【推荐1】P24是HIV病毒颗粒的主要结构蛋白（大小约为26KD），是P24基因的表达产物。P24单克隆抗体在HIV感染的诊断、治疗等方面有重要意义，P24单克隆抗体的制备主要包括三个阶段：利用基因工程生产P24蛋白；利用细胞融合技术生产单克隆抗体；单克隆抗体活性的鉴定。请回答下列问题：
(1)提取HIV的总RNA，经________过程获得总cDNA。通过PCR技术可在总cDNA中专一性的扩增出P24基因的cDNA。
(2)在构建重组质粒时，需对质粒和P24基因的cDNA用BamHI和XhoI进行双酶切，双酶切的优点是________。研究发现，P24基因的cDNA缺乏这两种限制酶的识别序列。为此，在设计PCR引物时，需要________。
(3)将重组质粒（含卡那霉素抗性基因）导入宿主菌体细胞后，进行的部分操作及结果如下图所示。图中①②两处的接种方法________（填“相同”或“不同”）。蛋白凝胶分析结果图中，1为蛋白Marker，2为不含物质A的菌液，3为含物质A的菌液，实验结果说明P24较高的是________（填“2”或“3”），据此推测物质A的作用是________。

(4)用P24蛋白对小鼠以静脉注射的方式进行加强免疫3次，其目的是________。取免疫后小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞，用________促融，为选出能产生专一抗体的细胞，要从HAT培养基上筛选出杂交瘤细胞，然后稀释滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有________个细胞，然后筛选出抗体检测呈________（填“阳性”或“阴性”）的细胞进行克隆化培养；该克隆化培养细胞具有的特点为________。
(5)T细胞被HIV感染后，会与未被感染的T细胞发生融合，从而形成多核巨细胞，多核巨细胞不久死亡又释放出大量新病毒。多核巨细胞的数量可作为P24单克隆抗体活性鉴定的指标。请完善以下鉴定P24单克隆抗体活性的实验思路：
将未被感染的T细胞等分为三组，处理如下：
A组：HIV感染的T细胞+未被感染的T细胞+细胞培养液；
B组：HIV感染的T细胞+未被感染的T细胞+________；
C组：未被感染的T细胞+细胞培养液。

【推荐2】新型冠状病毒的遗传物质是单链RNA，这是它最核心、最准确的标志。新冠病毒感染人体之后，首先会在呼吸系统中进行繁殖，因此可以通过检测痰液、鼻咽拭子中的病毒核酸判断人体是否感染病毒。请回答下列问题：
（1）图示为以病毒的RNA为模板合成cDNA并扩增的过程，A过程为______，B过程需要用到______酶（写全称）、dNTP、引物等，其中dNTP的作用是____________，合成引物的前提是____________。

（2）科学界对单克隆抗体防治新冠病毒感染的作用寄予厚望。由中国科学院微生物研究所与上海君实生物医药科技股份有限公司等单位共同开发的重组全人源抗新冠病毒单克隆抗体注射液已进入临床试验。
抗新冠病毒单克隆抗体的制备思路为：向小鼠体内注射__________，提取免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选获得杂交瘤细胞，对得到的杂交瘤细胞还需要进行__________________，最后将杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到____________增殖，从培养液或小鼠腹水中提取大量的单克隆抗体。
（3）单克隆抗体最主要的优点是________________________。

【推荐3】肿瘤细胞可以表达CD47蛋白，并与吞噬细胞表面的信号调节蛋白a（SIRPa）结合，向吞噬细胞发出“别吃我”的信号，以逃脱机体免疫系统的攻击。因此阻断CD47/SIRPa信号，有望恢复吞噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用如图1。请回答有关问题：

   

(1)利用外源DNA、质粒制备含CD47基因的重组质粒。图1为含CD47基因的外源DNA、质粒的有关信息，EcoRⅠ、BamHⅠ、SalⅠ、XhoⅠ均为限制酶，Kanr、Tcr分别为卡那霉素抗性基因、四环素抗性基因。
①为了形成合适的重组质粒，应该选用BamHⅠ、XhoⅠ限制酶切割外源DNA和质粒DNA，原因是：a____；b____。
②重组质粒导入受体细胞的成功率很低，需利用含卡那霉素的培养基和含四环素的培养基进行筛选才能获得导入成功的受体细胞。结合图1所获得的重组质粒分析，所选受体细胞在上述培养基中的生长状况为____。
(2)图2是利用上述基因工程获得的CD47蛋白制备相应单克隆抗体及相关治疗效果检测实验过程。

   

①图中步骤a的目的是____。获得细胞A的器官通常是____。
②图中过程b可以采用的方法有____（答出一点），体现了细胞膜的____的结构特点。
③图中“筛选”一般需要运用_____种方法，目的是____。
④图3中共同培养吞噬细胞和肿瘤细胞，在实验组加入不同浓度的抗CD47抗体，测定吞噬细胞的吞噬指数（吞噬指数与吞噬细胞所吞噬的肿瘤细胞数量成正相关），实验结果如图3所示。该实验结果对临床治疗肿瘤有何指导意义？____。

   

【推荐1】P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变。科学家研究发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用，请回答下列问题：
(1)切下新鲜的肝癌组织，在模拟了人体____________的成分配制的培养液中培养，在培养液中还加入一定量的抗生素，其目的是______________________。
(2)获取P53基因的方法通常有_________________________________________。
(3)将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合，将混合物滴加至肝癌细胞上，轻轻混匀。最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞。脂质体在这个操作中的作用是__________________________。
(4)为证明P53基因有抑癌作用，需将两种细胞接入多孔板中，并从次日开始检测每孔的细胞总数，绘制成如右图所示的生长曲线。请分析两条曲线分别是哪种细胞，曲线1是_________细胞，曲线2是___________细胞。

【推荐2】研究人员为治疗糖尿病提出了下图所示的方法。回答下列问题：

(1)为保持细胞正常的二倍体核型，图中分离培养的体细胞一般选用________的细胞。核移植的受体细胞一般选用处于M Ⅱ期的卵母细胞，进行相关显微操作时，一般用微型吸管一并吸出________。
(2)图中所获得的ES细胞是从________中分离而来。利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是________。
(3)重组细胞B进行定向诱导分化成功的标志是________。与异体移植相比，该治疗糖尿病的方法的突出优点是________。

【推荐3】Vero细胞源自非洲绿猴肾细胞，具有易于培养、稳定性强、增殖能力强等特性，在医药卫生领域有广泛的应用。回答下列问题：
(1)进行Vero细胞体外培养时，培养液中需要有糖，其作用是______。若采取无血清培养，则基本培养基中需添加一些促进______的物质。培养细胞时，通常将培养瓶置于含95%空气加5%CO₂的混合气体的培养箱中培养，CO₂ 的主要作用是________。
(2)Vero细胞的分裂方式是______。贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为_______。 要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，可使用____酶。
(3)有研究者采取“微载体培养法”培养Vero细胞，即将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入培养瓶中，这样可以___________，也有利于空气交换，可实现细胞的高密度培养。
(4)Vero细胞在医药卫生领域的应用有_____________（答出1点即可）。