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题型:非选择题-实验题 难度:0.65 引用次数:63 题号:21811998
果胶酶在果汁提取和果酒澄清等过程中发挥着至关重要的作用。某科研小组分离筛选出了在低温下生长较快的酵母菌株,并通过实验检测了温度对该菌株产生的果胶酶活性的影响,下面是实验的大致过程,请回答下列相关问题。
第一:粗酶液的提取:将活化菌株以2%的接种量接种至产酶培养基中,15 ℃发酵2天,离心取上清液作为粗酶液,用于后续实验。
第二:用“第一”中粗酶液探究温度对该菌株产生的果胶酶活性的影响。
(1)“第一”操作中在15 ℃的温度条件下培养的原因是____,活化菌株是指____的菌株。
(2)“第二”操作中,设置了对照,设置的思路是:____。实验操作时,首先将获得的粗酶液、底物缓冲液置于对应温度的水浴环境下1 h,然后再混合共同进行酶解反应,测定果胶酶活力。这样做的目的是____。缓冲液的作用是____,以排除其对实验结果的干扰,并达到最佳实验效果。
(3)若将该菌种产生的果胶酶用于工业生产,可采用____进行固定,这样处理的好处是____

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【推荐1】琼脂是一种多糖类物质,由于很少有微生物能将其降解而成为配制固体培养基常用的凝固剂之一。某实验室在处理一批已进行过微生物培养的废弃固体培养基时发现,培养基上的微生物几乎全部死亡,但在其中一个培养基上存在一个正常生长的细菌菌落,该实验室研究人员对此提出“该种细菌能利用琼脂”的假说,据此回答问题:
(1)若要证明该假说的正确性,应该在配制培养基时,选择以______为唯一碳源的固体培养基进行培养,配制好的培养基需通过_____________法进行灭菌。
(2)通过实验证明该假说是正确的,并且发现该琼脂分解菌能分泌脱色酶,能分解糖蜜发酵废液的黑褐色色素。
①欲从获得的菌种中分离出分解黑褐色色素能力强的细菌,可在培养基中加入______,采用的接种方法是________。适宜条件下培养一段时间,发现菌落周围形成圆形凹穴和透明圈,形成的原因是________________,应选择凹穴大且周围透明圈大的菌落进行扩大培养。
②由于该菌种在自然界中极为稀少,欲长期保存该菌种,可以采用_________的方法,具体操作是在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后_______,然后将_____________________,与甘油充分混匀后,放在-20°C的冷冻箱中保存。
(3)实验中需要及时灭菌或消毒,才能保证实验结果的准确性,下列各项可以使用干热灭菌的是______。(填标号)
A.实验者的皮肤        B.培养基        C.吸管        D.金属用具          E.玻璃棒     F.培养皿
2020-11-11更新 | 296次组卷
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【推荐2】水污染是全球性的环境问题,微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物,PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA. PVA 与碘作用时能产生蓝绿色复合物,当PVA被分解时蓝绿色复合物消失,形成白色透明斑。
(1)要从土壤中筛选出能高效分解PVA的细菌,应采用以_______________作为唯一碳源的选择培养基,实验中还应设置对照组。将菌液稀释相同的倍数,对照组培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,从而说明选择培养基具有筛选作用。
(2)要测定土壤稀释液中微生物的数目,可在显微镜下用_________直接计数。若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后,取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面,测得菌落数的平均值为160 个,空白对照组平板上未出现菌落。则100 mL原菌液中有PVA分解菌_________个, 该方法的测量值与实际值相比一般会_________________(填“偏大”“偏小”或“相等”)。
(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌,培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入____________用于鉴别PVA分解菌。要比较不同菌株降解PVA能力的大小,用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株,一定时间后,通过测定_____________来确定不同菌株降解PVA能力的大小。
2021-05-28更新 | 166次组卷
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【推荐3】乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,在工业生产中具有重要价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下图所示。回答下列问题:

(1)用于培养产乳糖酶的微生物L的培养基在接种前需要通过_____________法进行灭菌。研究人员通常根据菌落的___________特征来初步区分不同种的微生物,统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次,直到____________时。
(2)为了得到产乳糖酶微生物L的单菌落,可用____________法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。对于需要长期保存的菌种,可以采用_____________的方法。
(3)采用凝胶色谱法分离纯化其中的乳糖酶时﹐比乳糖酶相对分子质量大的蛋白质先被洗脱分离出来,原因是_____________
(4)工业生产中往往将乳糖酶固定在_____________(填“溶于水”或“不溶于水”)的载体上﹐将其装入反应柱内后,需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱﹐以除去未吸附的乳糖酶。一般来说,酶不适合采用包埋法固定化,原因是_____________
2023-02-09更新 | 741次组卷
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