgSO4•H2O 1.5 g,甘油10ml,pH=7.0,蒸馏水1000mL
(1)实验室制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤为计算、称量、
(2)实验小组为了制备含病原菌的平板,应先将水稻细菌性条斑病菌接种到
(3)为了研究生防菌株的抑菌活性,实验小组在含有水稻细菌性条斑病菌的琼脂培养基上放上无底的小杯(常称牛津杯,如图所示),再向杯内灌入
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【推荐2】《本草纲目》记载,“蝉花可治疗惊痫,夜啼心悸,功同蝉蜕”。蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体,内含虫草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人员从天然蝉花中分离纯化蝉拟青霉菌株进行人工培养。
(1)制备培养基:
①该实验选择马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基,配方如下:马铃薯200g,葡萄糖20g,KH2PO42g,MgSO40.5g,琼脂20g,用蒸馏水定容至1000mL,自然pH,培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供_____ 等营养成分(至少写出2种),该培养基的自然pH为______ 性范围。
②为了便于筛选蝉拟青霉菌株,培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制_____ 的生长。该培养基从功能上分类属于______ 培养基。
③配制的培养基必须进行灭菌处理,目的是_______ 。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_____ 。
(2)蝉拟青霉的分离纯化:取新鲜蝉花,挑取虫体胸腔中的少量菌丝采用_______ 法接种至PDA培养基上进行培养。
(3)发酵生产:发酵生产中常用液体培养基扩大培养。下表为发酵菌丝体和天然蝉花的主要成分及含量的测定结果,据表判断_______ (填“能”或“不能”)用发酵菌丝体替代天然蝉花,判断的理由是_______ 。
(1)制备培养基:
①该实验选择马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基,配方如下:马铃薯200g,葡萄糖20g,KH2PO42g,MgSO40.5g,琼脂20g,用蒸馏水定容至1000mL,自然pH,培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供
②为了便于筛选蝉拟青霉菌株,培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制
③配制的培养基必须进行灭菌处理,目的是
(2)蝉拟青霉的分离纯化:取新鲜蝉花,挑取虫体胸腔中的少量菌丝采用
(3)发酵生产:发酵生产中常用液体培养基扩大培养。下表为发酵菌丝体和天然蝉花的主要成分及含量的测定结果,据表判断
粗蛋白(%) | 粗纤维(%) | 灰份(%) | 水分(%) | 虫草多糖(mg/g) | 甘露醇(mg/g) | |
发酵菌丝体 | 25.38 | 8.32 | 7.87 | 8.92 | 33.2 | 78.9 |
天然蝉花 | 19.65 | 3.12 | 7.84 | 9.81 | 28.5 | 53.6 |
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【推荐3】请回答下列有关微生物的问题。
(1)在微生物分离、鉴定实验中,通常在配置固体培养基时需在培养基中加入_________ (物质)。
(2)采用固体平板培养细菌时,为防止冷凝水影响细菌的生长,需将培养皿___________ 培养。
(3)下表为探究抗生素对微生物抑制作用的实验处理。先将大肠杆菌接种于培养基上,然后将培养皿置于37℃条件下培养2~3天,观察、测量并记录__________________________ 情况。如果实验所用抗生素的浓度关系为A< C < B,则编号1、2、3、4的抑菌效果从大到小依次为________________________________________ 。
实验处理
(4)现有5种酵母菌的营养缺陷型菌株1、2、3、4、5,它们不能合成生长所必需的物质G,已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物,但不知这些物质合成的顺序, 于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响结果如下表所示。
根据以上结果,推测这几种物质的合成顺序应是______________________________ 。
(5)某同学在做微生物实验时,不小心把自生固氮菌和酵母菌混在一起,请你帮助该同学完善实验步骤,将自生固氮菌和酵母菌分离开来:
①制备两种培养基,对两种培养基的处理方式分别是:一种是___________________ ,另一种是__________________ ,将两种培养基各自分成两份,依次标上A,a和B,b。
②分别向A、B培养基中接种____________ 菌,适宜条件下培养3-4天。
③分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a和b培养基中,适宜条件下培养3-4天。其目的是__________________________________________ 。
(1)在微生物分离、鉴定实验中,通常在配置固体培养基时需在培养基中加入
(2)采用固体平板培养细菌时,为防止冷凝水影响细菌的生长,需将培养皿
(3)下表为探究抗生素对微生物抑制作用的实验处理。先将大肠杆菌接种于培养基上,然后将培养皿置于37℃条件下培养2~3天,观察、测量并记录
编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | |||
| 圆纸片浸在 | ||||||
浓度A抗生素 | 浓度B抗生素 | 浓度C抗生素 | 蒸馏水 | ||||
实验处理
(4)现有5种酵母菌的营养缺陷型菌株1、2、3、4、5,它们不能合成生长所必需的物质G,已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物,但不知这些物质合成的顺序, 于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响结果如下表所示。
根据以上结果,推测这几种物质的合成顺序应是
(5)某同学在做微生物实验时,不小心把自生固氮菌和酵母菌混在一起,请你帮助该同学完善实验步骤,将自生固氮菌和酵母菌分离开来:
①制备两种培养基,对两种培养基的处理方式分别是:一种是
②分别向A、B培养基中接种
③分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a和b培养基中,适宜条件下培养3-4天。其目的是
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【推荐1】在某实验中选用YMA根瘤菌固体培养基来培养费氏中华根瘤菌(自生固氮菌),配方如下表所示。
回答下列问题。
(1)按物理性质,培养基可分为__________ 和固体培养基;培养基的配置过程具有如下步骤:①灭菌 ②计算 ③倒平板 ④调pH ⑤称量 ⑥溶化 ,正确的是顺序为____________ 。费氏中华根瘤菌以________ 作为碳源。
(2)想要测定某一时期活菌数量,可选用_____________ 法进行计数。为了保证结果准确,一般选择菌落数在____________ 的平板进行计数。
(3)此实验是如何防止污染的?__________________________________________ 。
物质 | 甘露醇 | 酵母粉 | MgSO4•7H2O | K2HPO4 | NaCl | CaCl2 | H2O |
剂量 | 13.861g | 4.683g | 0.099g | 0.359g | 0.335g | 0.010g | 1000mL |
回答下列问题。
(1)按物理性质,培养基可分为
(2)想要测定某一时期活菌数量,可选用
(3)此实验是如何防止污染的?
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【推荐2】没吃完的西瓜会盖上保鲜膜放入冰箱储藏。研究表明,有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液,研究细菌的种类和数量。
(1)配制的培养基一般都含有水、无机盐、____________ 。常采用____________ 法对培养基进行灭菌,灭菌前需将pH调至________________________ 。
(2)为了避免培养基污染,在培养过程中,需将平板____________ (填正置或倒置)。为了观察浸出液中微生物的种类和数量,采用____________ 法接种。接种时,实验操作应在酒精灯火焰附近进行的原因是__________________ 。
(3)将1m L西瓜浸出液稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1m L稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为26、28和27。据此可得出每升西瓜浸出液中的活菌数为____________ ,这种方法的统计结果比活菌的实际数目____________________________________ 。
(1)配制的培养基一般都含有水、无机盐、
(2)为了避免培养基污染,在培养过程中,需将平板
(3)将1m L西瓜浸出液稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1m L稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为26、28和27。据此可得出每升西瓜浸出液中的活菌数为
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【推荐3】回答下列问题
(1)科研人员利用腐烂的水果筛选产果胶酶的细菌,并对果胶酶进行分离纯化请回答:
通过以为_______ 唯一碳源的选择培养基,筛选出可降解果胶的细菌。观察筛选菌株的菌落的______________ (回答两点)等特征进行物种鉴定。
(2)将含有高产果胶酶的分解菌培养液进行适度离心后,_______ 即为产果胶酶菌株发酵产生的粗酶液。经初步纯化后,可通过凝胶色谱法进一步去除杂蛋白,在层析柱中相对分子质量较大的蛋白质移动速度_______ (填较快"或“较慢”)。
(3)生产果胶酶可从黑曲霉中提取,下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是________ (A.蛋白胨和酵母提取物培养基;B.尿素固体培养基;C.MS培养基;D.添加蔗糖的豆芽汁培养基)。
(4)果胶酶包括_________ 、果胶分解酶和_________ 。
(5)某一实验小组的同学,欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验,实验材料及用具齐全。请完善该实验小组的同学在制备固定化酵母细胞过程的步骤:
①配制氯化钙溶液时应用蒸馏水。
②海藻酸钠溶液应用________ 加热。
③海藻酸钠溶液必须________ 才能加入酵母细胞。
④注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应滴入氯化钙溶液中形成________ 。
(1)科研人员利用腐烂的水果筛选产果胶酶的细菌,并对果胶酶进行分离纯化请回答:
通过以为
(2)将含有高产果胶酶的分解菌培养液进行适度离心后,
(3)生产果胶酶可从黑曲霉中提取,下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是
(4)果胶酶包括
(5)某一实验小组的同学,欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验,实验材料及用具齐全。请完善该实验小组的同学在制备固定化酵母细胞过程的步骤:
①配制氯化钙溶液时应用蒸馏水。
②海藻酸钠溶液应用
③海藻酸钠溶液必须
④注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应滴入氯化钙溶液中形成
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【推荐1】为了调查某小区自来水的水质情况,研究小组对该小区自来水水样中的大肠杆菌进行了研究。回答下列问题:
(1)研究小组先采用平板划线法分离提纯自来水中的大肠杆菌,分离培养大肠杆菌可以使用___ (填“A.麦芽汁培养基”或“B.LB培养基”或“C.查氏培养基”)。在进行划线操作前灼烧接种环的目的是______ ,接种完成后灼烧接种环的目的是_______________ 。
(2)该研究小组再采用稀释涂布平板法对自来水中大肠杆菌数目进行测定,利用该方法测定活菌数目的原理是______ 。
(3)自来水中大肠杆菌的数目还可以采用滤膜法进行测定,将已知体积的自来水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养,然后根据培养基上______ 的数目,计算出水样中大肠杆菌的数量。伊红美蓝培养基从用途来看属于______ 培养基。
(4)大肠杆菌代谢产物中含有多种蛋白质,根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法是______ 。
(1)研究小组先采用平板划线法分离提纯自来水中的大肠杆菌,分离培养大肠杆菌可以使用
(2)该研究小组再采用稀释涂布平板法对自来水中大肠杆菌数目进行测定,利用该方法测定活菌数目的原理是
(3)自来水中大肠杆菌的数目还可以采用滤膜法进行测定,将已知体积的自来水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养,然后根据培养基上
(4)大肠杆菌代谢产物中含有多种蛋白质,根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法是
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【推荐2】回答下列与泡菜和腐乳的生产相关的原理及技术性问题。
(1)膳食中的绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿排出,只有在适宜的pH、温度和一定的微生物作用下,才会转变成致癌物______ 。测定泡菜中亚硝酸盐的含量常采用____________ ,因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺偶联成__________ 色化合物。
(2)大规模生产优质泡菜时,需先获得优质的乳酸菌种,若要从陈泡菜水中分离、纯化乳酸菌单菌落需在液体培养基中加入______ (填物质名称)。乳酸菌进行乳酸发酵时,首先将糖类转化为丙酮酸,再在乳酸脱氢酶的参与下将丙酮酸转化为乳酸。若要从乳酸菌中分离、纯化获得乳酸脱氢酶,可采用___________________ 法。判断上述方法纯化的蛋白质是否达到要求,还需要进行蛋白质纯度的鉴定,在鉴定的方法中,使用最多的是________________________ 。
(3)在腐乳制作时,要加盐腌制,主要目的之一是浸提毛霉中的_____________________ 酶。要制作出色香味俱全的腐乳,关键在于卤汤的配制,卤汤中酒的含量控制在________ %左右。
(4)毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈,在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙,其菌落直径分别为3.2cm、2.8cm、2.9cm,其菌落与透明圈一起的直径分别为3.7cm、3.5cm、3.3cm。应选择菌落______ (填甲、乙或丙)作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。
(1)膳食中的绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿排出,只有在适宜的pH、温度和一定的微生物作用下,才会转变成致癌物
(2)大规模生产优质泡菜时,需先获得优质的乳酸菌种,若要从陈泡菜水中分离、纯化乳酸菌单菌落需在液体培养基中加入
(3)在腐乳制作时,要加盐腌制,主要目的之一是浸提毛霉中的
(4)毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈,在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙,其菌落直径分别为3.2cm、2.8cm、2.9cm,其菌落与透明圈一起的直径分别为3.7cm、3.5cm、3.3cm。应选择菌落
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【推荐3】请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。
(1)将实验流程补充完整:A.___________ ;B.____________ 。
(2)凝胶色谱法的基本原理是根据_________________ 分离蛋白质,相对分子量小的蛋白质移动速度__________ 。
(3)上图是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加样示意图,正确的加样顺序是_______ 。
(4)鉴定蛋白质纯度常用的方法是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法,其中SDS的作用是______________ 。
(1)将实验流程补充完整:A.
(2)凝胶色谱法的基本原理是根据
(3)上图是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加样示意图,正确的加样顺序是
(4)鉴定蛋白质纯度常用的方法是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法,其中SDS的作用是
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