【推荐1】研究表明，99．7%的宫颈癌都是由于宫颈癌病毒（HPV）导致的，注射HPV疫苗能有效预防宫颈癌的发生，疫苗的主要成分是该病毒HPV基因的L1衣壳蛋白。科学家尝试利用转基因番茄来生产宫颈癌疫苗，过程如下图所示。请据图回答问题。

(1)宫颈癌病毒的L1衣壳蛋白进入动物体内，能引起机体产生特异性免疫反应。宫颈癌病毒的L1衣壳蛋白在免疫中称为________。
(2)将宫颈癌病毒HPV基因导入受体细胞前，利用PCR技术对其进行扩增，需在PCR扩增仪中加入缓冲液、目的基因、_________（至少3个），若在PCR扩增仪中加入模板DNA分子100个，则经过30次循环后，DNA分子数量将达到_________个。
(3)下图中将HPV基因插入质粒，可以只用EcoRⅠ酶同时切割质粒和HPV基因，也可以使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时酶切质粒和HPV基因，后一个方法的优点在于可以防止__________________。

(4)构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是______________。
(5)番茄组织细胞具有_________，因此，可以利用植物组织培养技术将导入目的基因的番茄组织细胞培育成完整植株。
(6)利用__________技术可以检测目的基因是否成功导入番茄。

【推荐3】植物细胞壁中含大量不能被猪消化的多聚糖类物质，如半纤维素多聚糖、果胶质（富含半乳糖醛酸的多聚糖）等。研究人员通过现代生物技术培育出转多聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如图所示，图中neo为标记基因，回答下列问题：
      
(1)图中获取目的基因采用的限制酶是BamHI和BglⅡ，但是处理后的目的基因后并不能避免自身环化，原因是________。处理质粒应采用的限制酶是________。
(2)图中通过PCR技术扩增目的基因的前提是_________，以用于制备PCR扩增需要的引物，引物的作用是________。基因工程的核心环节是图中的________（填标号）。
(3)如果要一次性获得更多的转基因猪，可在囊胚期对早期胚胎进行胚胎分割，操作时要注意_________。获得的转基因猪中的manA主要在_________中进行表达。

【推荐1】阅读如下材料：
资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
资料乙：T₄溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T₄溶菌酶的基因进行了改造，使其表达的T₄溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T₄溶菌酶的耐热性。
资料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。
回答下列问题：
（1）资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的____________中，常用_____________法。在培育有些转基因植物时，除了常用的农杆菌转化法，还有一种十分简便经济的方法是_________法。
（2）资料乙中所采用的技术属于_________工程范畴。
（3）资料丙属于_________工程的范畴。兔乙应与兔甲是同种的、_________的母兔，胚胎移植能成功的生理学基础是早期胚胎未与母体建立联系，处于_________状态。
（4）在体外进行早期胚胎细胞培养时，为了达到无菌无毒的目的，需要加入_______________；还需要__________________，从而防止有害的细胞_________积累对细胞自身造成危害。

【推荐2】下图为动物细胞培养的基本过程示意图，请回答下列问题：

(1)容器A中放入的一般是健康幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞________、易于培养。
(2)将B瓶中的细胞悬液转入C瓶进行的初次培养称为________。动物细胞培养需要提供O₂和CO₂等气体环境，O₂是____________所必需的，CO₂的作用主要是____________。当出现接触抑制时，就需要对细胞进行分瓶，分瓶后的细胞培养称为________。
(3)下图表示血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。

①据图可知，有无添加血清对培养_______细胞的影响较大。
②在探究物质X对正常细胞增殖的影响时，必须采用有血清培养，据图分析原因是________________。
(4)干细胞培养成功是动物细胞培养领域重大的成就之一，在一定条件下，干细胞可以________成其他类型的细胞。干细胞包括________干细胞和成体干细胞等。

【推荐3】肝纤维化与肝细胞癌的发生密切相关。研究发现活化的人肝星状细胞会大量合成和分泌Ⅰ型胶原蛋白沉积在肝小叶的窦间隙，大量产生Ⅰ型胶原蛋白是肝星状细胞活化的标志之一。人Ⅰ型胶原蛋白由4条肽链组成，其中两条由COL1A1基因编码。为了建立能直观反映I型胶原蛋白表达量改变的细胞模型，本研究旨在通过基因工程技术构建人COL1A1和绿色荧光蛋白（EGFP）融合基因表达载体，并将其导入到LX-2细胞（永生化的人肝星状细胞）中，为抗纤维化药物研发建立可视化的报告系统。

(1)研究过程中，应将LX-2细胞置于含______的气体条件下培养。
(2)在构建基因表达载体过程中，所需要的工具酶有______（请写出2点）；其中Kozak序列能增强EGFP基因的表达，已知EGFP基因的α链为转录的模板链，则应将图2中EGFP基因的______（“A”或“B”）端与Kozak序列连接。
(3)已知LX-2细胞可被细胞因子TGF-β1活化，激活COL1A1基因表达，成为肝纤维化研究常见的细胞模型。科学家为验证LX-2细胞能通过EGFP表达来反映表达COL1A1能力的改变，进而筛选抗纤维化药物。对实验进行了分组处理，对照组为无诱导处理的LX-2细胞，模型组为______，实验组为______（实验材料：LX-2细胞、TGF-β1、已知具有潜在抗肝纤维化作用的药物青蒿琥酯）。实验结束后，检测各组LX-2细胞荧光强度和相关基因（COL1A1和EGFP）的表达水平，二者相互印证。若实验组的荧光强度均低于模型组的荧光强度，实验结果说明______。

【推荐1】结合受精过程中精子和卵细胞的特点，分析早期胚胎发育过程中营养物质的来源是什么_______。

【推荐2】科学家利用白色品系小鼠a与黑色品系小鼠b培育出了嵌合体小鼠c，流程如图所示。请回答：

（1）胚胎A处于___________期，其中聚集在一端个体较大的细胞称为____________，将来发育成鼠的各种组织。
（2）收集胚胎B时，可用特制的装置从黑色品系小鼠b的子宫内获得，该过程称为_____________；也可从黑色品系小鼠b体内取出卵子，通过_____________后进行早期胚胎培养获得。
（3）重组胚胎C通过_____________技术移入另一只母鼠的子宫内，受体母鼠对移入的外来胚胎基本不发生_____________反应，一段时间后，产下嵌合体小鼠c。
（4）如果产下的嵌合体小鼠c的大部分皮肤是白色，原因可能是________________。

【推荐3】治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义，流程如下。请据图回答问题：

(1)②过程采用的是胚胎工程中的________________________技术，该过程中需要用到________________________________（发育培养液、合成培养基）。
(2)囊胚阶段的细胞分为____________________和内细胞团，其中内细胞团将来发育成_________________________。
(3)胚胎干细胞可以来自早期胚胎或___________________，在培养液中加入__________________________，则能诱导胚胎干细胞向不同类型组织细胞分化。
(4)该过程____________(是、否)体现了动物细胞核具有全能性，原因_____________。

【推荐1】随着动物细胞工程技术的不断成熟，使通过核移植技术诱导重组体细胞增殖分化获得健康的组织器官成为了可能，这为等待器官移植的非遗传病患者带来了希望。下图为通过该技术获得相应组织器官并进行移植的过程，请回答下列问题：

（1）图中的供体二为___________（填“患者”或“健康者”），细胞①应为___________细胞。
（2）②为重组细胞，其经过A___________（技术手段）形成囊胚，其中④细胞在形态上具有___________特征。
（3）B过程需要在培养基中加入___________才能获得相应的组织器官。图中B→C过程___________（填“能”或“不能”）体现细胞的全能性，其理由是______________________。
（4）研究表明：已痊愈的新型肺炎患者体内会出现相应抗体，一般抗体的作用会持续半年或者更长时间。若现已从某位志愿者体内获得一定量的B淋巴细胞，实验室有保存的小鼠骨髓瘤细胞，为获得产生相应抗体的杂交瘤细胞，请写出关键过程_________________________________。

【推荐2】近年来，随着基因工程和分子生物学的跨越式发展，干细胞领域研究迅速兴起为21世纪的研究热点，并两次入选世界十大科技新闻。如图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答：

（1）胚胎干细胞是从___________或_______________中分离得到的一类细胞。
（2）哺乳动物的胚胎干细胞在形态上表现为体积小，_________大，_________明显；在功能上，具有_________________。在体外培养条件下，培养液中加入_______________因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。
（3）在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因________________的结果。
（4）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上图中不能选用作为供体的细胞是成熟的__________，其原因是__________________________________。
（5）若某药物可抑制肝肿瘤细胞DNA的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的___________期。

【推荐3】请据图分析回答下列问题：

（1）图中的胚胎干细胞（ES细胞）可以从________或________中分离获取。
（2）过程Ⅰ是将胚胎干细胞置于经γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞构成的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质培养，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层能提供胚胎干细胞增殖所需的________，加入抗生素是为了______。该过程对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。
（3）过程Ⅱ是将带有遗传标记的ES细胞注入囊胚的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有________的特点。在哺乳动物早期胚胎发育过程中，囊胚的后一个阶段是___________________。
（4）过程Ⅲ是培育转基因小鼠，将获得的目的基因导入胚胎干细胞之前需构建基因表达载体，目的是____________。
将构建好的表达载体导入胚胎干细胞最常用的方法是____________。
（5）该研究中，包含的生物技术有__________和_________（至少写出两种）。